任峰
- 作品数:5 被引量:29H指数:4
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- TLR4-MMP-2/MMP-9信号通路在氧糖剥夺-复糖复氧诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用被引量:2
- 2019年
- 目的探讨Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)-基质金属蛋白酶2(matrix metalloprotein,MMP-2)/基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein,MMP-9)信号通路在氧糖剥夺-复糖复氧诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用。方法离体培养人脐静脉内皮细胞株HUVEC-12,以1×106/mL接种于6孔板(每孔2mL)或1×104/mL接种于96孔板(每孔200μL),采用随机数字表法将36孔样本分为4组,对照组(C组)、氧糖剥夺组(O组),TAK242+氧糖剥夺组(TO组),CCT+氧糖剥夺处理组(MO组),每组6孔。O、TO和MO组人脐静脉内皮细胞接受氧糖剥夺6h后复糖复氧24h;TO和MO组人脐静脉内皮细胞接受氧糖剥夺前1h向培养基中分别加入TLR4特异性阻断剂TAK242(10μmol/mL)和MMP-2/MMP-9特异性抑制剂CCT(200μg/mL);对照组(C组)人脐静脉内皮细胞正常培养。按照各组处理收集细胞,Annexin V-FITC/PI双染色-流式细胞法测定细胞凋亡率,MTT法测定细胞生存率,Transwell法检测HUVEC-12细胞电阻值及渗透性,酶联免疫吸附测定法检测TNF-α和IL-1β浓度,Western blot法测定MMP-2、MMP-9表达。结果与C组比较,O组、TO组和MO组HUVEC-12细胞凋亡率和葡聚糖-FITC荧光强度升高,存活率和电阻值降低,TNF-α、IL-1β、MMP-2和MMP-9表达水平升高(P<0.05);与O组比较,TO组HUVEC-12细胞凋亡率和葡聚糖-FITC荧光强度降低,存活率和电阻值升高,TNF-α、IL-1β、MMP-2和MMP-9表达水平下降(P<0.05);与O组比较,MO组HUVEC-12细胞凋亡率和葡聚糖-FITC荧光强度降低,存活率和电阻值升高,TNF-α和IL-1β表达水平下降(P<0.05);与TO组比较,MO组HUVEC-12细胞凋亡率和葡聚糖-FITC荧光强度升高,存活率和电阻值降低,TNF-α、IL-1β、MMP-2和MMP-9表达水平升高。结论氧糖剥夺-复糖复氧诱导HUVEC-12细胞凋亡的机制可能与激活TLR4-MMP-2/MMP-9信号通路相关。
- 刘琳琳魏海婷郭继锋任峰
- 关键词:缺氧人脐静脉内皮细胞细胞凋亡
- mito-KATP在右美托咪定抑制蛛网膜下腔出血致大鼠心肌细胞程序化死亡中的作用被引量:4
- 2019年
- 目的评价线粒体ATP敏感性钾通道(mito-KATP)在右美托咪定抑制蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠心肌细胞程序化死亡中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠120只,9~10周龄,体重350~400 g,采用随机数字表法分为5组(n=24):假手术组(Sham组)、SAH组、SAH+右美托咪定组(SD组)、5-羟癸酸(5-HD)+SAH+右美托咪定组(HSD组)和5-HD+ SAH(HS组)。采用颅内血管穿刺法制备大鼠SAH模型;SD组和HSD组刺破血管后颈内静脉泵注右美托咪定(5 μg/kg)10 min,并以5 μg·kg^-1·h^-1持续泵注右美托咪定1 h;HSD组和HS组腹腔注射5-HD 30 mg/kg后1 h刺破血管。刺破血管后24 h时采集腹主动脉血样,测定血清cTnI浓度,随后处死大鼠取心肌,TUNEL法确定细胞程序化死亡率,采用DCFH-DA法检测ROS活性,采用Western blot法检测cleaved caspase-3、cleaved caspase-1和IL-1β表达。结果与Sham组比较,SAH组、SD组、HSD组和HS组血清cTnI浓度、细胞程序化死亡率和ROS活性升高,cleaved caspase-3、cleaved caspase-1和IL-1β表达上调(P<0.05);与SAH组比较,SD组血清cTnI浓度、细胞程序化死亡率和ROS活性降低,cleaved caspase-3、cleaved caspase-1和IL-1β表达下调,HS组血清cTnI浓度、细胞程序化死亡率和ROS活性升高,cleaved caspase-3、cleaved caspase-1和IL-1β表达上调(P<0.05);与SD组比较,HSD和HS组血清cTnI浓度、细胞程序化死亡率和ROS活性升高,cleaved caspase-3、cleaved caspase-1和IL-1β表达上调(P<0.05);与HSD组比较,HS组血清cTnI浓度、细胞程序化死亡率和ROS活性升高,cleaved caspase-3、cleaved caspase-1和IL-1β表达上调(P<0.05)。结论mito-KATP参与了右美托咪定抑制SAH大鼠心肌细胞程序化死亡的过程。
