黄凡
- 作品数：4 被引量：48H指数：3
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学理学更多>>
- 抗氧化型枯草杆菌碱性蛋白酶高产工程菌的构建——Ⅰ.抗氧化型碱性蛋白酶的提纯及其主要性质的研究被引量：2
- 1996年
- 枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)B135工程菌能产生抗氧化型碱性蛋白酶,粗酶经硫酸铵分级沉淀,CM-52层析,Sephadex G-100层析,得到凝胶电泳均一样品,比活达到1700U/mg,是粗酶比活的7.69倍.该酶在60℃时酶活力最高,最适pH为10.2,在50℃时,温浴10min后,酶活降低到原来的50%.该酶受1M H_2O_2作用20min后。
- 黄凡李心治张宇汤懋竑章银梅
- 关键词：碱性蛋白酶枯草芽孢杆菌工程菌株
- 枯草杆菌(Bacillus subtilis)产果胶酶的研究 Ⅰ.菌种选育、鉴定及其酶学特征分析被引量：22
- 2000年
- 分离到 1株高产果胶酶菌株 ,经形态、生理以及生化指标鉴定 ,确认为枯草杆菌 (Bacillussubtilis)并命名为枯草杆菌 1 8。发酵液用 90 %硫酸铵沉淀 ,透析后的粗酶经CM - 5 2柱层析 ,收集酶峰 ,再过ShephadexG - 1 0 0得部分纯化酶。该酶最适pH9.0 ,在 pH9～ 1 1稳定 ,最适反应温度 6 0℃ ,5 0℃加热 5 0min保存 6 0 %酶活 ,6 0℃加热 5 0min酶活则保存 1 0 %。酶的等电点 ( pI) 4.0 ,分子量 31 0 0 0。该酶对苎麻脱胶有较好的特异性。
- 章银梅李心治黄凡张宇范树田
- 关键词：枯草杆菌果胶酶菌种选育酶学性质
- 血红蛋白基因在枯草芽孢杆菌中的表达及其作用的研究被引量：20
- 2000年
- 革兰氏阴性菌Ｖｉｔｒｅｏｓｃｉｌｌａ的血红蛋白与氧结合力强，能降低该菌需氧量。将该血红蛋白的结构基因（Ｖｇｂ）连接到枯草杆菌质粒ｐＡＫ４的β－内酰胺酶基因（ｂｌａ）启动子下（框架正确），构建了重组质粒ｐＡＶ，并将此质粒先转化至枯草杆菌ＤＢ １０４，继而又转化到枯草杆菌碱性蛋白酶工程菌Ｇ３３１和产木聚糖酶枯草杆菌Ｂ５３。经酶切和电泳分析显示转化株的质粒ＤＮＡ含有大小与 Ｖｇｂ相同的电泳带，又经非放射性同位素标记杂交实验，证明为含Ｖｇｂ基因的克隆，并采用一氧化碳鼓泡法测出血红蛋白的表达。在试管和三角瓶发酵实验中，在同一培养条件下碱性蛋白酶活性和木聚糖酶活性有所提高，为获得枯草杆菌发酵中降低需氧量，提高产量研究开辟新途径。
- 章银梅李心治黄凡党本元范树田汤懋竑
- 关键词：血红蛋白透明颤菌枯草杆菌基因表达
- 抗氧化型枯草杆菌碱性蛋白酶高产工程菌的构建及其酶学特性被引量：5
- 2000年
- 通过基因重组、定点突变、基因整合和诱变等手段构建了一个抗氧化型枯草杆菌碱性蛋白酶高产工程菌株B135,试管及三角瓶发酵结果显示 ,酶产量是 10 0 4 8U /ml,是2 70 9碱性蛋白酶产量的 55% ,抗氧化型碱性蛋白酶浓度是 5.9mg/ml。该酶与 1mol/L过氧化氢作用 15min后 ,酶活保存 90 %以上 ,而 2 70 9则保存 12 % ,说明B135碱性蛋白酶是抗氧化的。
- 李心治章银梅张宇黄凡汤懋竑
- 关键词：碱性蛋白酶枯草杆菌基因整合
