林洪羽
- 作品数：18 被引量：11H指数：2
- 供职机构：燕山大学环境与化学工程学院生物技术与工程系更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 重组鸡IL-7的制备及其抑制传染性法氏囊病毒感染的研究
- 白细胞介素是鸡体内一类重要的细胞因子,在机体的免疫应答中起重要作用,可作为免疫治疗剂、免疫增强剂、构建新型基因工程疫苗等。IL-7主要由胸腺基质细胞产生,其它细胞如骨髓基质细胞,肠上皮细胞等也能产生,另外,脾细胞、巨噬细...
- 王利月林洪羽李文艳温洁霞张永红李秀锦仲飞
- 关键词：传染性法氏囊病毒白细胞介素
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒受体及其抑制浆细胞样树突状细胞产生IFN-Ⅰ
- 通过实验表明PRRSV进人细胞不是简单的与细胞非特异性结合，而是一个受体介导的细胞内吞作用。而有研究表明IFN-a对增强细胞抵御PRRSV感染有重要作用。目前已鉴定出存在PRRSV受体有四个:硫酸乙酰肝素、唾液酸粘附素、...
- 王利月林洪羽张永红李秀锦仲飞
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒树突细胞
- 文献传递
- 人可溶性CD83在体外抑制人类单核细胞分化为树突状细胞的研究
- 人类CD83蛋白主要在成熟的树突状细胞(m DCs)中进行表达,它是I型免疫球蛋白超家族的成员。因此,一直以来,被人们认为是成熟树突状细胞的标记物。然而,通过越来越多的实验证明,CD83不仅是树突状细胞成熟的标记物,它也...
- 林洪羽
- 关键词：单核细胞树突状细胞
- 文献传递
- 重组单增李斯特菌溶血素O在大肠杆菌中的分泌表达及活性分析被引量：2
- 2014年
- 单增李斯特菌是食源性致病菌,常引起人和动物的生殖障碍,由此菌分泌的溶血素O(LLO)是重要的致病因子。为研究LLO对细胞的毒性作用及对动物体生殖免疫的调节作用,需要制备大量重组LLO。为此本试验依据LLO基因序列(JN703918)通过PCR方法从单增李斯特菌菌株基因组中扩增无信号肽的LLO编码基因,然后将其插入到pET-20b(+)质粒中,使其5′端与载体中的pelB信号肽序列融合,3′端与His-标签融合,构建成LLO分泌性原核表达载体pET-20b-LLO/H。将载体分别转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,在IPTG的诱导下进行表达,利用Ni-NTA琼脂糖凝胶从细菌周质释放液中提取和纯化重组LLO蛋白,并通过SDS-PAGE及Western blot进行鉴定。利用溶血试验检测重组蛋白的生物活性。结果表明,本试验扩增的LLO基因序列与GenBank中的LLO基因序列完全一致。采用分泌性表达策略实现了重组LLO在大肠杆菌中的分泌表达,并且表达的重组LLO具有明显的溶血活性。
- 李文艳张永红林洪羽李秀锦仲飞
- 关键词：单增李斯特菌大肠杆菌分泌表达
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒与受体结合的研究进展
- PRRSV的宿主细胞是猪肺泡巨噬细胞(PAM),PAM细胞上的PRRSV受体有三个:硫酸乙酰肝素、噬液酸粘附索、CD163,共同介导病毒的侵染。Marc-145中发现的受体是波形蛋白受体(Vimenfin)。由于PRRS...
