李武国 作品数:20 被引量:41 H指数:4 供职机构: 中山大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 国家自然科学基金 广东省科技厅科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 轻工技术与工程 理学 更多>>
人源骨肉瘤原代细胞的分离及其CDX模型和PDX模型的构建 被引量:2 2019年 目的建立骨肉瘤患者人源肿瘤细胞系异种移植(CDX)模型和人源移植(PDX)模型,获得与患者肿瘤细胞相似的原代肿瘤细胞。方法获取1例右胫骨骨肉瘤患者的新鲜肿瘤活性组织,无菌条件下转移至实验室。将其中一部分剪切为2mm3组织块,种植于培养皿中。获取细胞后,使用胰蛋白酶消化法和反复贴壁法分离原代肿瘤细胞。将原代肿瘤细胞植入BALB/c裸鼠背部皮下和胫骨髓腔,待肿瘤长至直径1~2cm时,收获组织,制备HE切片。将另一部分组织植入BALB/c裸鼠背部皮下,待肿瘤体积长至800~1500mm3,取出一代肿瘤组织,将其中部分冻存,其余组织再次植入BALB/c裸鼠背部皮下传代。结果所获得CDX模型和PDX模型肿瘤细胞与患者病理切片细胞形态相似。结论采用患者骨肉瘤组织原代细胞分离与BALB/c裸鼠肿瘤移植等方法,可建立患者来源的骨肉瘤CDX和PDX模型并获得与患者肿瘤细胞相似的原代肿瘤细胞。 邹昌业 苏乔 李武国 赵巨鹏 樊泽培 陈俊恺 尹军强 沈靖南关键词:骨肉瘤 肿瘤移植 巴马小型猪非静脉转流原位肝移植模型的建立 被引量:3 2019年 目的建立重复性和稳定性好的巴马小型猪非静脉转流原位肝移植模型。方法选用12只巴马小型猪随机分为供体组(n=6)和受体组(n=6),行非静脉转流原位肝移植术,术中缩短无肝期的时间、维持无肝期血压稳定以及加强术中麻醉与体液管理。观察并记录受体的手术时间、无肝期、存活情况,监测术中心率、平均动脉压(MAP)、动脉血气分析改变,检测围手术期肝功能情况。结果 6只巴马小型猪中,1只术中死亡移植失败,其余5只的手术时间为(247±27)min,无肝期为(46±4)min,其中3只存活2周以上。与无肝前期相比,无肝期动物心率明显加快,MAP明显降低至(46±6)mmHg,血液pH值、剩余碱(BE)、HCO3-均下降,血清K+升高(均为P<0.05)。新肝期巴马小型猪MAP上升,心率变慢,血液pH值、BE、HCO3-升高,血清K+降低(均为P<0.05)。关腹时MAP及血气各指标及血清K+基本恢复至无肝前期水平。与术前相比,术毕时丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)明显升高(均为P<0.05),AST升高变化最明显,术后第2日开始逐渐下降。γ-谷氨酰转移酶(GGT)无升高变化,总胆红素(TB)术后第5日急剧升高。与术前相比,术毕时总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)均明显下降(均为P<0.05),术后第1日开始逐渐回升。结论非静脉转流巴马小型猪原位肝移植模型手术便捷、重复性高、存活率高,可以作为标准化的肝移植模型。 苏乔 余振宇 李雯雯 叶林森 代天星 梁荣朴 刘荣强 林国桢 赵广银 李武国 汪国营 陈规划关键词:肝移植 非静脉转流 巴马小型猪 无肝期 新肝期 动脉血气分析 人胃癌原位移植转移动物模型的构建 被引量:2 2018年 目的构建人胃癌原位移植转移动物模型,并利用活体成像系统对肿瘤转移进行可视化的实时监测评价。