沈晗
- 作品数:62 被引量:174H指数:6
- 供职机构:广东药科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 一株具有溶磷、产铁载体、耐重金属特性的促生菌及其应用
- 本发明公开了一株具有溶磷、产铁载体、耐重金属特性的促生菌及其应用。本发明提供的促生菌为木糖氧化无色杆菌L451,该菌株已于2021年9月24日保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为GDMCC NO:61951。L45...
- 刘丽辉沈晗王欣雨姚秀琪陈艳丽
- p53蛋白参与NGF诱导的PC12细胞周期阻滞被引量:1
- 2004年
- 通过观察不同营养状况下NGF诱导PC12细胞发生周期阻滞过程中p53蛋白水平的变化,探讨p53在PC12细胞周期阻滞中可能的作用机制.用流式细胞术检测细胞周期;Westernblot检测p53和p21WAF1/CIP蛋白水平.结果显示1%FBS(FatalBovineSerum)和50μg/LNGF(NerveGrowthFactor)均可诱导PC12细胞发生细胞周期阻滞.在10%FBS+50μg/LNGF处理的细胞中,p53和p21WAF1/CIP1均增高,而使用MEK抑制剂U0126(10μmol/L)可以抑制这一增高.在1%FBS处理的细胞中,p53水平增高,p21WAF1/CIP1却未见明显增高;进而加入50μg/LNGF作用1h后,p53显著降低,6h后再次升高,并持续至24h.可见p53在50μg/LNGF和1%FBS诱导的细胞周期阻滞中均发挥作用,但作用机制可能不同.
- 吴少波张雯彭芳芳张百芳沈晗杞少华李宪奎武栋成
- 关键词:NGFFBSPC12细胞
- TCRVβ7.1基因转染对肝癌细胞刺激的外周血单个核细胞ERK信号通路和IFN-γ表达的影响被引量:1
- 2009年
- 目的:研究肝癌特异性识别基因TCRVβ7.1表达重组体转染外周血单个核细胞(PBMCs)后对T细胞细胞因子表达的影响和信号通路的激活作用。方法:以肝癌特异性T细胞受体Vβ7.1转染PBMCs,流式细胞仪检测TCRVβ7.1表达量;Western blotting检测ERK1/2表达量及磷酸化水平(p-ERK)的改变;用ELISA法检测白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)的表达量。结果:TCRVβ7.1基因转染健康人PBMCs并得到有效表达,转染TCRVβ7.1基因的PBMCs与肝癌细胞共培养后ERK蛋白磷酸化水平明显高于未转染组(P<0.01)。p-ERK1/2水平与T细胞激活有关。ELISA结果表明,转染PBMCs细胞与肝癌细胞共培养后,IFN-γ水平明显高于未转染组,而IL-4无明显改变。结论:TCRVβ7.1转染PBMCs与肝癌细胞共培养后,ERK信号通路被激活,IFN-γ表达增高。
- 张帆邵红伟沈晗张文峰吴凤麟黄树林
- 关键词:细胞外信号调节激酶类干扰素Γ
- 人类TCRαβ家族V基因的进化研究被引量:8
- 2008年
- 目的:了解人类TCRα家族V基因(TCRAV)和TCRβ家族V基因(TCRBV)的进化特征。方法:采用MEGA3.1软件对人类TCRAV和TCRBV基因分别构建进化树,并估算基因复制的发生时间;采用FEL法检测TCRAV和TCRBV编码序列正选择和负选择位点。结果:进化树显示TCRAV和TCRBV的基因分组在进化过程中已经维持了相当长的时间。TCRAV已经不受正选择作用,TCRBV基因序列的CDRs区域检测到两个正选择位点。结论:人类TCRαβ家族V基因的进化特征为研究TCR基因在机体免疫及疾病防治提供了理论分析基础。
- 陶嫦立邵红伟沈晗吴凤麟黄树林
- 关键词:TCR进化正选择负选择
- TCR BV12-3重组载体构建及其抗肿瘤作用的初步研究
- 2014年
- 目的:构建pEGFP-C3-TCR BV12-3表达载体并初步研究其抗肿瘤作用。方法:TCR BV12-3基因片段从pGEM-T-TCR BV12-3载体上酶切并克隆至pEGFP-C3载体中,通过脂质体将pEGFP-C3-TCR BV12-3表达载体转染外周血单个核细胞(PBMCs),48小时后荧光显微镜观察转染效率。PBMCs细胞、pEGFP-C3载体转染的PBMCs细胞、pEGFP-C3-TCR BV12-3表达载体转染的PBMCs细胞分别与肝癌细胞BEL-7402和宫颈癌细胞HeLa共培养24 h,显微镜观察肿瘤细胞的生长情况。结果:测序证实TCR BV12-3基因片段成功亚克隆至pEGFP-C3载体中,荧光显微镜证实重组体转染PBMCs细胞48 h后可有效表达绿色荧光。显微镜观察发现pEGFP-C3-TCR BV12-3载体转染的PBMCs对肝癌细胞有杀伤作用,但对宫颈癌杀伤作用不明显。结论:成功构建pEGFP-C3-TCR BV12-3表达载体,初步证实TCRBV12-3对肝癌细胞有杀伤作用。
- 王辉区裕升沈晗黄树林
- 关键词:T细胞受体克隆肿瘤
- 耐辐射甲基杆菌L321在降解邻苯二甲酸酯以及促生长中的应用
- 本发明公开了耐辐射甲基杆菌L321在降解邻苯二甲酸酯以及促生长中的应用。本发明研究表明植物内生菌耐辐射甲基杆菌L321能产铁载体,有助于植物吸收土壤中营养元素,能促进植物生长;L321菌株还能够以DBP、DEHP为唯一碳...
