江丽娜
- 作品数:15 被引量:57H指数:3
- 供职机构:天津市结核病控制中心更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 2021-2022年天津市某中心非结核分枝杆菌菌种鉴定
- 2024年
- 目的 通过对肺部感染患者的非结核分枝杆菌(NTM)进行菌种鉴定分析,探讨NTM菌种类型和分布情况。方法 收集2021年1月-2022年12月期间就诊于天津市结核病控制中心门诊,疑似肺结核患者的呼吸道标本14 414例进行分枝杆菌培养(BACTEC MGIT 960和改良罗氏法),纳入1 838例培养阳性标本,采用结核分枝杆菌抗原MPT64胶体金法进行菌群鉴定,对MPT64检测阴性或MPT64结果阳性但有质疑的样本,进行罗氏培养基转种,抗酸染色初筛后,采用DNA微阵列芯片技术进行分枝杆菌菌种鉴定,无法确定的菌株进一步采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定。对剔除重复后的NTM菌株在不同年龄、性别、以及NTM不同类菌株的分布特征进行回顾性分析。结果 2021-2022年分离培养的分枝杆菌中,剔除重复菌株,共有1 289例标本分枝杆菌培养阳性。通过4种方法联合使用,剔除重复后,确定从313例标本中分离出315株NTM菌株,NTM分离率为24.44%(315/1 289)。NTM分离株中,构成比占前4位者依次为胞内分枝杆菌26.03%(82/315)、慢生黄分枝杆菌20.00%(63/315)、脓肿分枝杆菌16.19%(51/315)、堪萨斯分枝杆菌10.79%(34/315)。男性NTM感染者190例,女性123例,比例为1.54∶1。4种NTM优势菌株的年龄分布中,脓肿分枝杆菌偏向于年轻患者,胞内分枝杆菌老年患者偏多。结论 本中心NTM分离率较高,NTM分布种类多样,优势菌株以胞内分枝杆菌、慢生黄分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌为主。
- 赵慧巨韩芳王志锐江丽娜孙蕊张国钦李晓蓉王春花
- 关键词:非结核分枝杆菌菌种鉴定
- 即时痰和体外培养条件下结核分枝杆菌sigma因子表达差异分析被引量:2
- 2023年
- 目的为了解sigma因子在即时痰的表达情况,探索与致病性结核分枝杆菌毒力关系密切的sigma因子。方法选取2018年1~12月天津市结核病控制中心门诊部确诊的结核病患者,对其痰涂片阳性和xpert阳性确诊的肺结核随机选择20份痰阳性标本进行实验。每一例肺结核患者在其开始治疗前收集2份即时痰标本,一份立刻抽提RNA,一份进行体外培养。体外培养的菌株在生长对数期提取RNA。设计13个sigma因子的特异性引物,通过荧光定量PCR(RT-PCR)的方法,分析其在即时痰临床分离株和体外培养株的转录表达差异。以核糖体16s为参照基因,利用2^(ΔCt)分析sigma因子的转录倍数,将稳定表达的sigA作为统计分析的底物,单因素方差ANOVA分析其余sigma因子的表达差异。结果临床分离菌与H37Rv相比,所有的sigma因子统计分析差异均不显著(P均>0.05);临床分离菌与体外培养株相比,只有sigM表达量最高(P<0.05),统计分析差异显著。结论sigM在细菌感染的初级阶段转录水平明显增高,但其具体作用还不清楚,可能参与了宿主免疫系统和细菌逃离机制之间的相互平衡。
- 江丽娜穆成孙蕊王春花
- 关键词:结核分枝杆菌痰液
- Sigma因子基因表达与结核分枝杆菌异烟肼耐药关系探讨被引量:1
- 2024年
- 目的研究调控基因Sigma因子(sigA-sigM)在katG突变导致的异烟肼耐药结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)中的表达调控是否与异烟肼耐药相关,为研究异烟肼耐药的分子机制提供参考依据。方法选择2020—2022年天津市结核病控制中心耐药检测期间收集的初治患者菌株共95株,其中katG基因未突变的全敏菌株30例,katG突变导致的异烟肼耐药菌株共65例,包括11例单耐异烟肼菌株,24株异烟肼多耐药菌株(同时耐异烟肼和链霉素),30例异烟肼耐多药菌株(同时耐异烟肼、链霉素和利福平)。