章银梅 作品数:18 被引量:125 H指数:6 供职机构: 中国科学院遗传与发育生物学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 化学工程 农业科学 更多>>
透明颤菌血红蛋白基因在革兰氏阳性菌中的克隆和表达 赵晓瑜 章银梅 马丽杰等 该课题通过构建新的携带血红蛋白基因质粒,将透明颤菌的Vgb基因在枯草芽孢杆菌中有效表达,进而使菌株获得耐低氧、高酶活的特性,并为革兰氏阳性菌启动子对透明颤菌Vgb的调控机理提供了实验依据。该研究达国内领先水平。关键词:关键词:透明颤菌血红蛋白基因 基因工程 革兰氏阳性菌 克隆 基因表达 枯草杆菌(Bacillus subtilis)的木聚糖酶的性质及其基因的克隆和表达 被引量:1 1999年 童静 李心治 章银梅关键词:枯草杆菌 木聚糖酶 重组质粒 蛋白水解 酶基因 枯草杆菌(Bacillus Subtilis)R25对A蛋白基因表达的影响 1999年 张尤新 章银梅 王桂忱 汤懋竑关键词:基因表达 枯草杆菌 胞外蛋白酶 A蛋白 蛋白酶活性 地衣芽孢杆菌H-1的鉴定及其产木聚糖酶性质的研究 被引量:13 1996年 本实验室分离到一株木聚糖酶高产菌,经形态、生理以及生化鉴定,确认为地衣穿孢杆菌,定名为H-1。对H-1的胞外木聚糖酶进行初步的研究。从碳源利用方面,认为 H-1的木聚糖酶为组成型合成。木聚糖和纤维二糖对它有诱导作用,而木糖和葡萄糖对酶的产生有阻抑作用。对酶解产物分析表明,有小分子糖产生、但并非都是单糖。H-1胞外木聚糖酶经60%硫酸铵沉淀,过DEAE-50柱,以及超过滤,得到了部分纯化酶。该酶作用的最适pH为7.6,在pH4~5范围较为稳定;最适温度为50℃; 70℃25min则完全失活。米氏常数为10.42×10^(-3)g/ml,最大反应速度为0.345μmol/min。2mM Ag^+使酶活增加了1.5倍,2mM EDTA抑制了 22%的酶活性,而2mM Cu^(++)则使酶完全失活。 刘巍 范树田 李心治 李明凤 汤懋竑 章银梅关键词:地衣芽孢杆菌 木聚糖酶 发酵 油菜叶绿体定点转化载体的构建及其杀虫性 被引量:24 2000年 首先从油菜叶绿体基因组克隆得到包含rps7基因在内的 1.0kbDNA片段和包含ndhB基因在内的 2 .4kbDNA片段 ,同时从苏云金芽孢杆菌质粒上克隆得到一个全长 3.5kb的Bt杀虫蛋白基因cry1Aa。然后以rps7和ndhB基因作为同源重组片段 ,成功构建了包含Bt杀虫蛋白基因和aadA抗壮观霉素基因的油菜叶绿体定点转化载体 ,并对克隆菌体总蛋白进行了生物杀虫试验。结果表明 ,Bt杀虫蛋白基因能够得到表达 ,并且对棉铃虫幼虫有很强的毒杀作用。含抗虫基因的油菜叶绿体转化载体的构建在国内外为首次报告 。 侯丙凯 张中林 周奕华 章银梅 沈桂芳 陈正华关键词:油菜 叶绿体转化 杀虫试验 血红蛋白基因在枯草芽孢杆菌中的表达及其作用的研究 被引量:20 2000年 革兰氏阴性菌Vitreoscilla的血红蛋白与氧结合力强,能降低该菌需氧量。将该血红蛋白的结构基因(Vgb)连接到枯草杆菌质粒pAK4的β-内酰胺酶基因(bla)启动子下(框架正确),构建了重组质粒pAV,并将此质粒先转化至枯草杆菌DB 104,继而又转化到枯草杆菌碱性蛋白酶工程菌G331和产木聚糖酶枯草杆菌B53。经酶切和电泳分析显示转化株的质粒DNA含有大小与 Vgb相同的电泳带,又经非放射性同位素标记杂交实验,证明为含Vgb基因的克隆,并采用一氧化碳鼓泡法测出血红蛋白的表达。在试管和三角瓶发酵实验中,在同一培养条件下碱性蛋白酶活性和木聚糖酶活性有所提高,为获得枯草杆菌发酵中降低需氧量,提高产量研究开辟新途径。 