朱灿灿
- 作品数：17 被引量：37H指数：3
- 供职机构：中国科学院合肥物质科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金中国科学院合肥物质科学研究院院长基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学自动化与计算机技术农业科学更多>>
- 基于RPA-CRISPR/Cas12a检测常见呼吸道病毒的crRNA及多重检测试剂盒与应用
- 本发明公开了基于RPA‑CRISPR/Cas12a检测常见呼吸道病毒的crRNA及多重检测试剂盒与应用，涉及呼吸道病毒检测技术领域。检测新型冠状病毒的crRNA序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:4所示；检...
- 朱灿灿朱灵杨柯赵俊 王全福 崔俊生花昌义刘勇邓国庆
- 多重巢式固相PCR-Array芯片用于高致病性病原微生物并行检测被引量：3
- 2019年
- 提出了一种多重巢式固相PCR的方法,以微流控芯片为载体,采用紫外交联方式将寡核苷酸序列固定在芯片上,构建了阵列式固相PCR-阵列(PCR-Array)芯片,用于细菌和病毒类高致病性病原微生物的并行检测。选择新疆出血热病毒、埃博拉病毒、炭疽杆菌和布鲁氏菌4种代表性高致病性病原微生物为研究对象,通过基因工程手段构建了包含有炭疽杆菌和布鲁氏菌特异性基因片段的重组质粒载体,利用病毒包装技术构建了包含有两种病毒特异性基因片段的逆转录病毒颗粒,完成了4种高致病性病原微生物阳性标准品的制备,并以此作为实验样本,探究了多重巢式固相PCR-Array芯片的制备方法和扩增体系。结果表明,在优化的实验条件下,多重巢式固相PCR-Array芯片检测4种高致病性病原微生物的检出限达10 copy/μL以下量级。本方法灵敏度高,特异性好,同时,引物空间上的隔离避免了相互干扰,提高了检测通量,在多种病原微生物快速并行检测方面具有良好的应用前景。
- 朱灿灿崔俊生胡安中杨柯赵俊赵俊刘勇邓国庆
- 基于单管式LAMP-CRISPR/Cas12a技术的优化及其在甲型流感病毒检测性能的评估
- 2025年
- 环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)与将成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR/Cas12a)技术相结合,建立一种快速、准确、无污染的甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)的单管式检测方法(LAMP-CRISPR/Cas12a),并探讨其在临床诊断中的应用价值。设计并筛选最佳crRNA和LAMP引物,优化反应缓冲液、ssDNA reporter浓度以及CRISPR/Cas12a反应温度,建立单管式LAMP-CRISPR/Cas12a检测体系,并对该方法的灵敏度、特异性和临床实用性进行了评估。LAMP-CRISPR/Cas12a单管一步法可在45min内实现IAV的检测,灵敏度为10拷贝/μL,检测常见呼吸道病原体RSV-A、RSV-B、PIV3、IBV和SARS-CoV-2结果均为阴性,特异性良好;10例临床样本检测结果均与临床诊断结果相符,且LAMP-CRISPR/Cas12a与PCR法均一致。LAMP-CRISPR/Cas12a单管法检测IAV简便、快速、灵敏度高,且特异性强,无须开盖操作,避免了气溶胶污染,有望成为快速检测IAV的新方法。
- 汪雅婷朱灿灿尹雪儿姚杰王琴
- 关键词：环介导等温扩增甲型流感病毒
- 一种检测流感病毒分型的crRNA、LAMP-CRISPR/Cas12a检测试剂盒及方法与应用
- 本发明公开了一种检测流感病毒分型的crRNA、LAMP‑CRISPR/Cas12a检测试剂盒及方法与应用，涉及生物技术领域。本发明通过LAMP与CRISPR技术结合，筛选优化用于各分型鉴定的LAMP引物及crRNA序列，...
