王利月
- 作品数：19 被引量：14H指数：2
- 供职机构：河北农业大学更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 重组鸡IL-7的制备及对法氏囊病毒灭活苗免疫原性的增强作用
- 引言传染性法氏囊病（IBD）是由传染性法氏囊病毒（IBDV）引起的急性、高度接触性传染病,此病发病率和死亡率高,严重威胁养鸡业的发展,目前该病尚未得到完全控制。目前主要使用弱毒苗和灭活苗进行预防,但不能完全抵抗强毒的攻击...
- 崔丹张建楼霍珊珊张永红王利月左玉柱李秀锦仲飞
- 关键词：灭活苗免疫原性法氏囊病毒
- 重组猪白介素7在大肠杆菌中分泌表达及生物学功能分析
- <正>白介素-7(IL-7)是一种由胸腺基质等细胞产生的具有刺激B细胞生长和Pre-B细胞分化和增殖的细胞因子,能使处于抑制的免疫系统恢复其功能。研究证明猪的许多病毒性传染病的发病过程与病毒致机体免疫抑制有关,如猪的蓝耳...
- 王利月温洁霞林洪羽张永红李文艳张建楼李秀锦仲飞
- 关键词：传染病分泌表达白介素大肠杆菌生物学功能
- 文献传递
- 重组鸡IL-7的制备及其抑制传染性法氏囊病毒感染的研究
- 白细胞介素是鸡体内一类重要的细胞因子,在机体的免疫应答中起重要作用,可作为免疫治疗剂、免疫增强剂、构建新型基因工程疫苗等。IL-7主要由胸腺基质细胞产生,其它细胞如骨髓基质细胞,肠上皮细胞等也能产生,另外,脾细胞、巨噬细...
- 王利月林洪羽李文艳温洁霞张永红李秀锦仲飞
- 关键词：传染性法氏囊病毒白细胞介素
- 文献传递
- 基于膜受体阻断犬细小病毒感染的分子机制研究
- 仲飞李秀锦仲峰李文艳王微温洁霞潘素敏潘红丽李楠王幸兴韩冬梅王利月林洪羽张永红张建楼
- 基于细小病毒VP2蛋白与宿主细胞膜TfR特异结合并介导病毒感染的特性，利用宿主细胞的TfR细胞外区（也称可溶性的TfR，即sTfR）重组蛋白封闭细小病毒颗粒，从而达到阻止细小病毒感染宿主细胞的目的。在项目研究过程中，课题...
- 关键词：
- 关键词：细小病毒感染分子生物学
- 单增李斯特菌对小鼠巨噬细胞炎性体的激活及其对滋养层细胞的免疫调节作用
- 试验目的:研究单增李斯特菌(LM)激活小鼠巨噬细胞的分子机制及其对小鼠滋养层细胞的免疫调节作用。试验方法:用野生型LM和溶血素(LLO)基因敲除的LM(LLO-/--LM)分别感染小鼠巨噬细胞系B6细胞和NLRP3-/-...
- 李文艳王利月林洪羽温洁霞张永红张建楼李秀锦黄河玲仲飞
- 关键词：小鼠巨噬细胞滋养层细胞免疫调节作用单增李斯特菌细胞凋亡
- 表达绿色荧光蛋白的北美Ⅱ型PRRSV感染性克隆的制备及特性分析
- 目的：由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染引起的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)，一直是危害养猪业最为严重的传染病之一，给国内外养猪业带来巨大的经济损失。为在分子水平上研究PRRSV与宿主的相互作用及其致病机制，本试...