在异烟肼含药培养基上收集菌株后,提取菌株RNA,应用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测Sigma因子的相对表达量,采用Mann-Whitney U检验分析各个Sigma因子在不同异烟肼耐药表型菌株中的表达差异。结果sigA、sigC、sigF、sigG、sigH、sigI、sigJ、sigK、sigL的基因表达量在单耐异烟肼组中的表达量高于全敏组,差异有统计学意义(Z=4.368、5.701、6.865、4.021、5.126、2.670、5.983、4.701、5.490,P均<0.001)。多耐药组中sigA、sigC、sigE、sigF、sigG、sigH、si⁃gI、sigJ、sigK、sigL的基因表达量显著高于全敏组,差异有统计学意义(Z=-5.017、-4.670、-4.667、-5.456、-4.083、-5.393、-4.712、-6.971、-8.206、-5.211,P均<0.001)。耐多药组中sigC、sigD、sigE、sigF、sigG、sigH、sigI、sigJ、sigK、sigL的基因表达量显著高于全敏组,差异有统计学意义(Z=-5.537、-4.003、-5.216、-7.328、-7.730、-5.658、-4.440、-6.036、-4.862、-4.312,P均<0.001)。sigB、sigF、sigG在异烟肼单耐药、异烟肼耐多药和异烟肼多耐药3组之间的基因表达量差异显著,有统计学意义(Z=10.139、7.735、14.532,P均<0.001)。sigF、sigG、sigI、sigJ、sigL在异烟肼耐药组中的高表达率显著高于敏感组,差异有统计学意义(χ^(2)=17.410、45.673、57.661、42.896、26.363,P均<0.001)。结论sigF、sig
- 江丽娜高丽王志锐王秀月王春花
- 关键词:耐药结核
- 二代线性探针技术在结核分枝杆菌耐药性检测中的价值被引量:3
- 2019年
- 目的评价二代线性探针技术(GenoType MTBDRplus VER 2.0,简称“GenoType 2.0”)快速检测结核分枝杆菌(MTB)临床分离株对异烟肼与利福平耐药性的临床应用价值。方法收集2017年4月至2019年4月天津市结核病控制中心参比实验室中疑似肺结核患者的痰标本共6315份,纳入涂阳、培阳且经菌群鉴定为MTB的349株菌株为研究对象,分别采用表型药物敏感性试验(简称“比例法药敏试验”)和GenoType 2.0检测菌株对利福平、异烟肼的耐药性;并以比例法药敏试验结果为参考标准,评价GenoType 2.0的检测效能。结果GenoType 2.0、比例法药敏试验和GenoType 2.0+比例法药敏试验检测349株MTB菌株对利福平敏感、单耐、耐利福平+异烟肼菌株的检出率分别为86.53%(302/349)、87.97%(307/349)、86.25%(301/349),2.58%(9/349)、2.29%(8/349)、2.29%(8/349),10.89%(38/349)、9.74%(34/349)、11.46%(40/349),前者与后两者及后两者对敏感、单耐、耐利福平+异烟肼菌株检出率差异均无统计学意义(χ^2=0.322,P=0.851;χ^2=0.112,P=0.946;χ^2=0.546,P=0.761);对异烟肼敏感、单耐、耐利福平+异烟肼菌株的检出率分别为79.94%(279/349)、80.23%(280/349)、79.65%(278/349),9.17%(32/349)、9.46%(33/349)、9.46%(33/349),10.89%(38/349)、10.32%(36/349)、10.89%(38/349),前者与后两者及后两者对敏感、单耐、耐利福平+异烟肼菌株检出率差异均无统计学意义(χ^2=0.071,P=0.965;χ^2=0.017,P=0.991;χ^2=0.061,P=0.970)。以比例法药敏试验为参考标准,GenoType 2.0对利福平和异烟肼耐药性检测的敏感度、特异度、符合率、Kappa值分别为91.67%(44/48)和95.89%(70/73)、99.00%(298/301)和100.00%(276/276)、97.99%(342/349)和99.14%(346/349)、0.91和0.97。结论GenoType 2.0对于利福平和异烟肼的耐药性检测具有较高的敏感度和特异度,加上其检测周期较短,可以满足临床对结核病早期诊断和及时治疗的需求。