- 刘琳琳任峰魏海婷郭继峰陈永清卜少卿谢薇薇吕林
- 关键词:右美托咪啶心肌细胞凋亡蛛网膜下腔出血
- 七氟醚诱发老龄大鼠认知功能的改变与TLR4-MyD88信号通路的关系被引量:6
- 2017年
- 目的探讨七氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能的改变以及与Toll样受体4-髓系分化因子88(TLR4-MyD88)信号通路的关系。方法雄性SD大鼠48只按照随机数字表法分为4组(n=12),分别为对照组、七氟醚处理组(S组)、TAK242+七氟醚处理组(TS组)以及ST2825+七氟醚处理组(SS组)。TS和SS组大鼠侧脑室注射20μL TAK242(1g/L)和20μL ST2825(1g/L),对照组和S组仅侧脑室注射等量生理盐水。随后S组、TS组和SS组大鼠吸入40g/L七氟醚6h,对照组仅吸入空气.氧气混合气体。采用Morris水迷宫实验及旷场实验评价老龄大鼠认知能力.采用酶联免疫吸附法测定海马组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)水平,采用Western blotting法测定海马组织中β-粉样蛋白(Aβ)的表达。结果与对照组比较,S组大鼠在七氟醚麻醉后2-4d逃避潜伏期延长,跨格次数和直立次数减少,中央停留时间延长,TNF—α、IL-1β和Aβ表达增加,差异均有统计学意义(P〈0.05);与S组比较,TS和SS组七氟醚麻醉后2-4d逃避潜伏期缩短,跨格次数和直立次数增加,中央停留时间缩短,TNF-α、IL-1β和Aβ表达下降,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论七氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍的机制可能与TLR4-MyD88信号通路激活有关。
- 任峰魏海婷刘琳琳郭继峰谢薇薇
- 关键词:TOLL样受体七氟醚神经毒性
- 促红细胞生成素在七氟醚麻醉诱发老龄大鼠海马神经细胞凋亡中的作用被引量:4
- 2017年
- 目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)减轻七氟醚麻醉诱发老龄大鼠海马神经细胞凋亡的作用以及与Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)的关系。方法雄性SD大鼠,20月龄,体重550~750g,根据随机数字表法将大鼠分为三组(n=9):对照组(C组),七氟醚处理组(S组)和EPO+七氟醚处理组(ES组)。S及ES组大鼠吸入4%七氟醚6h;C组仅吸入空气-氧气混合气体;ES组大鼠在七氟醚处理后24、48和72h行尾缘静脉注射EPO(5 000U/kg),C组和S组仅注射等量生理盐水。采用Morris水迷宫实验评价大鼠的认知能力,采用TUNEL法评价大鼠海马神经细胞凋亡率,采用RT-PCR法测定海马组织中TLR4mRNA表达,采用JC-1免疫荧光染色法检测海马神经细胞线粒体膜电位水平;采用免疫蛋白印迹法测定海马组织中淀粉样前体蛋白(APP)和β-淀粉样肽(Aβ)蛋白表达。结果与C组比较,S组逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数差异无统计学意义,神经细胞凋亡率明显增加,TLR4mRNA表达明显下降,海马神经细胞线粒体膜电位水平明显下降,APP和Aβ表达明显增加(P<0.05);与S组比较,ES组逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数差异无统计学意义,神经细胞凋亡率明显下降,TLR4 mRNA表达明显升高,海马神经细胞线粒体膜电位水平上升,APP和Aβ表达明显减少(P<0.05)。结论促红细胞生成素能够减轻七氟醚诱发老龄大鼠海马区神经细胞的凋亡,其机制可能与抑制TLR4 mRNA表达,改善线粒体膜电位水平和抑制APP和Aβ蛋白活化相关。
- 任峰魏海婷刘琳琳郭继峰陈永清卜少卿谢薇薇
- 关键词:TOLL样受体七氟醚海马细胞凋亡神经毒性
- 丙泊酚联合小剂量地佐辛用于无痛人流术的效果观察被引量:13
- 2012年
- 目的探讨丙泊酚联合小剂量地佐辛用于无痛人流术的镇痛效果及不良反应。方法 150例ASAⅠ~Ⅱ级早期妊娠患者随机均分为三组,每组50例。Ⅰ组:地佐辛5mg与1%丙泊酚复合静脉麻醉;Ⅱ组:芬太尼1μg/kg与1%丙泊酚复合静脉麻醉,Ⅲ组:单纯丙泊酚静脉麻醉。观察比较麻醉前后呼吸循环变化、诱导时间、苏醒时间、丙泊酚总用量、麻醉镇痛效果及不良反应。结果所有患者手术都成功完成。Ⅲ组T2、T3时MAP较Ⅰ、Ⅱ组明显升高(P<0.05);Ⅱ组T1、T2、T3时SpO2、HR较Ⅰ、Ⅲ组明显降低(P<0.05);Ⅲ组丙泊酚总用量明显多于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05);术中镇痛不全和术后子宫收缩痛发生率Ⅲ组显著高于其他各组(P<0.01);呼吸抑制发生率Ⅱ组显著高于Ⅰ、Ⅲ组(P<0.01);诱导时间、苏醒时间及不良反应的发生率三组无明显差异(P>0.05)。结论丙泊酚联合地佐辛用于无痛人工流产手术,镇痛效果确切,呼吸抑制小,安全性高,值得推广。
- 任峰陆新来许兰芬
- 关键词:丙泊酚地佐辛人工流产术镇痛