刘斌 作品数:11 被引量:41 H指数:5 供职机构: 西北农林科技大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 陕西省重大科技创新专项计划项目 国家生猪现代产业技术体系建设项目 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
磺胺嘧啶在实验性肾功能损害家兔体内的药代动力学研究 被引量:1 2004年 单剂量静脉快速注射磺胺嘧啶140mg/kg,8h内不同时间心脏采血,测定了磺胺嘧啶在6只健康家兔及6只肾损害家兔体内的代谢动力学参数,结果表明,磺胺嘧啶在家兔体内的药代动力学配置符合无吸收因素二室开放模型。药-时曲线方程为:C正常=134.29e-7.968t+329.28e-0.522t,C肾损=165.59e-3.942t+264.33e-0.322t。肾损害家兔与健康家兔相比,分布速率常数下降了50.53%,消除相速率常数下降了38.34%,分布相半衰期延长了123.46%,消除半衰期延长了63.15%,曲线下面积增加了34.22%,体消除率降低了22.12%。这一结果显示,家兔肾功能损害后,其体内的磺胺嘧啶代谢发生了显著变化,提示在肾脏损害时应相应增大磺胺嘧啶给药间隔时间或减小给药剂量。 李引乾 赵明英 段清学 弓广智 蒿彩菊 刘晓强 党文英 刘斌关键词:磺胺嘧啶 肾功能损害 药代动力学 病理模型 人甲型流感病毒H1N1亚型NS1蛋白的原核表达及纯化 被引量:6 2009年 目的表达并纯化人甲型流感病毒H1N1亚型NS1蛋白。方法用RT-PCR法从人甲型流感病毒株A/PR/8/34(H1N1)中扩增NS1基因,克隆入原核表达载体pTXB1,构建重组原核表达质粒pTXB1/NS1,经酶切鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达形式和表达量。经几丁质柱亲和层析纯化表达蛋白,串联飞行时间质谱仪检测其相对分子质量。结果所构建的重组表达质粒pTXB1/NS1序列完整,插入的基因片段全长690bp。以1.0mmol/LIPTG37℃诱导4h,重组蛋白表达量最高,占菌体总蛋白的50%以上。破菌上清及沉淀中均有目的蛋白表达。纯化的NS1蛋白纯度达95%以上,相对分子质量约为26000。结论已成功表达并纯化了人甲型流感病毒H1N1亚型NS1蛋白,为其进一步的研究奠定了基础。 麻粉莲 李引乾 郑丽舒 张骞 张万菊 张钫 刘斌 侯云德关键词:H1N1亚型 NS1蛋白 原核表达 纯化 原花青素对猪精液常温保存效果的影响 被引量:13 2018年 为探究常温保存稀释液中添加原花青素(OPC)对猪精液保存效果的影响,本实验在经典猪精液稀释液BTS中添加0、10、20、30、40、50、60、70μg/mL OPC,检测17℃保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整性、总抗氧化能力(T-AOC)及精液丙二醛(MDA)含量等指标。结果表明:在经典猪精液稀释液BTS中添加OPC,随着添加浓度的增大,其对精子的保护作用呈先上升后下降的趋势,且添加浓度达50μg/mL时,效果最佳,可显著提高常温保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整率(P<0.05);当保存至第5天时,精子活率仍为61.63%、质膜完整率为41.88%、顶体完整率为75.88%、T-AOC浓度为1.43 U/mL、MDA含量为2.37 nmol/mL。因此,在经典猪精液稀释液BTS中添加50μg/mLOPC能够提高猪精液常温保存效果,延长精液保存时间。 胡亚美 刘斌 孙敬春 梁国栋 褚瑰燕 杨公社关键词:原花青素 精液 常温保存 卡那霉素叶片涂抹法筛选转基因大豆植株的有效性 被引量:9 2006年 以吉林小粒1号大豆为材料进行卡那霉素梯度涂抹试验,确定卡那霉素筛选的最佳浓度和筛选临界观察时间,并在此基础上,对转基因大豆植株(含np tⅡ基因)分离后代进行卡那霉素涂抹检测和PCR检测,检验2种方法的符合度。结果表明,卡那霉素的最佳筛选浓度为500 m g/L,观察时间以3 d为宜;抗和高抗卡那霉素植株2种检测方法的符合度为90.8%,感和高感卡那霉素植株的符合度为87.1%。可见,卡那霉素叶片涂抹法完全可以用于大豆转基因植株的快速筛选。 刘斌 吴迪 侯文胜关键词:大豆 转基因植株 PCR 卡那霉素 猪霉变饲料中毒的危害及防治措施 被引量:1 2016年 在生物界中,存在着许多霉菌,常寄生于各类饲料原料中。