方法构建带有绿色荧光蛋白序列和萤火虫荧光素酶序列的慢病毒重组表达质粒;慢病毒包装感染人BGC-823胃癌细胞株,筛选得到BGC-823-e GFP-luc2稳转株;细胞接种高度免疫缺陷小鼠腋下,建立人胃癌皮下种植动物模型,继而建立人胃癌肿瘤皮下传代动物模型;将皮下传代模型肿瘤组织原位移植高度免疫缺陷小鼠胃部,构建人胃癌原位移植转移动物模型;利用活体成像系统对以上模型进行监测评价。结果获得稳定表达绿色荧光蛋白和萤火虫荧光素酶的BGC-823-e GFP-luc2细胞株;成功构建皮下种植和传代动物模型;成功构建人胃癌原位移植转移动物模型。结论慢病毒感染方法适用于人胃癌BGC-823-e GFP-luc2稳转株的建立;利用BGC-823-e GFP-luc2细胞株可以快速构建人胃癌皮下种植动物模型和原位移植转移动物模型,利用活体成像系统可以直观、非侵入的有效监测胃癌远端转移灶的发生、发展情况。 赵广银 苏乔 李雯雯 李武国关键词:胃肿瘤 动物模型 原位移植 TurboFlow在线净化-液相色谱-串联质谱技术的原理及其在食品安全检测中的应用 被引量:1 2024年 TurboFlow在线净化是一种结合涡流扩散、体积排阻及化学作用原理的在线样品纯化技术,具有自动化程度高、操作步骤少、实验误差小以及试剂使用量小等优点,与液相色谱-串联质谱(Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry,LC-MS/MS)联合使用,不仅能简化样品前处理步骤,还能实现对目标化合物的高灵敏度、高准确度和高通量的检测,被广泛应用于食品安全检验领域。本文介绍TurboFlow在线净化-液相色谱-串联质谱(TurboFlow Online Cleanup-Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry,TF-LC-MS/MS)技术的原理和优势,讨论该技术在食品安全检测中的应用,旨在进一步提高食品安全检验能力,助力食品安全监管。 刘翠婷 李武国关键词:食品安全检测 巴马小型猪麻醉状态下常规生理生化指标的测定 被引量:9 2018年 为动物实验教学和相关研究提供参考资料,本研究选用健康,体重25~30 kg实验用巴马小型猪52头,用监护仪、血气分析仪、全自动生化分析仪、动物血液分析仪系统地测定巴马小型猪术前心率、动脉血压、动脉血气、血清生化、血液生理学等多项生理生化指标。试验结果显示,巴马小型猪麻醉状态常规生理生化指标大多数呈正态分布,仅有SABP、DABP、MAP、Pa O2、Na+、PLT、TP和TBIL呈偏态分布。进一步比较发现,巴马小型猪在手术前的部分生理指标与人类正常参考值相似,表明巴马小型猪和人类生理、生化特性有一定的相似性,对实验动物的手术教学与比较医学研究有一定的参考意义。 李雯雯 苏乔 赵广银 李武国 付强 李文英 黄浩机 徐耀基关键词:巴马小型猪 血气分析 血清生化指标 血液学指标 化州柚花挥发油的GC-MS分析及其对肺癌细胞A549增殖、迁移的影响研究 被引量:9 2018年 目的:提取化州柚花挥发油,鉴定其成分,并评价其对肺癌细胞A549增殖、迁移的体外抑制作用。方法:采用水蒸气蒸馏法提取化州柚花挥发油;采用气质联用法(GC-MS)分析其化学组成,以峰面积归一化法计算各组分的相对百分含量;采用MTT法检测其对肺癌细胞A549增殖的抑制作用,计算细胞相对活力和增殖抑制率;采用细胞划痕实验评价其对肺癌细胞A549迁移能力的影响,计算相对迁移面积和迁移抑制率。结果:从100 g化州柚花中提取得到挥发油0.7 g,得率为0.7%。