- 江丽娜穆成孙蕊王志锐戴文汐王春花
- 关键词:抗多种药物性分子探针技术微生物敏感性试验利福平异烟肼
- 结核分枝杆菌异烟肼或利福平不同耐药表型中sigma因子表达差异研究
- 2024年
- 目的分析比较在结核分枝杆菌异烟肼耐药表型和利福平耐药表型中同一种sigma因子m RNA表达量的差异。方法回顾性收集天津市结核病控制中心门诊部2020—2022年耐药监测期间分离的利福平或异烟肼单耐药、耐多药和敏感菌株,提取对数期生长菌株RNA,应用荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测结核分枝杆菌sigma因子(sigA~sigL)在各个耐药组和敏感组中的mRNA表达水平,采用Mann-Whitney U检验分析各耐药组与敏感组之间的基因表达差异,采用χ^(2)检验分析各耐药组与敏感组之间的基因高水平表达率差异。结果除sigB外,sigA、sigL在异烟肼单耐药组中的表达量均显著高于敏感组(均P<0.05);除sigD、sigI外,sigA、sigL在利福平单耐药组中的表达量均显著高于敏感组(均P<0.05);sigA、sigD、sigF、sigG、sigH、sigJ、sigK在耐多药组(异烟肼含药培养基)与敏感组中的相对表达量比较差异有统计学意义(均P<0.05);除sigD、sigI外,sigA、sigL在耐多药组(利福平含药培养基)与敏感组中相对表达量比较差异有统计学意义(均P<0.05);sigG、sigI、sigJ、在异烟肼单耐药组中高水平表达率(高水平表达数/菌株数)均显著高于敏感组,差异有统计学意义(χ^(2)=32.676、26.424、21.171,均P<0.05);sigJ在利福平单耐药组中高表达率高于敏感组,差异有统计学意义(χ^(2)=21.171,P<0.05);sigG、sigI、sigJ在耐多药组(异烟肼含药培养基)中高表达率高于敏感组,差异有统计学意义(χ^(2)=32.676、26.424、21.171,均P<0.05);sigJ在耐多药组(利福平含药培养基)组中高水平表达率高于敏感组,差异有统计学意义(χ^(2)=21.171,P<0.05)。结论通过对表达量和高表达率结果的综合比较和分析,sigma因子中的sigF、sigG、sigJ、在异烟肼单耐药、利福平单耐药、耐多药组中的表达量和表达率高于敏感组,可能与异烟肼和利福平耐药相关。
- 江丽娜高丽王志锐戴文汐王秀月王春花
- 关键词:耐多药结核分枝杆菌
- Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的准确性与结核病患者痰细菌载量的相关性:一项天津市的回顾性研究被引量:3
- 2023年
- 目的分析Xpert MTB/RIF不同细菌载量(1+、2+、3+、4+)检测结核分枝杆菌利福平(RIF)耐药的准确性,为有效临床药敏结果判断提供参考。方法回顾性收集2020年1月至2021年12月天津市结核病控制中心参比室接收的1936份结核病疑似患者痰标本的液体BACTEC MGIT960培养阳性检测结果,排除16份非结核分枝杆菌后,1158份XpertMTB/RIF阳性标本的结果纳入分析,对Xpert MTB/RIF检测阳性且液体BACTEC MGIT960培养阳性的1142例结核分枝杆菌(MTB)菌株进行常规培养法体外药物表型药敏试验(DST)。应用SPSS 19.0软件进行统计学分析,结果采用配对χ^(2)检验,P<0.05为差异有统计学意义;两种检验方法的一致性采用Kappa检验。结果1936份液体BACTEC MGIT960培养阳性标本中XpertMTB/RIF检测结核的阳性筛查率为59.81%,XpertMTB/RIF检测结核的细菌载量1+~4+中,RIF耐药的检出率分别为8.88%、14.91%、11.37%、15.15%。