祝聪聪 作品数:5 被引量:25 H指数:2 供职机构: 河北联合大学 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
PD98059对离体四氯化碳刺激肝星状细胞周期和细胞内Ca^(2+)浓度影响 被引量:1 2013年 目的探讨特异性有丝分裂原活化蛋白激酶抑制剂PD98059对离体四氯化碳(CCl4)刺激的肝星状细胞(HSC)周期和细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响。方法 HSC常规复苏传代培养,同步化后分为空白对照组、CCl4组和CCl4+PD98059(100μmol/L)组。检测细胞周期以反映细胞增殖情况,用钙离子荧光探针进行荧光染料负载,用激光扫描共聚焦显微镜测定[Ca2+]i。结果流式细胞结果可见CCl4刺激HSC后,S/G2期细胞增多,G1期细胞减少(P<0.05),PD98059对这一过程有抑制作用(P<0.05);激光扫描共聚焦显微镜检测可见CCl4组的[Ca2+]i较空白对照组增强(P<0.05),CCl4+PD98059组细胞内[Ca2+]i降低(P<0.05)。结论 PD98059可以降低CCl4刺激的HSC中[Ca2+]i,对细胞从静止期进入活动期有抑制作用。 祝聪聪 李娜 肖永红 李琰关键词:肝星状细胞 细胞外信号调节激酶 PI3K抑制剂PI103对四氯化碳刺激的肝星状细胞凋亡和细胞内钙离子浓度的影响 2013年 目的探讨PI3K抑制剂PI103对四氯化碳(CCl4)刺激的肝星状细胞(HSC)凋亡率和细胞内游离钙离子([Ca2+]i)浓度的影响,为肝纤维化的治疗提供理论基础。方法将HSC株于37℃、5%CO2孵育箱中复苏传代培养,同步化后将细胞分为3组:空白对照组、CCl4组、CCl4+PI3K抑制剂组。用锚定蛋白V异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V FITC/PI)双标记染色,通过流式细胞仪观察各组细胞凋亡情况;以钙离子荧光探针(Fluo-3AM)为[Ca2+]i荧光指示剂负载细胞,用激光扫描共聚焦显微镜观察[Ca2+]i变化情况。结果 CCl4作用后,HSC凋亡率的变化不明显(P>0.05),但[Ca2+]i荧光强度明显增强(P<0.05)。PI3K抑制剂作用于经CCl4刺激的HSC后,细胞凋亡率增加(P<0.05),[Ca2+]i荧光强度减弱(P<0.05)。结论 PI3K抑制剂PI103可增加HSC的凋亡率,降低[Ca2+]i浓度。 李娜 祝聪聪 肖永红关键词:PI3K抑制剂 凋亡 钙离子 PI3K抑制剂对四氯化碳刺激的肝星状细胞增殖和Ⅰ型胶原表达的影响 被引量:12 2013年 目的探讨PI3K抑制剂对四氯化碳(CCl4)刺激的肝星状细胞(HSC)增殖和Ⅰ型胶原表达的影响,为肝纤维化的治疗提供理论基础。方法将液氮保存下的HSC株,于37℃,50mL/L CO2孵育箱中复苏传代培养,同步化后将细胞分为5组:空白对照组、CCl4组、CCl4+1μmol/L PI103组、CCl4+2μmol/L PI103组、CCl4+4μmol/L PI103组,分别培养48h。用透射电子显微镜初步观察了细胞形态改变;MTT比色法测定细胞增殖情况;免疫细胞化学测定细胞的Ⅰ型胶原表达情况。结果 CCl4组与空白对照组比较,细胞生长旺盛,细胞数目增多,Ⅰ型胶原表达增多;透射电子显微镜下可见CCl4+4μmol/L PI103组比CCl4组凋亡细胞显著增多,细胞数目减少;MTT和免疫细胞化学实验结果显示,与CCl4组比较,CCl4+1μmol/L PI103组、CCl4+2μmol/L PI103组、CCl4+4μmol/L PI103组细胞的增殖和Ⅰ型胶原的表达均减少,随着PI103剂量加大,细胞的增殖和Ⅰ型胶原的表达均减少,但CCl4+4μmol/L PI103组和CCl4+2μmol/L PI103组比较,细胞的增殖无明显变化。结论 PI3K抑制剂PI103可抑制活化的HSC的增殖,促进其凋亡以及减少其Ⅰ型胶原的表达。 李娜 祝聪聪 肖永红 张文丽 刘亦民关键词:PI3K抑制剂 增殖 PI3K/AKT信号通路 PD98059对体外CCl_4刺激的肝星状细胞增殖及I型胶原纤维表达的影响 被引量:2 2013年 目的探讨特异性MEK抑制剂PD98059对体外肝星状细胞增殖及I型胶原纤维表达的影响。方法将液氮保存下的肝星状细胞株,于37℃、5%CO2孵育箱中复苏传代培养,同步化后将细胞分为3组:对照组、CCl4组、CCl4+不同剂量PD98059(20、50、100μmol/L),用透射电镜观察细胞超微结构,MTT比色法检测细胞增殖情况及免疫细胞化学法测定I型胶原纤维表达。结果透射电子显微镜可见PD98059组比CCl4组凋亡细胞显著增多,细胞数目减少;CCl4刺激HSC后,细胞明显增殖(P﹤0.05),各剂量组PD98059对细胞增殖均有抑制作用(P﹤0.05),抑制率分别为21.84%、38.27%、46.65%;CCl4组HSC中的I型胶原表达与对照组比较显著增加(P﹤0.05),PD98059明显抑制I型胶原表达(P﹤0.05)。结论 PD98059对CCl4刺激HSC增殖及I型胶原的表达具有抑制作用。 祝聪聪 肖永红 李娜 张文丽 刘亦民关键词:肝星状细胞 细胞外信号调节激酶 增殖 PI3K抑制剂对肝星状细胞PI3K/AKT通路及Ⅲ型胶原表达的影响 被引量:10 2014年 目的探讨PI3K抑制剂(PI103)对肝星状细胞(HSC)PI3K/AKT通路及Ⅲ型胶原表达的影响,为肝纤维化的治疗提供理论基础。方法将液氮保存下的HSC株,于37℃,5%CO2孵育箱中复苏传代培养,同步化后将细胞分为3组:空白对照组、CCl4组、CCl4+PI3K抑制剂组。QPCR方法检测PI3K、AKT信号分子mRNA水平的变化;免疫细胞化学方法测定HSC的PI3K、AKT信号分子和Ⅲ型胶原表达情况。结果 CCl4组和空白对照组比较,PI3K、AKT信号分子mRNA水平和蛋白表达均增多,Ⅲ型胶原生成增多,差异有统计学意义(P<0.05)。CCl4组和CCl4+PI103组比较,PI3K、AKT信号分子mRNA水平和蛋白表达均减少,III型胶原生成减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PI3K抑制剂可降低PI3K、AKT信号分子及Ⅲ型胶原的表达,进而阻断肝纤维化进程。 李娜 肖倩 祝聪聪 王悦 肖永红关键词:PI3K/AKT通路