杨勇
- 作品数：9 被引量：10H指数：2
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- 肝肺综合征病理发生机制的研究进展被引量：4
- 2013年
- 肝肺综合征(hepatopulmonary syndrome,HPS)是各种急慢性肝病的严重并发症,以肺微血管扩张引起的低氧血症为典型的病理改变。HPS的病理发生机制复杂,文中对肺微血管扩张、肠源性内毒素血症和肺内单核/巨噬细胞的聚集及血管新生在HPS发病机制方面的作用进行综述,期望通过对HPS病理发生机制的进一步了解,为HPS的防治提供新的思路和理论指导。
- 杨勇易斌鲁开智
- 关键词：肝肺综合征病理机制一氧化氮一氧化碳血管新生
- 梗阻性黄疸患者血清对人肺微血管内皮细胞肌样分化的影响
- 2016年
- 目的评价梗阻性黄疸患者血清对人肺微血管内皮细胞（PMVECs）肌样分化的影响。
方法分离人PMVECs，并传代培养，将培养的人PMVECs分别采用梗阻性黄疸患者血清和健康志愿者血清孵育，于孵育24、48和72 h（T1～3）时在倒置显微镜下观察原代PMVECs形态，采用Western blot法检测PMVECs肌性蛋白（α-SMA、SM-MHC、capolnin）的表达。
结果健康志愿者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA蛋白表达阴性，出现少量SM-MHC表达，梗阻性黄疸患者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达阳性。与健康志愿者血清比较，梗阻性患者黄疸血清孵育PMVECs SM-MHC表达上调（P〈0.05）；与T1时比较，T2，3时梗阻性黄疸血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达上调（P〈0.05）；与T2时比较，T3时梗阻性黄疸患者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达上调（P〈0.05）。
结论梗阻性黄疸患者血清促进PMVECs肌样分化，可能是肺微血管扩张机制之一。
- 陈啟炜杨勇陈兵陈杨李胜王桂兰吴玉龙陈崇会祖宝利易斌鲁开智廖林
- 关键词：血清细胞分化
- 一种改良成人肺动脉平滑肌细胞的培养方法
- 2014年
- 目的:探讨成人肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)体外培养及培养效率的方法。方法:在无菌条件下,取3cm左右肺动脉,去除内膜后,剪成1mm×1mm大小的组织块,贴块法培养,在高糖DMEM/F12 1∶1培养基中加入血小板衍生长因子(PDGF)10μg/L培养hPASMCs,采用倒置显微镜观察细胞形态,免疫荧光法鉴定α-平滑肌肌动蛋白(smooth muscle-α-actin,SM-α-actin)和钙调蛋白calponin。结果:采用改良组织块培养,克服了hPASMCs体外培养休眠期过长的缺点,稳定获得纯度达98%以上,细胞呈长梭型,生长致密时排列成相互平行的束状,未见明显异形的细胞,SM-α-actin和calponin阳性。结论:该改良方法能成功分离和培养出纯度较高的成人肺动脉平滑肌细胞,且重复性好,细胞常量大,简便而有效。
- 杨勇易斌鲁开智
- 关键词：人肺动脉平滑肌细胞
- 大鼠肺毛细血管周细胞的培养
- 2013年
- 目的 建立可靠、简便的肺毛细血管周细胞的培养方法.方法 选择健康雄性SD大鼠6只,6～7周龄,体重200 ～ 220 g,采用Ⅰ型胶原酶消化法和微孔过滤法分离肺毛细血管片段,用含10％胎牛血清和0.5％青霉素链霉素混合液的高糖DMEM/F12 1∶1培养基选择性培养肺毛细血管周细胞.倒置相差显微镜下观察细胞形态和生长状态,采用免疫荧光法计数α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、结蛋白、神经元-胶质抗原2（NG2）、分化抗原31（CD31）的阳性细胞,计算阳性细胞百分比.结果 镜下细胞呈梭型或星芒状,单核,偶见双核,核卵圆形,细胞浆丰富,漩涡或栅栏状生长,无接触性抑制.免疫荧光测定α-SMA阳性细胞百分比为（99.0±1.2）％,结蛋白阳性细胞百分比为（96.0±2.1）％,NG2阳性细胞百分比为（99.0±0.7）％,CD31阳性细胞百分比为0.结论 成功建立了一种可靠、简便的大鼠肺毛细血管周细胞的培养方法.
