孙丹
- 作品数:7 被引量:18H指数:3
- 供职机构:辽宁何氏医学院更多>>
- 发文基金:辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学文化科学理学医药卫生更多>>
- 超高效液相色谱法测定万寿菊悬浮培养细胞中的叶黄素被引量:2
- 2016年
- 建立了超高效液相色谱快速测定万寿菊悬浮培养细胞中叶黄素的方法。样品冷冻干燥后,经甲醇溶液提取,采用Waters ACQUITY UPLCBEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,柱温为25℃。以乙腈-甲醇(90∶10,v/v)(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.4 m L/min。进样体积为5μL,检测波长为448 nm。在1.56-25 mg/L范围内,叶黄素的色谱峰面积与质量浓度之间具有良好的线性关系。采用该方法测定了实际样品中叶黄素的含量,并进行了3个水平的加标回收试验,其回收率为102%-105%,相对标准偏差(n=5)为0.11%-1.19%。该方法快速、操作简单,适合于分析植物培养细胞中叶黄素的含量和产率。
- 徐晓辉王莉洁孙丹何伟
- 关键词:超高效液相色谱叶黄素悬浮培养细胞万寿菊
- 重组牛碱性成纤维细胞生长因子高效表达及活性研究
- 王莉洁孙丹徐晓辉何伟
- 万寿菊悬浮培养细胞生产游离叶黄素工艺的研究被引量:4
- 2020年
- 建立万寿菊悬浮培养细胞生产游离叶黄素的方法。以万寿菊花瓣为外植体构建得到能够生产游离叶黄素的悬浮培养细胞系。研究细胞培养时间、光照和黑暗培养以及诱导子茉莉酸甲酯、水杨酸对细胞中游离叶黄素合成的影响,建立万寿菊悬浮培养细胞生产游离叶黄素的工艺。结果表明,万寿菊悬浮培养细胞中游离叶黄素的合成和细胞生物量的积累显示出相同的变化规律。在培养的第14 d,进入稳定期,细胞中游离叶黄素产率为1.29±0.09 mg/L,为第0天的8.48倍。培养14 d,光照培养细胞中游离叶黄素产率为暗培养细胞的5.7倍。分别添加茉莉酸甲酯和水杨酸对培养细胞生产游离叶黄素均无显著性影响。上述结果说明,细胞生产游离叶黄素与细胞生物量积累是偶联的。细胞最佳收获时间为生长的第14 d。光照能够显著促进细胞生产游离叶黄素。茉莉酸甲酯和水杨酸不能促进细胞中游离叶黄素的合成。
- 徐晓辉王莉洁孙丹郭健
- 关键词:悬浮培养细胞万寿菊
- 高校食品营养学课程的教学改革探索与实践被引量:8
- 2019年
- 在很多高校的食品专业中,食品营养学是一门重要的课程。随着公众营养意识的不断提高及5G时代的来临,传统高校的食品营养学教学内容与模式不断受到冲击。在该种情况下,为使未来高校食品营养学课程更好的适应“互联网+”的背景,与时俱进,需要在现有的基础上进行教学改革。本文就高校食品营养学课程的教学改革进行了一定的研究。
- 周艳楠孙丹
- 关键词:高校食品营养学课程教学改革
- 化学化工类开放实验室安全准入体系研究被引量:4
- 2019年
- 在化学实验室当中,具有较多的危险源种类,做好日常管理工作将直接关系到工作开展的安全性以及稳定性。其中,做好准入制度的制定十分关键,也是管理工作开展的基础。文章就化学化工类开放实验室的安全准入体系展开了一定的研究。
- 周艳楠孙丹
- 关键词:化学化工
- 重组大肠杆菌产人成纤维细胞生长因子8a工业化发酵工艺优化
- 2019年
- 目的:探究重组大肠杆菌产人成纤维细胞生长因子8a的工厂化生产发酵工艺条件。方法:通过摇瓶和50L发酵罐对hFGF8a重组菌的发酵培养基以及条件进行优化。结果:工业化50L发酵罐培养,接种量为10%,最优的培养基为NaCl1.0%、酵母提取物0.5%、胰化蛋白胨1.0%,当OD600达到0.8,加入诱导剂,转速200r/min,通气量20%,温度28℃,pH7.2,发酵培养16h后,可获得发酵重组人FGF8a约80mg/L。结论:此工艺提高了hFGF8a的生产量,简化了工业发酵操作步骤,降低成本,为下游开发hFGF8a产品提供原料供给。
- 王莉洁孙丹孙丹
- 关键词:工业发酵
- 分子伴侣共表达对牛成纤维细胞生长因子-2在大肠埃希菌中表达水平和生物活性的影响
- 2018年
- 目的研究分子伴侣共表达对重组牛成纤维细胞生长因子-2(recombinant bovine fibroblast growth factor-2,rb FGF-2)表达水平及生物活性的影响。方法根据大肠埃希菌密码子使用偏好性,设计合成rbFGF-2核苷酸序列全长,构建表达rbFGF-2的载体pET-15b-rbFGF-2。将编码伴侣蛋白GroES-GroEL的质粒pGro7和载体pET-15b-rbFGF-2先后转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中进行共表达。表达产物进行Western blot鉴定,经Ni-Agarose亲和层析纯化后,MTS法测定其生物学活性。结果酶切鉴定和测序结果证实,rbFGF-2基因序列与设计序列相同,且在NdeⅠ和Bam HⅠ位点连入表达载体。表达的rbFGF-2蛋白相对分子质量约21 000,主要以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的37.8%,可与牛FGF-2单克隆抗体特异性结合;纯化后,SDS-PAGE检测其纯度超过95%。含有共表达系统的大肠埃希菌中rbFGF-2蛋白表达量为仅含表达载体的大肠埃希菌的2.28倍。在6.25 ng/ml浓度时,rbFGF-2蛋白具有显著的促细胞增殖作用。结论分子伴侣GroES-GroEL共表达能够显著提高rbFGF-2蛋白的表达水平及其生物活性。
- 孙丹王莉洁王莉洁何伟
- 关键词:分子伴侣成纤维细胞生长因子-2大肠埃希菌生物学活性