卢颖
- 作品数：19 被引量：55H指数：4
- 供职机构：辽宁医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目辽宁省科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学电气工程更多>>
- 人防御素-5基因毕赤酵母表达载体的构建及鉴定被引量：1
- 2010年
- [目的]构建人防御素5(HD-5)基因的毕赤酵母表达载体并加以鉴定。[方法]采用PCR技术从人cDNA文库中扩增HD-5基因片段,将HD-5基因扩增产物和毕赤酵母表达载体pPICZαA用EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切后连接构成重组质粒,然后转化到E.coliTop10中,筛选阳性克隆,并进行PCR、酶切和序列鉴定。[结果]重组质粒经酶切获得HD-5基因片段大小正确,经序列测定证实HD-5基因正确插入pPICZαA中。[结论]成功构建人防御素5基因的毕赤酵母表达载体。
- 李华卢颖吴囡
- 关键词：毕赤酵母
- 小干扰 RNA 表达质粒沉默△Np73 对人乳腺癌细胞 MDA-MB-231增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨靶向△Np73的小干扰RNA表达质粒转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231对其增殖和凋亡活性的影响。方法:构建△Np73小干扰表达质粒,脂质体法转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231;荧光显微镜下观察转染细胞绿色荧光蛋白表达,计算转染效率;实时荧光定量PCR检测细胞转染质粒后△Np73和TAp73 mRNA的表达;共转染pcDNA3-HA/DNp73α表达质粒与△Np73小干扰质粒,Western blot检测细胞转染后△Np73和TAp73表达;CCK-8法检测转染质粒后细胞生长抑制率;caspase 3活性分光光度法检测转染质粒并应用阿霉素处理后细胞的凋亡水平。结果:成功构建并转染△Np73小干扰表达质粒,转染效率达60%。△Np73小干扰质粒转染细胞能有效抑制内源性△Np73 mRNA和外源性△Np73蛋白表达,对TAp73无显著抑制作用。经△Np73质粒干扰的细胞增殖活性显著下降,与空白对照组相比差异显著,阿霉素诱导△Np73质粒转染细胞凋亡水平增加,与阴性对照组相比有显著差异。结论:△Np73小干扰RNA表达质粒能显著降低MDA-MB-231细胞中△Np73 mRNA及蛋白的表达,抑制细胞生长增殖,增强其被阿霉素诱导的凋亡水平,表明靶向沉默△Np73可能为未来人乳腺癌的治疗提供了一个新的策略。
- 卢颖王阳段思王爽朱辰杰李淑华张佩
- 关键词：MDA-MB-231RNA干扰基因沉默乳腺癌
- 医学微生物学双语教学模式的探索与实践被引量：2
- 2011年
- 教研室针对五年制英语班开展医学微生物学双语教学实践多年,在教材选用、师资培养、优化双语教学方法与手段等方面进行了诸多尝试,旨在提高医学微生物学双语教学质量,寻找合适医学微生物学的双语教学模式。
- 卢颖金旭鹏张佩吴学敏
- 关键词：医学微生物学双语教学教学方法
- 人防御素-5基因原核表达载体pRSET-A的构建被引量：1
- 2008年
