张梦圆
- 作品数：23 被引量：28H指数：3
- 供职机构：新疆农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆维吾尔自治区自然科学基金新疆维吾尔自治区高校科研计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程自动化与计算机技术更多>>
- 新疆昭苏地区马梨形虫病病原及抗体检测被引量：6
- 2020年
- 马梨形虫病是由马驽巴贝斯虫和马泰勒虫寄生于马属动物的红细胞内所引起的一类血液原虫病,呈全球性分布,尤其在新疆发病率更高,处于逐年上升趋势,对区域性马产业的发展影响极大。为了解2018年新疆昭苏养马区域马梨形虫的感染情况,随机采集昭苏县18个乡镇的马全血及血清各858份,采用PCR和间接ELISA分别进行检测,对两种方法检测的18个地区、不同年龄阶段的马驽巴贝斯虫、马泰勒虫及混合感染情况进行统计学分析。结果显示,PCR检测马驽巴贝斯虫、马泰勒虫及混合感染的阳性率分别为12.12%、13.87%和2.80%;间接ELISA检测马驽巴贝斯虫、马泰勒虫及混合感染的抗体阳性率分别为15.50%、10.14%和2.56%;不同年龄阶段筛查结果显示,在6岁以下的马匹感染马驽巴贝斯虫、马泰勒虫及混合感染的阳性率较高,并且不同地区的不同年龄阶段马匹的马梨形虫感染率存在不同程度的差异。此次获得的昭苏县马梨形虫感染情况的一线数据,可为当地养马区域马梨形虫病的综合防控提供技术支撑。
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- 关键词：马梨形虫病病原抗体
- 马泰勒虫EMA2基因的真核表达及其在293T细胞中的定位
- 马泰勒虫病是一种严重危害宿主马的胞内寄生性原虫病,该病由媒介硬蜱传播,导致宿主马出现不同程度的临床症状,如发热,贫血,黄疸,严重时亦可引起死亡。新疆由于其独特地理环境,媒介硬蜱分布广,马泰勒虫病的感染情况可达90%,部分...
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- 关键词：真核表达细胞定位
- 文献传递
- 马泰勒虫裂殖子表面抗原2基因真核表达载体的构建及在293T细胞中表达
- 2020年
- 为了构建马泰勒虫裂殖子表面抗原(Theileria equi merozoite antigen,EMA)2的真核表达载体,试验采用PCR方法扩增出马泰勒虫EMA2基因,并构建真核表达载体pCMV-Flag-N-EMA2,用其转染293T细胞,通过Western-blot法检测EMA2蛋白的表达情况。结果表明:EMA2基因长度为819 bp,核酸测序证实pCMV-Flag-N-EMA 2真核表达载体构建成功,转染后Western-blot法可检测到EMA2蛋白的表达。说明马泰勒虫特异性的pCMV-Flag-N-EMA2真核表达载体可转染至293T细胞中,实现体外表达。
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- 关键词：同源重组转染真核表达载体
- 新疆哈巴河县流产牛病原检测被引量：1
- 2019年
- 随着新疆养牛业的发展,牛饲养量的逐渐增加,牛病也逐年增长。其中,母牛流产是影响养牛业发展的主要原因之一。母牛流产是由于母体与胎儿之间存在的正常生理关系受到破坏,导致妊娠中断,由疫病性因素引起的流产主要包括寄生虫病性流产和传染性疫病性流产,如新孢子虫、弓形虫引起的流产;布鲁菌病、小反刍兽疫、衣原体病、Q热病毒病等可引起的流产[1-5]。
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- 关键词：养牛业发展传染性疫病衣原体病新孢子虫病原检测布鲁菌病
- 马驽巴贝斯虫新疆伊犁株Bc48基因克隆、表达及其多克隆抗体的制备被引量：2
- 2018年
- 为表达马驽巴贝斯虫新疆伊犁株Bc48基因,制备多克隆抗体,试验根据GenBank中马驽巴贝斯虫Bc48基因序列,设计合成1对特异性引物,以提取的新疆株Bc48基因组DNA为模板进行PCR扩增,将扩增产物克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,阳性质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后表达产物进行SDS-PAGE分析,切胶纯化蛋白后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,制备多克隆抗体;同时把该基因克隆至真核表达载体pCMV-N-flag中,将阳性质粒转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中,提取pCMV-N-flag-Bc48质粒转染到293T细胞中进行真核表达。结果显示,获得了大小约为15ku的融合蛋白,与预期目的蛋白大小相一致;免疫BALB/c小鼠制备的多克隆抗体经ELISA和Western blotting检测、验证,能特异地识别相应抗原,其抗体效价可达1∶128 000,说明该多克隆抗体有较高的抗体效价和特异性;真核表达质粒在293T细胞中表达Bc48蛋白。本试验可为进一步研究马驽巴贝斯虫功能基因及建立快速的检测方法奠定基础,在虫株的分类学研究及候选疫苗的研制中有重要意义。
- 王盼举艾日登才次克许正茂闻秀秀党娜娜宋晶晶张梦圆巴音查汗
- 关键词：原核表达真核表达多克隆抗体
- 马泰勒虫昭苏流行株在去脾小鼠体内的扩繁试验
- 马泰勒虫病是马泰勒虫寄生于马属动物网状内皮系统、红细胞内而引起的蜱传血液原虫病。该病临床上表现稽留热、贫血、呼吸困难、黄疸及败血症等症状,如诊治不及时,死亡率极高,对地方马产业的发展危害较大。据前期实验调查发现,该病在新...