- 陈兵易斌杨勇王芝陈杨祖宝利鲁开智
- 关键词：周细胞细胞培养技术微脉管
- 胆红素对大鼠肺微血管内皮细胞增殖的影响
- 2014年
- 目的 评价胆红素对大鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）增殖的影响.方法 健康雄性SD大鼠10只,体重120 ～ 150 g,2～3月龄,原代培养、纯化及鉴定PMVECs.PMVECs接种于低糖DMEM培养基或96孔培养板,采用随机数字表法将其分为5组：对照组（C组）和不同浓度胆红素组（B1-4组）,每组30孔或48瓶.C组加入低糖DMEM培养基1ml,B11-4组分别加入5、10、20和50 μmol/L胆红素1ml.于孵育24、48和72 h时采用CCK-8法和3 H-TdR掺入法检测PMVECs增殖水平,采用RT-PCR法测定Akt1 mRNA和Smad3 mRNA的表达水平,采用Westen blot法测定磷酸化Akt1 （p-Akt1）蛋白和Smad3蛋白的表达水平.结果 与C组比较,B1组和B2组孵育各时点PMVECs增殖水平、Akt1mRNA和p-Akt1蛋白表达、Smad3 mRNA及其蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）,B3组孵育48 h时PMVECs增殖减弱,Akt1 mRNA和p-Akt1蛋白表达、Smad3 mRNA及其蛋白表达下调,B4组孵育48和72 h时PMVECs增殖减弱,Akt1 mRNA和p-Akt1蛋白表达、Smad3 mRNA及其蛋白表达下调（P＜0.05）;与B3组比较,B4组孵育72 h时PMVECs增殖减弱,Akt1 mRNA和p-Akt1蛋白表达、Smad3 mRNA及其蛋白表达下调（P＜0.05）.结论 高浓度胆红素可抑制PMVECs的增殖,其机制与下调Akt1和Smad3蛋白的表达有关.
- 祖宝利陈兵陈杨杨勇易斌鲁开智
- 关键词：胆红素细胞增殖内皮细胞
- SimMan综合模拟人在麻醉学本科实习学员临床技能培训中的应用被引量：3
- 2009年
- 目的提高和培养麻醉学本科实习学员在心肺复苏培训中的临床动手能力和临床综合诊断治疗等技能。方法将挪威Laerdal Medical公司出品的SimMan综合模拟人系统应用到麻醉学专业学生的心肺复苏技能培训和考核中，并通过问卷调查了解学生对该教学方法的满意度。结果在临床技能培训和考核方面，收到了良好的成效并得到了师生广泛的肯定。问卷调查显示，79．6％的学生对此教学方法表示很满意。结论应用SimMan综合模拟人系统有利于增强教学的直观性，提高学生的主动性，不会对病人造成伤害，对培养学生掌握复苏理论知识和实际操作能力、配合能力具有重要意义，值得在教学中进一步推广。
- 鲁开智陈杰陈金梅黄艰杨勇陶国才
- 关键词：SIMMAN综合模拟人模拟技术麻醉学
- 梗阻性黄疸患者血清对人PASMCs增殖、迁移及表型转换的影响
- 2014年
- 目的 探讨梗阻性黄疸患者血清对人肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）迁移、增殖及表型转换的影响.方法 分离人PASMCs,并传代培养,将培养的人PASMCs分别用梗阻性黄疸患者血清和健康志愿者血清孵育,于孵育24、48和72 h时采用CCK-8法和细胞划痕实验分别检测细胞增殖能力和迁移能力,采用Western blot法检测平滑肌-α-肌动蛋白（SM-α-actin）和钙调蛋白表达水平.结果 与健康志愿者血清孵育的人PASMCs比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育的PASMCs增殖能力和迁移能力增强,孵育24h时钙调蛋白表达上调,孵育48、72 h时SM-α-actin和钙调蛋白表达下调（P＜0.05）;与孵育24 h时比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育48 h时人PASMCs增殖能力和迁移能力增强,SM-α-actin表达上调,钙调蛋白表达下调（P＜0.05）;与孵育48 h时比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育72 h时人PASMCs迁移能力增强（P＜0.05）,增殖能力、SM-α-actin和钙调蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 梗阻性黄疸患者血清可增强人PASMCs增殖和迁移能力,并促进其向合成表型的转换.
- 杨勇陈兵陈杨祖宝利易斌鲁开智
- 关键词：细胞增殖细胞运动细胞分化