章银梅 李心治 黄凡 党本元 范树田 汤懋竑关键词:血红蛋白 透明颤菌 枯草杆菌 基因表达 抗氧化型枯草杆菌碱性蛋白酶高产工程菌的构建及其酶学特性 被引量:5 2000年 通过基因重组、定点突变、基因整合和诱变等手段构建了一个抗氧化型枯草杆菌碱性蛋白酶高产工程菌株B135,试管及三角瓶发酵结果显示 ,酶产量是 10 0 4 8U /ml,是2 70 9碱性蛋白酶产量的 55% ,抗氧化型碱性蛋白酶浓度是 5.9mg/ml。该酶与 1mol/L过氧化氢作用 15min后 ,酶活保存 90 %以上 ,而 2 70 9则保存 12 % ,说明B135碱性蛋白酶是抗氧化的。 李心治 章银梅 张宇 黄凡 汤懋竑关键词:碱性蛋白酶 枯草杆菌 基因整合 抗氧化型枯草杆菌碱性蛋白酶高产工程菌的构建——Ⅰ.抗氧化型碱性蛋白酶的提纯及其主要性质的研究 被引量:2 1996年 枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)B135工程菌能产生抗氧化型碱性蛋白酶,粗酶经硫酸铵分级沉淀,CM-52层析,Sephadex G-100层析,得到凝胶电泳均一样品,比活达到1700U/mg,是粗酶比活的7.69倍.该酶在60℃时酶活力最高,最适pH为10.2,在50℃时,温浴10min后,酶活降低到原来的50%.该酶受1M H_2O_2作用20min后。 黄凡 李心治 张宇 汤懋竑 章银梅关键词:碱性蛋白酶 枯草芽孢杆菌 工程菌株 高粱雄性不育系热激前后线粒体的变化与育性的关系 被引量:18 2000年 高粱雄性不育系3197A(3A)在花粉母细胞期进行热激处理后由不育变为可育。提取其处理小穗线粒体用流式细胞仪计数进行分析。结果发现经热激处理后,3A不育系的线粒体数目由1.55×106个/mg鲜穗增加至7.1×106/mg。同时对热激处理后3A的花粉育性及同工酶进行了研究,发现热激后3A的花粉粒变的饱满并可被I2朘I 溶液染色,其细胞色素氧化酶和过氧化物酶的电泳酶谱中出现与保持系3B一致的酶带。 王俐 祁新红 刘根齐 章银梅 陈建南关键词:细胞质雄性不育 热激 线粒体 育性恢复 热休克对于高粱细胞质雄性不育系线粒体数目及其育性的影响(英文) 2000年 The mitochondria of anther at pollen mother cell stage of cytoplasmic male sterile (CMS) line 3197A in Sorghum were extracted after heat shock. The number of mitochondria was measured with now cytometen and the isoenzymes in mitochondria were analyzed by PAGE combined with staining for enzyme activity. The result of quantity measurement of mitochondria showed that the number of mitochondria in CMS line 3197A increased greatly up to 4.5 folds after heat shock. The analysis of isoenzymes also demonstrated that the type of isoenzymes in CMS line was in accordance with the maintainer line. The study first showed the change of the quantity of mitochondria after heat shock and the relationship between this change and discussed the fertility in sorghum. 王俐 章银梅 等关键词:热休克 高粱 细胞质雄性不育系 育性