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- 关键词：实验动物模型昆明白小鼠
- 文献传递
- 南疆部分地区高山牦牛牛无浆体的PCR检测被引量：2
- 2019年
- 为了解南疆部分高山牦牛感染牛无浆体的情况,将2018年采集于巴音郭勒蒙古自治州哈尔诺尔牧场和喀什塔什库尔干塔吉克自治县的牦牛血样,以16S rRNA基因通用引物对提取的牦牛全血DNA进行PCR检测,并测序鉴定。结果显示,成功扩增了约1 500 bp左右的目的片段;哈尔诺尔牧场牦牛无浆体感染率为61.1%,塔什库尔干塔吉克自治县牦牛无浆体感染率为62.5%;阳性片段与基因库已记载的韩国牛无浆体相似性为98%,进化树分析显示与牛无浆体聚为一支。本研究为新疆高山牦牛无浆体病的防控提供依据。
- 李敏宋瑞其张剑张梦圆李才善樊新丽李仿鑫王向峰都拉提.阿力巴音查汗
- 关键词：南疆
- 马副蛔虫卵的鉴定及玻片标本的制作
- 2018年
- 为了探索马副蛔虫虫卵玻片永久性标本制作的理想方法,提供优质的标本资源,提高实验课教学的质量,笔者收集驱虫后的普氏野马马副蛔虫(雌),借助手术刀片切开其腹腔,取出子宫,离心沉淀后收集虫卵,取适量的虫卵与甲醛中混匀,制作玻片标本。结果表明,驱虫前后马副蛔虫感染率分别为87.50%和36.84%,感染强度(平均EPG)为128.6和43.6;制作的虫卵标本能准确显示蛔虫卵的原始形态,其形态特征保持原状,能克服气泡、发霉、变形等问题,具有经济实惠、能长久保存等特点。
- 道尔加拉苏布赛张梦圆樊新丽宋瑞其巴音查汗
- 关键词：普氏野马
- 新疆部分地区马驽巴贝斯虫病感染PCR检测调查被引量：1
- 2019年
- 为了解新疆部分地区马匹感染马驽巴贝斯虫病的流行情况,通过PCR方法对不同地区所采集的样品进行检测,并对不同地区和不同年龄段马驽巴贝斯虫感染情况进行单因素方差分析。结果显示,所检测的504份马血样中,54份血样为阳性,阳性率为10.71%。其中北疆昭苏种马场、阿勒泰、吐鲁番托克逊马驽巴贝斯虫阳性率分别为20.61%、5.17%、0;巴音布鲁克牧场、和静地区马驽巴贝斯虫阳性率分别为0和8.59%。从阳性样品中都检测到了驽巴贝斯虫BC48基因片段,与已知序列的同源性为99%。X≤3,39四个年龄段马驽巴贝斯虫感染率分别为9.76%、10.53%、11.21%和11.65%。单因素方差分析结果表明,昭苏种马场与阿勒泰、巴音布克牧场分别存在极显著性差异(P<0.01);巴音布鲁克牧场与和静也存在极显著性差异(P<0.01);昭苏种马场与吐鲁番托克逊存在显著性差异(P<0.05),其余各地方差异不显著。各个年龄段马驽巴贝斯虫感染无显著性差异。本试验的研究数据可为研究新疆马驽巴贝斯虫分布特点提供数据支撑。
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- 关键词：PCR单因素方差分析
- 驽巴贝斯虫截短HSP70基因克隆、表达及其生物信息学分析
- 2022年
- 为了对驽巴贝虫(Babesia caballi)HSP70基因进行原核表达获得生物信息学数据。本试验以新疆地方驽巴贝斯虫株截短HSP70基因组DNA为模板进行PCR扩增,序列比对分析,构建重组表达质粒HSP70-pET32a,经过IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot鉴定。并用纯化后的蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体。经生物信息学分析,该蛋白属于碱性、稳定亲水性蛋白,有7个抗原位点。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白大小为33 kDa,以包涵体蛋白的形式高效表达;Western blot结果表明,表达产物可被自然感染的马驽巴贝斯虫阳性血清识别,具有良好的免疫原性。经检测多克隆抗体效价可达1∶1 024 000。本试验将为进一步探究驽巴贝斯虫HSP70蛋白作为抗驽巴贝斯虫疫苗和免疫学诊断方法的候选抗原及其功能研究提供了参考依据。
- 张梦圆张杨宋晶晶肖培培樊新丽李敏吾力江李才善巴音查汗·盖力克
- 关键词：驽巴贝斯虫HSP70基因原核表达免疫原性生物信息学