- 目的利用分子生物学技术和方法将pRSET-A质粒改建为带有人α-防御素5(HD-5α)基因的新型表达载体pRSET-HD-5α。为大量生产和提纯具有生物活性人防御素5抗菌肽的研究提供实验基础。方法PCR技术,以设计的引物P1/P2从cDNA文库中扩增人α-防御素5基因片段,并将扩增出来的目的基因和pRSET-A质粒用BamHⅠ和EcoRI双酶切后连接构成重组质粒,然后转化大肠杆菌DH-5α,筛选阳性克隆。最后对PCR及酶切鉴定含有目的基因的克隆进行测序和电泳。结果获得α-防御素-5基因片断大小正确,经测序证明其碱基序列为编码目的基因的正确序列;电泳结果证明已将此片段克隆到pRSET-A内。结论成功构建了HD-5α基因的新型表达载体pRSET-A/HD-5α。
- 吴学敏李会单颖卢颖佟伟董颖
- 关键词：克隆
- 针对留学生的医学微生物学教学体会与探讨被引量：6
- 2010年
- 医学微生物学是医学院校各专业的一门重要基础课程,也是一门较难讲解的课程,针对留学生尤为如此。针对我校留学生在医学微生物学教学中出现的问题,在如何克服语言障碍、选择教材和教学内容、优化教学方法与手段、严格教学管理和考核制度等方面我们做了诸多尝试,现将我们的一些体会和经验与各位同仁共同探讨,以期提高留学生医学微生物学教学水平。
- 卢颖
- 关键词：医学微生物学留学生教学方法与手段教学体会
- pGAPZαA/HD5酵母表达载体的构建被引量：4
- 2009年
- 目的利用分子生物学技术和方法将pGAPZαA质粒改建为带有人防御素5(HD5)基因的新型表达载体pGAPZαA/HD5,为大量生产和提纯具有生物活性人防御素5抗菌肽的研究提供实验基础。方法PCR技术,以设计的引物P1/P2从克隆载体pMD18-T/HD5中扩增人防御素5基因片段,并将扩增出来的目的基因和pGAPZαA质粒用EcoRI和XbaI双酶切后连接构成重组质粒,然后转化至E.coliTop10感受态细胞,筛选阳性克隆。最后对PCR及酶切鉴定含有目的基因的克隆进行测序和电泳。结果获得HD5基因片断大小正确,经测序证明其碱基序列为编码目的基因的正确序列;电泳结果证明已将此片段克隆到pGAPZαA内。结论成功构建了HD5基因的新型表达载体pGAPZαA/HD5。
- 吴学敏单颖李华卢颖佟伟张轶博李会
- 关键词：克隆毕赤酵母
- 案例教学法在医学微生物学教学中的运用被引量：17
- 2010年
- 在医学微生物学教学中采用案例教学法,重点在于设计合理的案例,提出合适的问题以及对问题进行的讨论。该教学方法激发了学生的学习兴趣,也调动了教师的创造性思维,有利于培养学生分析问题和解决问题的能力。
- 张佩卢颖吴学敏
- 关键词：案例教学法医学微生物学教学
- 结核杆菌MTC28基因原核表达载体构建
- 2009年
- 佟伟李宏伟卢颖吴学敏
- 关键词：结核杆菌重组质粒
- 人轮状病毒外衣壳糖蛋白VP7基因毕赤酵母重组表达系统的构建被引量：3
- 2010年
- [目的]构建人轮状病毒糖蛋白VP7基因毕赤酵母表达系统。[方法]构建好的毕赤酵母重组表达质粒VP7-pPICZαA经SacⅠ线性化后应用电转化法转化毕赤酵母菌株GS115感受态中,Zeocin平板筛选,PCR鉴定转化子,MDH和MMH平板鉴定Mut表型。[结果]线性化的重组质粒VP7-pPICZα成功转化进入毕赤酵母感受态中,PCR鉴定结果与预期相符,表型确定为Mut+。
- 卢颖佟伟单颖张轶博吴囡董颖李华吴学敏
- 关键词：轮状病毒VP7基因毕赤酵母
- 人防御素5基因毕赤酵母重组表达系统的构建被引量：1
- 2010年
- [目的]构建人防御素5(HD5)基因毕赤酵母表达系统,为进一步表达HD5基因提供理论依据和实验基础。[方法]构建好的毕赤酵母重组表达质粒pGAPZαA/HD5经SacⅠ线性化后应用LiCl法转化毕赤酵母菌株GS115感受态,Zeocin平板筛选,PCR鉴定转化子。[结果]线性化的重组质粒pGAPZαA/HD5成功转化进入毕赤酵母感受态,PCR鉴定结果与预期相符。[结论]成功构建HD5基因毕赤酵母表达系统。
- 吴学敏卢颖单颖佟伟
- 关键词：表达质粒毕赤酵母
