赵秀玲
- 作品数:24 被引量:28H指数:3
- 供职机构:广西大学更多>>
- 发文基金:广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金广西研究生教育创新计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA及其干扰重组表达载体、构建方法和应用
- 张明赵秀玲潘宏王焕景濮黎萍张鹏飞陈富
- 精子发生是一个复杂精细的过程,在此过程中存在着严格的同源群现象和周期变化规律,受众多因素的协同调控。然而,对于哺乳动物精子发生的分子事件人们依然知之甚少。近年来,受各种因素影响,越来越多的人受到不育症的困扰,其中一半左右...
- 关键词:
- 关键词:精子发生基因表达男性不育症
- 水牛合子基因组激活前后差异蛋白质组分析
- 濮黎萍陈富美姚顺陈东荣汤玉燕赵秀玲付强张明
- 水牛精子蛋白质图谱的构建及生物信息学
- 2016年
- 以水牛为研究对象,应用SDS-PAGE电泳分离和LTQ-Orbitrap高分辨率组合式质谱构建水牛精子蛋白质图谱,鉴定出了1 074个精子蛋白质。用生物信息学手段对水牛精子蛋白质进行GO分类,其中参与细胞代谢的蛋白质所占比例最大,说明了成熟精子进行着旺盛的代谢活动,为其受精等活动提供能量准备。生物信息学分析结果显示,参与翻译后修饰的蛋白质有36%,说明成熟的精子在RNA转录和翻译水平上基本处于沉默状态时,主要靠蛋白质的翻译后修饰来实现细胞的功能。本试验为水牛精子细胞增殖发育研究、提高水牛精子活力以及受精机理研究提供了新的手段和信息。
- 黄德伦付强官俊良黄愉淋陈富美王焕景赵秀玲黄凤玲梁贤威张明
- 关键词:水牛精子蛋白质组
- 水牛BCL2L10基因的克隆、序列分析及其在卵母细胞中的表达
- 2017年
- 本研究克隆了水牛BCL2-like 10(BCL2L10)基因序列,并用生物信息学技术分析了该序列的同源性、系统进化树、蛋白的理化性质以及高级结构。同时利用免疫荧光染色的方法检测了BCL2L10蛋白在水牛卵母细胞成熟前后的表达情况。结果表明,应用RT-PCR技术克隆得到的水牛BCL2L10基因序列全长600 bp,其中编码区长度为558 bp,共编码185个氨基酸。对该序列进行对比分析发现,水牛BCL2L10基因的核苷酸序列与野牛、牛、绵羊、小鼠、大鼠、野猪的同源性分别为99%、98%、96%、84%、81%、75%。生物进化树分析显示,水牛BCL2L10基因与牦牛、野牛的亲缘关系最近。生物信息学分析得到BCL2L10蛋白的分子量为21.6 k D,理论等电点为9.54。功能结构域预测显示BCL2L10蛋白属于BCL-2家族成员,参与细胞凋亡调控过程。免疫荧光染色结果发现,BCL2L10蛋白在水牛卵母细胞成熟过程中均有表达。
- 王焕景赵秀玲濮黎萍张鹏飞张明
- 关键词:水牛
- 一种哺乳动物胚胎性别鉴定方法
- 本发明涉及性别鉴定技术领域,特别涉及一种哺乳动物胚胎性别鉴定方法,本发明通过在Y染色体上插入荧光报道基因,通过荧光报道基因的荧光表达,准确鉴定出哺乳动物的胚胎性别,该方法简单、高效、准确、损伤小;在构建Y染色体含荧光报道...
- 张明赵秀玲左二伟陆阳清魏巍
- 文献传递
- 细胞荧光原位杂交方法
- 本发明公开了一种细胞荧光原位杂交方法,包括预处理和杂交,预处理采用75%的低渗液进行低渗处理;杂交之前进行鱼精DNA的预杂交试验,预杂交时间为1‑2h。实际使用表明,该法能够得到更为清晰、直观、准确的染色结果,实现了快速...
