李小波
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
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- 以2种培养基规模化制备6B型肺炎球菌多糖的比较研究
- 2024年
- 目的采用6B型肺炎链球菌为试验血清型别,比较植物源性和动物源性培养基应用于23价肺炎球菌多糖疫苗规模化生产的效果。方法采用大豆胨培养基和胰酪蛋白胨培养基各进行3批生产规模的试生产,检测肺炎球菌生长情况,在各工艺阶段采用速率比浊法测定多糖含量并计算回收率,将收获的精制多糖按照23价肺炎球菌多糖疫苗制造及检定规程进行检定,同时进行核磁共振检测,进行系统的比较分析。结果与胰酪蛋白胨培养基相比,6B型菌种在大豆胨培养基中的细菌浓度和发酵液中的多糖含量分别提高了22.5%和88.7%;生产的粗糖及精制多糖的产量平均增长了66.87%和139.67%;精制多糖各项质量指标均符合要求,2种精制多糖的核磁图谱指纹区一致,且化学位移和峰型与文献报道图谱一致。结论大豆胨培养基与胰酪蛋白胨培养基生产的6B型肺炎球菌多糖疫苗精制多糖在质量上具有可比性,且大豆胨培养基能提高精制多糖的产量。
- 于荣清兰芳南方李小波程亚刚
- 关键词：肺炎链球菌
- 竞争ELISA法测定19A型肺炎链球菌发酵物中的多糖含量
- 2014年
- 目的建立检测19A型肺炎链球菌荚膜多糖的竞争ELISA方法，检测细菌发酵过程中多糖的表达量。方法以19A型肺炎链球菌多糖为包被物，待测多糖为竞争物，建立间接竞争ELISA方法并验证该方法的准确性和精密度。用建立的方法检测不同培养条件下发酵物中的多糖表达量。结果最佳多糖包被质量浓度为10mg／L，多糖抗血清稀释度为1：4×10^4。当检测范围为39．06～5000．00μg／L时，决定系数为0．995。批内和批间相对标准差分别为5．08％～9．58％和5．28％～12．93％。培养物样品加标回收率为95．84％～110．07％。两种不同培养条件下培养物中的多糖表达量分别为312．17mg／L和1056．42mg／L。结论新建的方法能用予19A型肺炎链球菌发酵物中多糖表达量的检测，对于优化培养条件及掌握培养物收获时间具有指导意义。
- 李小波廖红梅黄放谢媛媛于志强宋绍中
- 关键词：多糖类链球菌肺炎酶联免疫吸附测定
- 菌种筛选对1型肺炎链球菌产糖量的影响被引量：1
- 2014年
- 目的用无动物源性培养基筛选高产糖1型肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae semtype1，PN1）。方法配制无动物源性培养基，并用此培养基进行高产糖PN1单菌落筛选。比较筛选前后PN1在发酵培养中的产糖量。结果无动物源性培养基筛选前后PN1在发酵培养中的产糖量分别为420和960mg／L，筛选后PN1的产糖量明显高于筛选前PN1。结论以无动物源性培养基筛选PNI可使PN1的产糖量明显提高。
- 黄放邓杰赵兆王智杰周宇刘威张珂张伟李小波曾华英江山崔长法
- 关键词：链球菌肺炎多糖类菌种筛选
- 酸沉淀法纯化14血清型肺炎链球菌荚膜多糖工艺的建立被引量：5
- 2016年
- 目的建立一种14血清型肺炎链球菌荚膜多糖的酸沉淀法纯化工艺,以替代传统的苯酚抽提法。方法对建立的14型肺炎链球菌荚膜多糖酸沉淀法中的氯化钙终浓度（0、50、100、200、400 mmol/L）、pH值（3.5、4.0、4.5、5.0及5.7）及反应时间（0、1、2、4、6、8 h及过夜）进行优化。采用优化后的方法纯化3批14型肺炎粗制多糖,制备精制多糖,并进行理化指标、抗原性检测及核磁分析,同时与苯酚抽提纯化工艺进行比较。结果酸沉淀法的最佳工艺为：氯化钙终浓度50-100 mmol/L,pH值3.5-4.0,作用时间为过夜。采用该方法制备的3批14型肺炎精制多糖的蛋白和核酸杂质含量均较低,总磷、总氮、氨基己糖含量、多糖分子质量均符合企业注册标准,抗原活性和核磁共振图谱的分析结果表明其多糖结构无异常。结论酸沉淀法具有操作简便、效果显著及不需使用有毒有害试剂等优点,可用于纯化14型肺炎链球菌荚膜多糖。
- 李小波张锐谢媛媛程尊平陈娟江山
- 关键词：纯化荚膜多糖