以表型DST作为检测利福平耐药的参照标准,当细菌载量从1+到4+,表型DST与Xpert MTB/RIF检测利福平的符合率分别为95.39%(290/304)、95.96%(380/396)、96.79%(332/343)、96.97%(96/99),差异无统计学意义(趋势χ^(2)=1.069,P=0.785),一致性较高;Xpert MTB/RIF检测利福平的灵敏度呈上升趋势,分别为80.95%(17/21)、97.96%(40/41)、93.75%(30/32)、100.00%(12/12),差异无统计学意义(趋势χ^(2)=7.280,P=0.063);特异度分别为96.47%(273/283)、95.77%(340/355)、97.11%(302/311)、96.55%(84/87),差异无统计学意义(χ^(2)=0.860,P=0.835);阳性预测值分别为62.96%(17/27),72.73%(40/55),76.92%(30/39),80.00%(12/15),差异无统计学意义(χ^(2)=2.047,P=0.563);阴性预测值分别为98.56%(273/304)、99.71%(340/341),99.34%(302/304)、100.00%(84/84),且差异有统计学意义(χ^(2)=64.661,P<0.001)。Xpert MTB/RIF细菌载量从1+到4+的kappa值分别为0.68、0.81、0.83、0.87。表型DST与Xpert MTB/RIF检测RIF结果不一致的菌株中,细菌载量为1+,RIF的检测结果与熔解曲线相比,一致�
- 江丽娜王志锐高丽孙蕊王秀月王春花
- 关键词:体外药敏试验利福平
- 天津市2005—2015年学校肺结核流行病学特征分析被引量:30
- 2016年
- 目的了解2005—2015年天津市学校肺结核疫情流行特征,为制定相应防控对策提供依据。方法收集结核病管理信息系统中天津市2005—2015年登记的学校肺结核患者,用SPSS 16.0对数据进行统计学分析。结果 2005—2015年天津市共报告学校肺结核患者3 340例,占全人口报告肺结核患者的8.92%(3 340/37 447);涂阳肺结核患者865例,占所有报告肺结核患者的2.31%。学校肺结核发病主要集中在第二季度(32.49%),其次为第四季度(26.74%);学生肺结核患者中男、女性别比为1.46∶1;发病人群以大学及以上学生肺结核所占比例最高,占学生肺结核患者总数的61.29%(50.49%-77.42%)。学校肺结核患者中就诊延误患者1 420例,就诊延误率为42.51%。男性、涂阴患者及就读于高校的患者更容易出现就诊延误情况(χ-2值分别为8.21,202.63,9.08,P值均〈0.05)。结论天津市2005—2015年学校肺结核登记人数呈下降趋势,但是学校肺结核占全人口肺结核的比例仍高于全国平均水平。
- 李晓蓉李敬新江丽娜庞学文
- 关键词:结核流行病学研究
- σ因子在四种结核分枝杆菌临床株中的表达分析被引量:2
- 2020年
- 目的探索在体外培养的环境下,结核分枝杆菌13种σ因子在临床分离的敏感菌株、单耐异烟肼(INH)、单耐利福平(RFP)、耐多药(同时耐INH和RFP)菌株中的表达情况。方法选取2018年1—12月天津市结核病控制中心门诊部确诊的结核病患者,对其痰标本快培阳性的实验菌株进行比例法药敏实验,随机分别选择10株全敏菌株、单耐异烟肼、单耐利福平、同时耐利福平和异烟肼的菌株进行Hain实验,随机分别选择10株katG突变的单耐异烟肼菌株、rpoB突变的单耐利福平菌株、katG和rpoB同时突变的耐多药临床分离株。以传统的Trizol方法提取全菌RNA,设计σ因子的特异性引物,以荧光定量PCR的方法,检测σ因子在转录水平上RNA的表达情况。以核糖体16s为参照基因,利用2-ΔCt分析σ因子的转录倍数。将稳定表达的sigA作为统计分析的底物,单因素方差(ANOVA)分析其余σ因子的表达差异。结果σ因子在四种临床分离株中的表达情况与H37Rv相比,虽然所有的σ因子转录水平都提高,但是差异无统计学意义(P>0.05)。三种耐药表型菌株和敏感菌相比,σ因子表达量也都上调,在单耐异烟肼的菌株中,sigC、sigG、sigI、sigJ、sigK表达倍数最高,单因素方差分析差异有统计学意义(P<0.05)。在单耐利福平表型中,只有sigC、sigG表达倍数最高,但差异无统计学意义(P>0.05)。在耐多药菌株中,sigC表达倍数最高,表达倍数>10(P<0.05)。结论耐药基因的突变能够上调σ因子的转录水平,σ因子中sigB、sigC、sigG、sigI、sigJ、sigK可能会成为研究耐药新药方面的新的靶标。