- 王利月
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征绿色荧光蛋白感染性克隆
- 文献传递
- PRRSV对猪树突细胞可溶性CD83释放影响的分析
- 2015年
- 为研究猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)感染是否促进猪树突细胞可溶性CD83(sCD83)的释放,在体外用PRRSV感染猪树突细胞,通过ELISA检测了树突细胞培养基sCD83的含量,结果显示PRRSV可明显提高猪树突细胞培养基sCD83的含量,表明PRRSV促进树突细胞sCD83的释放。为研究PRRSV对猪树突细胞CD83表达的影响,用RT-PCR和流式细胞术分别检测了细胞CD83mRNA的水平和细胞膜CD83的含量。结果显示PRRSV可提高猪树突细胞CD83 mRNA的水平,然而对细胞膜CD83的含量影响不大,说明PRRSV促进sCD83释放的作用高于刺激CD83表达的作用,致使膜结合的CD83保持较低的水平。PRRSV诱导树突细胞sCD83的释放为探讨PRRSV感染引起免疫抑制提供了重要的线索。
- 李秀锦霍珊珊张永红张建楼徐建林洪羽王利月仲飞
- 关键词：PRRSV免疫抑制
- 猪肺泡/羊水表面活性蛋白A的分离纯化及抗菌和抗病毒活性的分析被引量：2
- 2017年
- 为探讨猪肺泡表面活性蛋白A(SP-A)的抗菌和抗病毒活性,需要从猪肺泡液和羊水中分离纯化SP-A。首先通过化学交联法将麦芽糖共价交联在Sepharose胶粒上,制成能够与SP-A结合的胶粒,即麦芽糖-Sepharose(MS)。采集肺泡灌洗液(BLAF)和羊水(AF),以11 000r/min转速离心40 min获得富含SP-A的沉淀;将沉淀溶解于含8mol/L尿素的缓冲液I中使SP-A变性,再以无尿素的缓冲液I透析使其复性。然后在含Ca2+的结合缓冲液中用MS吸附SP-A,用含EDTA的洗脱液洗脱,洗脱的SP-A过Sephadex G-75凝胶柱得到纯化的SP-A。SDS-PAGE和Western blot鉴定结果显示:在相对分子质量为35 000和70 000处出现特异的SP-A蛋白带(或杂交带)。菌体凝集试验显示:SP-A具有凝集E.coli的作用,表明制备的SP-A具有生物活性。抑菌试验证实SP-A对致病性E.coli、肠沙门杆菌、肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌的增殖均有不同程度的抑制作用,特别是对E.coli和肠沙门杆菌抑制作用更为明显。抗病毒检测结果显示:SP-A可明显抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在MARC-145细胞中的增殖,同时对猪细小病毒(PPV)在PK-15细胞中的增殖也有一定的抑制作用。结果表明:制备的猪SP-A在体外具有明显的抗菌和抗病毒活性,这为以后进一步研究猪SP-A的生物学特性及抗菌、抗病毒活性提供了必要的条件。
- 张永红霍珊珊张建楼徐建左玉柱王利月崔丹李秀锦仲飞
- 关键词：抗病毒活性
- 犬GM-CSF基因对犬细小病毒VP2DNA疫苗的免疫增强作用被引量：4
- 2013年
- 犬细小病毒编码的VP2蛋白是该病毒重要的结构蛋白和抗原蛋白。利用VP2基因制备的DNA疫苗能够刺激机体产生免疫应答反应。为进一步提高VP2DNA疫苗的免疫活性,本实验利用犬粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因作为生物佐剂研究其对犬细小病毒VP2DNA疫苗的免疫增强作用。首先通过RT-PCR方法从犬淋巴细胞中扩增GM-CSF基因,并将其插入到pcDNA3.1载体上,分别构建该基因的两个分泌型真核表达载体,即非融合表达载体pcDNA-cGMCSF和与Myc-His融合的表达载体pcDNA-cGMCSF/MH。用pcDNA-cGMCSF/MH载体转染HEK293T细胞以确定GM-CSF基因能否在真核细胞中进行分泌表达。然后用本室构建的VP2基因表达载体单免疫小鼠,用VP2表达载体与pcDNA-cGMCSF共免疫小鼠(pcDNA3.1空载体作为阴性对照)。免疫后用ELISA方法检测不同时间小鼠血清的抗体水平。用MTT法检测小鼠免疫后35d时淋巴细胞的增殖活性,同时用ELISA试剂盒检测小鼠淋巴细胞γ干扰素的表达水平。结果表明,本试验构建的表达载体能够介导重组GM-CSF在真核细胞中进行分泌表达。免疫实验表明,利用GM-CSF基因与VP2基因共免疫小鼠,抗体的水平明显高于VP2基因单免疫组(P<0.01)。共免疫组小鼠淋巴细胞的刺激指数和γ干扰素的表达水平均明显高于单免疫组(P<0.05)。由此可见,GM-CSF表达载体可明显提高CPV VP2DNA疫苗的免疫应答水平。
- 贾启恒温洁霞王利月林洪羽张峰王璐孙岩李秀锦仲飞
- 关键词：GM-CSF犬细小病毒
- 密码子优化提高PRRSV GP5/M双基因在真核细胞中的同步表达被引量：3
- 2015年
- 为提高猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)GP5和M蛋白基因在动物细胞中同步表达水平,本试验依据动物偏爱的密码子对GP5和M蛋白基因分别进行了密码子优化,并利用本室构建的含内部核蛋白体进入位点(IRES)载体pcDNA-IRES,将密码子优化的和野生型的GP5基因和M蛋白基因分别插入到IRES的上下游,分别构建成GP5与His-标签融合和M蛋白与Myc-标签融合的密码子优化的和野生型的GP5/M双基因表达载体pcDNA-OpGP5/His-IRES-OpM/MH和pcDNA-GP5/His-IRES-M/MH,将双基因表达载体转染HEK293T细胞使其表达,通过Western blot检测,比较GP5和M蛋白在真核细胞的表达水平。结果显示,密码子优化可明显提高GP5和M在HEK293T细胞中的表达水平,本试验为GP5和M蛋白功能的研究提供了有利条件。
- 张永红徐建张建楼霍珊珊王利月林洪羽李秀锦仲飞
- 关键词：密码子优化PRRSVGP5蛋白M蛋白