- 张明赵秀玲左二伟濮黎萍张鹏飞陈富美候振徐壮壮
- 文献传递
- 水牛卵巢黄体形成和退化的蛋白质表达谱构建及生物信息学分析被引量:1
- 2018年
- 本研究构建了水牛卵巢黄体形成及退化过程的定量蛋白质表达谱,从中寻找与水牛发情周期相关的重要蛋白质。为研究水牛卵巢周期性变化的分子机制提供蛋白质水平的数据支撑,进而为提高水牛繁殖效率奠定实验基础。以水牛排卵后的红体期(corpus hemorrhagicum,CH)、黄体期(corpus luteum,CL)和白体期(corpus fibrosum,CF)的卵巢作为研究对象,利用串联质谱标签(tandem mass tag,TMT)标记结合液质联用((liquid chromatography/mass spectrometry,LC-MS/MS)的定量蛋白质组学技术,采用相关软件对得到的差异表达蛋白质进行生物信息学分析。同时对与水牛发情周期相关的重要差异蛋白质:单核巨噬细胞分化抗原(CD14)、通用转录因子Ⅱ-Ⅰ(GTF2I)、羟基类固醇(17β)脱氢酶1(HSD17B1)、U6 sn RNA相关Sm样蛋白质(LSM1)和纤溶酶原激活物抑制物(SERPINE1)进行了qRT-PCR分析验证。结果显示,共鉴定得到2 343种蛋白质,其中差异表达蛋白质有284种(差异倍数≥2.0),初步构建了水牛卵巢黄体形成和退化的定量蛋白质表达谱。对其中的五种重要差异蛋白质(CD14、GTF2I、HSD17B1、LSM1和SERPINE1)进行qRT-PCR验证,结果有四种(CD14、HSD17B1、LSM1和SERPINE1)的qPCR结果与质谱结果相一致,仅GTF2I与质谱结果不一致,可能是由于GTF2I存在转录后调控。本研究首次从蛋白质水平对水牛卵巢排卵后的周期性变化的分子机制进行了探究,同时为其他家畜品种发情周期的研究提供了新的研究思路。
- 陈富美姚顺陈东荣徐壮壮候振濮黎萍张鹏飞赵秀玲张明
- 关键词:水牛发情周期定量蛋白质组学生物信息学
- 改进的徒手切割水牛囊胚的方法及切割液
- 本发明公开了一种改进的徒手切割水牛囊胚的方法,并将切割液和培养滴合二为一,即将添加一定量牛磺酸的含有颗粒细胞的成熟培养液做成切割滴,命名为切割单层。该法主要包括制备切割单层、固定胚胎、切割胚胎、剥离切割胚,其中切割单层时...
- 张明陈富美王焕景赵秀玲濮黎萍张鹏飞
- CRISPR/Cas系统的概述及其在干扰基因表达研究中的应用及存在的问题被引量:5
- 2016年
- CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas系统是源于原核生物的一种获得性免疫防御系统,与Cas蛋白协同作用保护细菌等免受病毒或者质粒的二次感染,广泛存在于细菌和古细菌中。科学家们通过改造CRISPR/Cas系统,使其成为一种新型的基因编辑工具。最近,科学家们又通过突变Cas9这个核酸酶的切割活性区域,使其成仍可结合到特定的核酸序列上,但却失去核酸切割活性的d Cas9(dead Cas9)蛋白,利用这个空间位阻效应达到抑制基因表达的效果,实现基因的沉默。这就是利用CRISPR系统干扰基因表达基本原理。本文主要综述CRISPR/Cas系统的结构、种类、作用机制及其在干扰基因表达中的应用和存在的问题。
- 赵秀玲黄愉淋潘宏张明
- 关键词:基因表达
- 磷酸化蛋白质组学在哺乳动物精子研究中的应用被引量:11
- 2017年
- 蛋白质磷酸化是蛋白质翻译后最普遍、最重要的修饰之一,是生物体内一种普通的调节方式,参与调控细胞增殖、信号转导、新陈代谢、肿瘤发生等分子机能,并在精子信号转导和酶合成表达的过程中起重要作用。对精子磷酸化蛋白的研究有助于深入了解精子发生、运输、获能,以及精卵识别的调控机理。因此,在磷酸化蛋白组学的层面上研究精子的各项机能可以为雄性不育更深层的研究提供一条新的道路。
- 张鹏飞濮黎萍王焕景赵秀玲陈富美陆阳清张明
- 关键词:哺乳动物精子磷酸化蛋白质组学