共从中分离得到了46个组分,鉴定了其中35个组分,占总峰面积的96.95%;相对百分含量较高的化合物包括D-柠檬烯(28.43%)、γ-萜品烯(20.74%)、β-月桂烯(11.97%)、芳樟醇(7.41%)等。与空白对照组比较,120 mg/L化州柚花挥发油可显著降低肺癌细胞A549的相对活力(P<0.05),增殖抑制率上升至21.72%;而1、5、10、20、40、60、80、100 mg/L化州柚花挥发油对肺癌细胞A549的相对活力均无显著影响(P>0.05)。作用24、48 h时,60、120 mg/L化州柚花挥发油可显著缩小肺癌细胞A549的相对迁移面积(P<0.05),迁移抑制率分别为132.46%、125.08%(24 h)和124.54%、124.66%(48 h);而30 mg/L化州柚花挥发油对肺癌细胞A549的相对迁移面积均无显著影响(P>0.05)。结论:GC-MS法可用于鉴定化州柚花挥发油的化学组成。化州柚花挥发油以D-柠檬烯、γ-萜品烯、β-月桂烯等成分为主,对肺癌细胞A549的增殖、迁移能力具有一定的体外抑制作用。 李武国 苏乔 魏洁书 朱烨妍 刘翠婷 李雯雯 赵广银 黄浩机 詹若挺关键词:挥发油 增殖 迁移 肺癌细胞A549 体外抑制作用 乳腺癌BALB/c小鼠生物发光活体成像和小动物^(18)F-FDG PET/CT成像的比较研究 被引量:5 2017年 目的比较生物发光和小动物PET/CT成像技术在BALB/c小鼠乳腺癌原位移植模型中的显像效果,寻找适合的评价乳腺癌肿瘤模型的分子影像学方法。方法将表达荧光素酶基因的乳腺癌细胞4T1接种于雌性BALB/c小鼠左侧第二对乳房垫下使其成瘤,活体荧光成像和小动物PET/CT成像观察肿瘤的生长情况。^(18)F-FDG PET/CT显像利用IRW软件对图像进行分析,采用感兴趣区技术(ROI)测量组织^(18)F-FDG摄取值。结果生物发光活体成像操作步骤相对较简单;活体荧光成像系统观察能够特异性地探测到肿瘤组织,小动物PET/CT影像观察发现小鼠体内多数器官组织都有^(18)F-FDG摄取,但肿瘤组织在所有组织、器官中^(18)F-FDG摄取值最高;^(18)F-FDG药物吸收时间30~60 min,有放射性,荧光素钾盐药物吸收时间3~5 min,无放射性;小动物PET/CT成像用时20 min,生物发光活体成像用时3 min;小动物PET/CT分辨率<1 mm,生物发光活体成像分辨率1~10 mm;小动物PET/CT呈三维成像,生物发光活体成像呈二维成像。结论生物发光活体成像比^(18)F-FDG PET/CT特异性好,操作简单,图像采集时间短,价钱便宜,无放射性,可检测细胞存活状态,但小动物PET/CT分辨率较高,可精准定位,图像三维立体,可监测到细胞的代谢能力,为以后实验研究中正确选择活体影像学监测手段提供依据。 苏乔 林颖 李雯雯 钱学珂 李武国 赵广银 杜颖关键词:小鼠 乳腺肿瘤 参苓全营养制剂改善荷瘤小鼠化疗后营养状况的实验研究 2019年 目的初步评价参苓全营养制剂改善肿瘤化疗后营养状况的效果。方法采用Lewis肺癌细胞悬液接种于C57BL/6小鼠背部右侧皮下建立移植瘤模型,考察参苓特定全营养制剂对顺铂作用于移植瘤模型小鼠后的动物一般情况、血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、前白蛋白(PA)、TNF-α含量,测量肿瘤体积变化并计算肿瘤生长抑制率。