如果环境温度湿度适宜(温度28℃,湿度80%以上),氧气含量充足,霉菌就会大量生长繁殖,导致饲料发霉变质。有些霉菌在生长繁殖过程中会产生毒素。目前已知的霉菌毒素有100多种以上,常见的有黄曲霉毒素、镰刀菌毒素和赤霉毒素以及棕曲霉毒素、黄绿青霉素、黑穗病、麦角病、锈病等。这些霉菌毒素都可能引起猪中毒。 李顺虎 种志文 邓昌海 谢宝财 刘斌关键词:黄绿青霉素 镰刀菌毒素 霉变饲料 繁殖过程 种猪繁殖障碍控制及提高繁殖性能的方法 被引量:5 2016年 近年来,随着规模化养猪场的快速发展,集约化、机械化、智能化的养殖模式已经成为主流,生产规模不断扩大,国内各猪场种猪频繁调动,再加上猪场管理措施和防疫水平跟不上规模化的发展。在这段过程中,种猪的繁殖障碍病越来越严重,尽管在不同地区、不同猪场、不同季节造成的损失不一样,但损失的仔猪数在30%左右的比较多,个别地区仔猪损失率达到40%,甚至有损失率达80%以上的地区。 种志文 李顺虎 谢宝财 刘斌 邓昌海关键词:猪繁殖障碍 繁殖性能 猪场管理 窝产活仔数 窝产仔数 产奶牛不同泌乳阶段日粮的饲喂效果分析 2016年 [目的]探讨产奶牛不同泌乳阶段饲喂不同的日粮,其产奶量和乳成分的变化情况。[方法]对不同泌乳阶段奶牛的日粮组成进行分析,对其产奶量和牛奶品质进行了跟踪记录。[结果]产奶牛高峰期平均产奶量为28.10kg;产奶牛泌乳中期和泌乳后期平均产奶量分别为15.75kg、15.15kg。乳脂率从泌乳高峰期到泌乳后期呈现上升的趋势,泌乳高峰期的乳脂率显著低于泌乳中期(P<0.05)和泌乳后期(P<0.05)。[结论]产奶牛不同泌乳阶段饲喂不同的日粮,其产奶量和乳成分会发生相应变化。 权俊杰 刘斌 辛亚平关键词:中国荷斯坦牛 日粮 泌乳量 人乳头瘤病毒6型L1基因的克隆及蛋白表达 2009年 目的:在大肠杆菌中表达经密码子优化的人乳头瘤病毒6型(HPV6)L1的融合蛋白。方法:PCR方法扩增HPV6L1基因,测序及序列比对后,对基因进行密码子优化并合成优化后的基因HPV6 mL1,将其克隆入原核表达载体pGEX4T-1,IPTG诱导融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,SDS-PAGE鉴定表达产物。结果:酶切和测序结果证实HPV6 mL1基因的原核表达载体构建正确;以1mmol/L IPTG于37℃诱导4h,蛋白以包涵体形式表达;表达产物的相对分子质量与预期值一致,为80000。结论:获得大肠杆菌表达的HPV6L1蛋白,为其结构功能研究和疫苗研发提供了基础。 刘斌 钱永华 张骞 张万菊 张钫 麻粉莲 郑丽舒关键词:人乳头瘤病毒6型 L1基因 蛋白表达 饲料酶制剂在生猪健康养殖中的应用 被引量:5 2016年 在生猪现代养殖规模化、集约化、标准化的生产模式下,虽然提高了生产效益、增加了经济利润,但同时也带来了一系列的问题,如生产过程中不正确的处理方法造成的环境污染、饲料添加剂的不合理使用导致猪的发病率上升、过度追求生长速度致使猪肉品质降低等。 陈江生 刘斌 谢宝财 刘兆军 邓昌海 胡建宏关键词:饲料酶制剂 猪肉品质 替代抗生素 生长猪 饲料来源 人乳头瘤病毒16型L1蛋白VLP的原核表达及纯化 2009年 目的在大肠杆菌中表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白病毒样颗粒(VLP),并进行纯化,为研制宫颈癌疫苗提供新的思路。方法以HPV16基因组DNA为模板,PCR扩增HPV16L1基因的编码区,定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中谷胱甘肽转移酶(GST)编码区下游,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,采用GST纯化柱纯化重组融合蛋白,并用凝血酶切去GST标签,再经S100分子筛纯化,浓缩后,电镜观察纯化蛋白的VLP形态。结果重组表达质粒经双酶切和测序,证明构建正确。表达产物的相对分子质量约为80000,主要以可溶性形式存在。Western blot显示,目的蛋白可与小鼠抗HPV16L1抗体发生特异性反应。纯化蛋白的纯度约为95%,在电镜下可见直径约为50~60nm的VLP。结论已成功地在大肠杆菌中表达了可溶性的HPV16L1蛋白VLP,并进行了纯化,为宫颈癌疫苗及血清学诊断试剂的研制奠定了基础。 张万菊 郑丽舒 张骞 谢志萍 张钫 麻粉莲 刘斌关键词:人乳头瘤病毒16型 主要结构蛋白 病毒样颗粒 原核表达