- 江丽娜孙蕊穆成王志锐赵慧巨韩芳王春花
- 关键词:结核分枝杆菌异烟肼利福平耐多药转录
- GenoType MTBDRplus VER 2.0试剂盒检测痰标本中结核分枝杆菌复合群的效果评价被引量:7
- 2020年
- 目的评价GenoType? MTBDRplus VER 2.0试剂盒检测痰标本中结核分枝杆菌复合群(MTBC)的检测效能。方法对177例疑似肺结核患者的痰标本同时进行涂片,MGIT液体培养和GenoType? MTBDRplusVER 2.0检测。对培养阳性菌株进行菌种鉴定。使用SPSS 22.0统计软件对结果进行统计学分析,计数资料的一致性比较使用Kappa检验。K值≥0.75认为一致性很好。对MTBC检测的效能比较分析用敏感度、特异度进行效果评估。结果以MGIT液体培养结果为判断标准,GenoType? MTBDRplusVER 2.0检测痰标本中MTBC的敏感度为91.67%,特异度为95.58%,阳性预测值为91.67%,阴性预测值为95.58%,总符合率为94.22%。对两种方法进行一致性Kappa检验,K=0.872(P<0.001)。结论GenoType? MTBDRplus VER 2.0试剂盒检测痰标本中MTBC具有较高的敏感度和特异度,对于结核病的早期诊断有很好的应用价值。
- 穆成江丽娜赵慧王志锐王春花
- 关键词:结核分子探针技术结核分枝杆菌
- 基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法对MGIT960阳性管中微生物的菌种鉴定被引量:1
- 2023年
- 目的 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)法对BACTECTMMGIT960(简称“MGIT960”)仪器报告阳性的培养管中的微生物进行菌种鉴定,并分析不同菌株的分布情况。方法 收集2021-2022年天津市结核病控制中心参比实验室MGIT960仪器报告的阳性管2 662管,将液体培养物分别转种至血平板和中性罗氏培养基,对获得的分离株应用MALDI-TOF MS法进行鉴定,根据质谱结果将同一患者在同一种培养基上不重复的结果全部纳入菌种分布情况的构成比分析。对于质谱未检出的菌株,选取38株进行16S rRNA基因测序。结果 血平板共获得分离株605株,将501株纳入分析,其中分枝杆菌属占17.76%(89/501),以脓肿拟分枝杆菌10.18%(51/501)和偶发分枝菌酸杆形菌3.19%(16/501)为主,分枝杆菌以外的细菌占68.06%(341/501),以皮疽诺卡菌15.57%(78/501)、痰液戈登氏菌9.38%(47/501)和支气管戈登氏菌7.58%(38/501)为主,71株未检出,占14.17%(71/501);中性罗氏培养基获得分离株2 378株,纳入1 748株进行分析,其中分枝杆菌属占78.72%(1 376/1 748),以结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)60.53%(1 058/1 748)、奇美拉胞内分枝杆菌组4.69%(82/1 748)、慢生黄分枝杆菌3.55%(62/1 748)为主,分枝杆菌以外的细菌占17.11%(299/1 748),以皮疽诺卡菌4.35%(76/1 748)、痰液戈登氏菌2.69%(47/1 748)和支气管戈登氏菌2.12%(37/1 748)为主,73株未检出,占4.18%(73/1 748)。38株质谱未检出的细菌经测序发现均为放线菌门和厚壁菌门的菌株。结论 MGIT960仪器报告阳性的培养管中非结核分枝杆菌(nontuberculous Mycobacterium, NTM)和分枝杆菌以外的细菌种类繁多,且绝大多数均可通过质谱快速鉴别。分枝杆菌以外的细菌以诺卡菌属和戈登氏菌属为主,应在鉴别诊断中关注此类细菌感染。
- 巨韩芳穆成赵慧江丽娜王春花
- 关键词:基质辅助激光解吸电离结核分枝杆菌属