- 朱灿灿朱灵尹雪儿刘勇邓国庆
- 基于微流控芯片的荧光定量PCR法快速检测乙肝病毒核酸被引量：17
- 2018年
- 提出了一种基于微流控荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)的血液病毒快速检测新技术。采用3D打印技术制作了一种集气动阀和"树型"结构为一体的微流控芯片;运用Comsol软件对芯片导热性能进行了仿真;根据血站血液核酸检测工作中乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、人类免缺陷病毒(HIV)三种病毒的筛查流程,结合高温控性能的微流控荧光定量PCR分析系统,在所设计微流控芯片上开展了血液样本中HBV的检测研究。实验结果表明,该芯片具有良好的温度均匀性和导热性,芯片上可实现血液样本中HBV的快速检测,其Ct值在37左右呈弱阳性。该技术与目前血液筛查使用的大型核酸检测系统相比,具有操作过程简单、所占空间小、检测效率高且试剂消耗量少的优点,进一步优化实验条件可实现多病毒核酸的并行检测。
- 王可可杨柯赵俊赵俊朱灿灿朱灵
- 关键词：3D打印微流控芯片HBV检测荧光定量PCR
- 一种鼻/咽拭子免核酸提取试剂及其应用
- 本发明本发明公开了一种鼻/咽拭子免核酸提取试剂及其应用，属于核酸检测技术领域，该核酸免提取试剂其组成成份包括Trition<Sup>TM</Sup>X‑100、氢氧化钠、N‑十二烷酰基‑N‑甲基甘氨酸钠、二硫苏糖醇和海藻...
- 朱灵朱灿灿 崔俊生刘勇邓国庆
- 基于LabVIEW的芯片PCR扩增荧光检测系统被引量：7
- 2020年
- 针对传统的传染病病原体检测需要依靠实验室内昂贵的仪器和专业的技术人员,无法实现现场快速检测的问题,设计了一种基于LabVIEW的集芯片聚合酶链式反应(PCR)扩增和荧光检测于一体的低成本便携式装置。该装置硬件由计算机、USB相机、微流控芯片、温控单元、荧光检测单元等组成。实验时,首先使用LabVIEW编写的上位机程序控制温控单元,实现微流控芯片的PCR;然后在每个PCR循环中的延伸阶段利用USB相机采集一幅荧光图像;最后使用IMAQ Vision软件包对采集的荧光图像进行图像处理分析。通过对寨卡病毒的保守区核酸片段的分析,证明该系统能够满足核酸扩增荧光检测的要求,可以在现场实现核酸扩增检测,提高核酸检测的便携性。
- 潘井宇朱欣潮朱灿灿郑贤锋朱灵杨柯
- 关键词：微流控芯片荧光检测温度控制系统
- 一种用于微量复杂性物证检材DNA提取纯化的试剂盒与提取方法
- 本发明提供一种用于微量复杂性物证检材DNA提取纯化的试剂盒与提取方法。所述试剂盒可有效进行多年陈旧布类、铁锈、泥土、色素中DNA提取纯化，由裂解液、结合液、漂洗液1、漂洗液2、纳米磁珠和洗脱液六部分组成，该试剂盒提取DN...
- 朱灿灿朱灵胡安中杨柯崔俊生邓国庆刘勇
- 文献传递
- 微流控聚合物链式反应芯片的多色荧光检测被引量：3
- 2017年
- 为了实现微流控芯片上多目标DNA片段的同时检测,建立了基于光棒匀光结构的微流控芯片多色荧光检测系统。根据微流控芯片中的聚合物链式反应(PCR)反应腔的特点,设计了基于超亮白光LED模组、光棒、二向色镜和CCD的正交型荧光检测系统。CCD可一次采集微流控芯片上所有PCR反应腔中的荧光信号,通过滤光片轮组合的变换,可实现多种荧光标记物的同时检测。采用荧光素钠溶液对激发光的均匀性进行了测试,激发产生的荧光图像均匀度达到93.99%,可满足微流控芯片上多反应腔同时检测的需求。同时,以pUC-18人工质粒DNA作为标准品,开展了微流控荧光PCR生物实验,对系统性能进行验证。实验结果表明:微流控PCR反应腔的DNA浓度变化与荧光信号的变化相一致,pUC-1 8样品的检测限达到0.05pg/uL,扩增效率为97.28%,熔解曲线显示无引物二聚体产生,特异性好,达到了商业化仪器的水平。
- 吴晓松李志刚朱灿灿赵俊刘勇朱灵
- 关键词：微流控芯片荧光检测DNA检测
- 病原体核酸一体化并行检测微流控芯片研究
- 近年来，由于环境变化、自然灾害、物种多样性、抗生素大规模使用等因素，导致各类病原体引起的传染性疾病不断爆发，如非洲猪瘟病毒、埃博拉病毒、禽流感病毒等。在临床医学方面，病原体感染是引发肝炎、结核、肿瘤等多种疾病的重要诱因。...
- 朱灿灿
- 关键词：微流控芯片