- 刘丽辉沈晗李丹丹黄钰莹谢达锋
- 肝癌特异性TCRVβ亚家族基因的药效研究
- 黄树林肖兰凤邵红伟陈启助吴凤麟沈晗薄华本王金全张文峰张帆罗利琼林月霞
- 该项目在前期通过基因优势取用分离到特异性识别杀伤肝癌细胞的TCRVβ基因的基础上,以荷肝癌SCID小鼠为模型,重点研究了TCRVβ基因转染人PBMC后的抗肝癌药效学作用,结果发现特异性TCRVβ基因转染的PBMC在肿瘤局...
- 关键词:
- 关键词:肝癌恶性肿瘤治疗
- 不同培养环境对PMBC中Treg和Th17细胞分化的影响被引量:3
- 2015年
- 目的:研究不同培养环境对调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)和Th17细胞分化的影响,探索能够逆转肿瘤微环境诱导的免疫耐受的手段。方法:克隆人白介素-6(IL-6)的基因,将其转入表达TGF-β的肿瘤细胞株中,并筛选稳转系;分别收集含或不含IL-6的肿瘤细胞培养上清,制备成条件培养基(Conditioned medium,CM),用于体外培养人外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC),流式检测PBMC在不同培养环境中Treg和Th17细胞的变化情况。结果:RTPCR分析表明BEL-7402表达TGF-β的水平明显高于Hep G2,因此选择BEL-7402用于制备IL-6的稳转系;ELISA检测结果表明所制备的稳转系能够有效地表达IL-6;流式结果表明,由肿瘤细胞培养上清制备的CM能明显诱导T细胞分化为Treg,而在IL-6存在的情况下则能明显抑制Treg细胞的形成,并促进T细胞分化为Th17细胞。结论:肿瘤细胞培养上清促使PBMC中Treg比例增加;而在其中添加IL-6则能够降低Treg细胞比例,并增加Th17细胞的比例。
- 邵红伟杨海林梁春梅陆晓敏刘婷沈晗吴凤麟黄树林
- 关键词:TH17白介素-6条件培养基
- 着眼于研究生培养实际需要的《分子生物学》课程教学新探索被引量:2
- 2014年
- 研究生培养与本科生的最大不同是研究生要开展科学研究工作,因此对其各种课程教学有新的要求,分子生物学作为生物医药专业的基础性课程,其研究生教学具有代表性。本文从生物医药专业研究生的培养需求出发,探讨了对分子生物学课程教学的一些新的探索和尝试,目的是以点带面,以课程教学促进研究生专业能力的培养,对研究生后续开展的课题设计和实验研究起到有益的促进作用。
- 沈晗孟民杰邵红伟张文峰黄树林
- 关键词:研究生培养分子生物学
- 甘草水提物中miRNA对人免疫细胞基因表达的影响被引量:25
- 2017年
- 微小RNA(micro RNA,miRNA)是一类在转录后水平调节基因表达的非编码小分子RNA,其调控基因表达、影响细胞活性的功能已为人们所重视。近年来miRNA的跨界调控成为新的研究方向,为人们更全面地认识和了解miRNA的功能提供了新的视角。植物miRNA由于通常经过了甲基化修饰,因此较为稳定,不易降解。前期研究表明,甘草干燥药材的水煎剂中存在着丰富的小分子RNA,这为了解甘草的作用机制提供了新的思路。在本研究中,利用从甘草水煎剂中提取的小分子RNA以及合成的miRNA模拟物(mimic)作用于分离自健康人的外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),然后利用RT-PCR对其模式识别受体(PRR)基因以及部分转录因子、信号分子和细胞因子的基因表达变化进行了分析。结果表明甘草miRNA对人免疫细胞的基因表达具有明显的调节作用,能够显著抑制T细胞分化相关基因的表达,以及炎症和凋亡相关基因的表达。这为进一步更全面地了解甘草的作用机制以及中药新药的研制带来了新的思路。
- 向静黄洁嫦徐畅何免徐鹏程张丹张文峰沈晗邵红伟
- 关键词:小分子RNA基因表达