- 张永红林洪羽王利月李秀锦仲飞
- 关键词：PRRSV硫酸乙酰肝素
- 文献传递
- PRRSV对猪树突细胞可溶性CD83释放影响的分析
- 2015年
- 为研究猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)感染是否促进猪树突细胞可溶性CD83(sCD83)的释放,在体外用PRRSV感染猪树突细胞,通过ELISA检测了树突细胞培养基sCD83的含量,结果显示PRRSV可明显提高猪树突细胞培养基sCD83的含量,表明PRRSV促进树突细胞sCD83的释放。为研究PRRSV对猪树突细胞CD83表达的影响,用RT-PCR和流式细胞术分别检测了细胞CD83mRNA的水平和细胞膜CD83的含量。结果显示PRRSV可提高猪树突细胞CD83 mRNA的水平,然而对细胞膜CD83的含量影响不大,说明PRRSV促进sCD83释放的作用高于刺激CD83表达的作用,致使膜结合的CD83保持较低的水平。PRRSV诱导树突细胞sCD83的释放为探讨PRRSV感染引起免疫抑制提供了重要的线索。
- 李秀锦霍珊珊张永红张建楼徐建林洪羽王利月仲飞
- 关键词：PRRSV免疫抑制
- 人可溶性CD83在体外抑制PBMC分化为树突状细胞的研究
- <正>CD83属于Ⅰ型免疫球蛋白超家族(IgSF)糖蛋白,表达于成熟的树突细胞(DC),被认为是人类和小鼠成熟DC的一个特定的标志物。然而CD83具有多种免疫调节作用。研究发现CD83有两种形式,细胞膜结合CD83和由膜...
- 林洪羽徐建能昌爱王利月仲飞李秀锦
- 关键词：体外抑制
- 文献传递
- 基于膜受体阻断犬细小病毒感染的分子机制研究
- 仲飞李秀锦仲峰李文艳王微温洁霞潘素敏潘红丽李楠王幸兴韩冬梅王利月林洪羽张永红张建楼
- 基于细小病毒VP2蛋白与宿主细胞膜TfR特异结合并介导病毒感染的特性，利用宿主细胞的TfR细胞外区（也称可溶性的TfR，即sTfR）重组蛋白封闭细小病毒颗粒，从而达到阻止细小病毒感染宿主细胞的目的。在项目研究过程中，课题...
- 关键词：
- 关键词：细小病毒感染分子生物学
- PRRSV囊膜GP5/M双基因表达载体的构建
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是危害养猪业发展最严重的传染病之一,目前由于缺乏有效的疫苗未能得到有效控制。已知PRRS病毒(PRRSV)主要感染猪的肺泡巨噬细胞(PAM),我们在研究猪天然防御活性物质时发现,肺泡表面活性...
- 陈慧慧王利月林洪羽王永红张考李文艳温洁霞仲飞李秀锦
- 关键词：PRRSV囊膜蛋白基因表达载体
- 犬GM-CSF基因对犬细小病毒VP2DNA疫苗的免疫增强作用被引量：4
- 2013年
- 犬细小病毒编码的VP2蛋白是该病毒重要的结构蛋白和抗原蛋白。利用VP2基因制备的DNA疫苗能够刺激机体产生免疫应答反应。为进一步提高VP2DNA疫苗的免疫活性,本实验利用犬粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因作为生物佐剂研究其对犬细小病毒VP2DNA疫苗的免疫增强作用。首先通过RT-PCR方法从犬淋巴细胞中扩增GM-CSF基因,并将其插入到pcDNA3.1载体上,分别构建该基因的两个分泌型真核表达载体,即非融合表达载体pcDNA-cGMCSF和与Myc-His融合的表达载体pcDNA-cGMCSF/MH。用pcDNA-cGMCSF/MH载体转染HEK293T细胞以确定GM-CSF基因能否在真核细胞中进行分泌表达。然后用本室构建的VP2基因表达载体单免疫小鼠,用VP2表达载体与pcDNA-cGMCSF共免疫小鼠(pcDNA3.1空载体作为阴性对照)。免疫后用ELISA方法检测不同时间小鼠血清的抗体水平。用MTT法检测小鼠免疫后35d时淋巴细胞的增殖活性,同时用ELISA试剂盒检测小鼠淋巴细胞γ干扰素的表达水平。结果表明,本试验构建的表达载体能够介导重组GM-CSF在真核细胞中进行分泌表达。免疫实验表明,利用GM-CSF基因与VP2基因共免疫小鼠,抗体的水平明显高于VP2基因单免疫组(P<0.01)。共免疫组小鼠淋巴细胞的刺激指数和γ干扰素的表达水平均明显高于单免疫组(P<0.05)。由此可见,GM-CSF表达载体可明显提高CPV VP2DNA疫苗的免疫应答水平。
- 贾启恒温洁霞王利月林洪羽张峰王璐孙岩李秀锦仲飞
- 关键词：GM-CSF犬细小病毒