结果参苓全营养制剂能够减轻顺铂造成的小鼠体重下降程度,提高顺铂导致小鼠下降的总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)的含量。结论参苓全营养制剂能减轻顺铂对Lewis肺癌荷瘤小鼠产生的副作用,有利于机体营养状况和免疫功能的维持和改善,并且对顺铂的治疗效果未产生不良的影响。 陈勇军 李武国 程翔燕 成金乐关键词:人参 茯苓 化疗 营养状况 不同处理因素对结直肠癌类器官奥沙利铂敏感性测试结果的影响研究 2021年 目的选用结直肠癌临床常用药物奥沙利铂,探究不同处理因素对结直肠癌类器官药物敏感性测试结果的影响,为肿瘤患者个体化精准治疗方案的筛选提供测试条件参考。方法采用不同细胞密度、给药前不同细胞培养时间、不同药物作用时间对2例结直肠癌类器官CRC51、CRC67进行处理,设计100、10、1、0.1、0.01μmol/L 5个剂量的奥沙利铂对2例结直肠癌类器官进行作用,CCK-8检测细胞增殖活力,根据细胞存活率(T/C)比较分析不同处理因素对结直肠癌类器官药物敏感性测试结果的影响。结果①在细胞密度的选择上,每孔接种8000个和4000个细胞时,100μmol/L的奥沙利铂均对类器官CRC51、CRC67的生长产生显著的抑制作用,两者的抑制作用差异无统计学意义。而每孔接种2000个细胞时,100μmol/L的奥沙利铂对类器官CRC51、CRC67的生长抑制作用均显著变弱(与每孔接种8000个和4000个细胞相比,P<0.05),药效评价结果变为体外无效。②在给药前细胞培养时间的选择上,没有获得规律性的研究结果,但均T/C>50%。③在药物作用时间的选择上,100μmol/L的奥沙利铂对类器官CRC51、CRC67作用7 d比作用3 d获得更加显著的生长抑制作用(P<0.05)。结论不同细胞密度、给药前不同细胞培养时间、不同药物作用时间对结直肠癌类器官药物敏感性测试结果均会产生影响。选择的实验条件不同,可能会得出相反的药效评价结果。 李武国 陈伟 苏乔 李雯雯 赵广银 杨宇童 刘长琳关键词:结直肠肿瘤 奥沙利铂 药物敏感性 小型猪腹腔镜手术中不同气腹压力对肝肾功能的影响 被引量:1 2021年 为研究小型猪腹腔镜手术中不同气腹压力对肝、肾功能的影响,本试验选择24头25~30 kg巴马小型猪,随机分为A、B、C、D共4个组,分别以10、13、15、17 mmHg(1.330、1.729、1.995、2.261 kPa)的气腹压进行腹腔镜手术,于术前与术后进行肝、肾功能相关的生化指标检测。结果显示,各组丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)术后极均显著增高(P<0.01),高气腹压组(B、C、D组)术后极显著高于低气腹压组(A组)术后(P<0.01);术后各组碱性磷酸酶(ALP)均高于术前,术后高气腹压组(B、C、D组)与低气腹压组(A组)差异不显著(P>0.05);术后B、C、D组乳酸脱氢酶(LDH)均高于术前,术后高气腹压组(B、C、D组)极显著高于低气腹压组(A组)(P<0.01);术后各组谷氨酰转肽酶(GGT)均未增高,D组总胆红素(TBil)显著高于术前(P<0.05),且显著高于A组术后(P<0.05);术后各组肌酐(CREA)与尿素(Urea)均增高,但高气腹压组与低气腹压组术后比较无明显增高(P>0.05)。结果表明在25~30 kg的小型猪腹腔镜手术中,大于或等于13 mmHg的气腹压能造成小型猪更明显的肝功能损伤。 苏乔 李雯雯 李武国 赵广银 李武 黄浩机 李文英关键词:气腹 小型猪 腹腔镜 肾功能