王桂姬
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
- 供职机构：东北农业大学食品学院更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学理学更多>>
- 多种绿色DNA嵌入染料实时荧光PCR检测猪DNA效果比较被引量：3
- 2018年
- 实时荧光定量PCR是食品科学领域一种高效、灵敏的研究技术,荧光染料的种类和浓度会对实时PCR反应产生一定影响。以8种绿色荧光DNA嵌入染料SYTO 11~14,SYTO 16,SYTO 21,SYTO 24~25为研究对象,体系选择荧光染料浓度分别为10,5,2,1,0.5μmol/L,以从猪肉中提取的基因组DNA为模板进行扩增,产物长度149 bp。通过分析Ct值和熔解曲线,评价染料浓度对扩增效果的影响,初步筛选出最适染料及相应浓度:SYTO 11(5μmol/L,2μmol/L),SYTO 13(10μmol/L,5μmol/L),SYTO 16(10μmol/L,5μmol/L),SYTO 21(1μmol/L)和SYTO 24(0.5μmol/L)。根据筛选结果自配反应预混液,以2种商业实时荧光PCR预混液为参照,通过模板10倍梯度稀释绘制标准曲线,计算扩增效率,R2均大于0.99,线性范围均在40 ng^0.04 pg之间,其中染料SYTO 13(10μmol/L)和SYTO 16(10μmol/L,5μmol/L)扩增效率分别为99.35%,100.50%和99.71%,接近商业试剂盒2(BYRT染色,扩增效率99.61%),高于商业试剂盒1(Evagreen染色,扩增效率97.80%),具有实际应用价值。
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- 关键词：实时荧光PCR
- 超高效液相色谱-串联质谱法鉴定猪肉的特异性肽生物标志物被引量：7
- 2017年
- 以亲缘关系较近的猪、牛和羊3个物种的肌肉组织为研究对象,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS),筛选并确认了猪物种肉特异性肽生物标志物。3种纯肉样品经蛋白质提取、胰蛋白酶消化和UPLC-Triple TOF-MS分离鉴定,得到的总离子流图谱(TIC)与Uniprot蛋白质数据库对比分析,筛选出3个物种肉的3种高丰度同源蛋白和8种潜在的肽生物标志物;潜在的肽生物标志物经QTRAP-MS质谱的多反应模式(MRM)分析,最终确认了猪物种肉的5种肽生物标志物,其中3种肽生物标志物未见文献报道。
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- 关键词：猪肉超高效液相色谱-串联质谱
- 一种荧光定量PCR热循环仪的PCR预混液及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种荧光定量PCR热循环仪的PCR预混液及其制备方法与应用，属于生物技术领域。该PCR预混液是以DNA双链嵌入SYTO13为荧光标记物，以染料CXR为参比荧光。本发明专为荧光定量PCR热循环仪研制，该预混液在...
- 刘宁杨艳王桂姬
- 文献传递
- PCR技术在肉类成分定量分析中的应用研究进展被引量：5
- 2016年
- PCR技术具有特异性强、灵敏度高、可同时分析大量样本的特点,在鉴别和定量分析食品中肉类成分上应用广泛。本文介绍了PCR扩增产物分析、实时荧光PCR和微滴数字PCR三种应用于肉类定量的技术,通过检出限、定量限和定量范围等数据分析这三种方法在肉类成分定量分析中的应用效果,并对其定量的局限性进行阐述,为进一步完善PCR定量技术提供参考。
- 杨艳王桂姬周广运任皓威夏秀芳刘宁
- 关键词：PCR
