刘雨潇 作品数:23 被引量:26 H指数:3 供职机构: 中国人民解放军总医院第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
辛二酰苯胺异羟肟酸对人卵巢癌紫杉醇耐药细胞OC3/P存活和凋亡的影响 被引量:5 2013年 目的 研究辛二酞苯胺异羟肟酸(SAHA)对人卵巢癌紫杉醇耐药细胞OC3/P存活和凋亡的影响。方法 SAHA 4~64 μmol·L-1与OC3/P细胞作用6,12,24或48 h,用倒置显微镜观察细胞形态的变化,瑞氏吉姆萨染色观察细胞质和细胞核形态的变化,MTT法检测细胞存活率,AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术测定细胞凋亡率,用透射电镜观察细胞内超微结构的变化。结果 倒置显微镜下可见,SAHA 4,16和64 μmol·L-1与OC3/P细胞孵育24 h,可引起OC3/P细胞皱缩,细胞贴壁不良,折光率减弱,活细胞数目减少,且随着SAHA浓度升高细胞形态改变更明显。瑞氏吉姆萨染色发现,SAHA 64 μmol·L-1与OC3/P细胞孵育24 h,使细胞体积减小、细胞质凝集和核固缩。MTT法检测结果表明,SAHA 4~64 μmol·L-1对OC3/P细胞存活具有抑制作用,并存在明显的时间和浓度效应关系,其中SAHA 64 μmol·L-1作用 6,12,24和48 h对OC3/P细胞存活的抑制率分别为(7.1±1.9)%,(14.6±2.0)%,(36.8±2.7)%和(83.3±3.0)%(r=0.891,P〈0.05),SAHA 4,8,16,32和64 μmol·L-1作用48 h对OC3/P细胞存活的抑制率分别为(28.8±1.2)%,(34.8±4.3)%,(52.3±2.8)%,(61.3±4.9)%和(83.3±3.0)%(r=0.966,P〈0.05)。流式细胞术检测结果表明,SAHA 4,16和64 μmol·L-1作用48 h均可诱导OC3/P细胞凋亡(P〈0.05,P〈0.01)。透射电镜观察结果表明,SAHA 4,16和64 μmol·L-1作用24 h,OC3/P细胞核出现典型的凋亡形态变化。结论 SAHA可抑制人卵巢癌紫杉醇耐药细胞OC3/P的存活并诱导其凋亡。 刘朝晖 刘雨潇 李俊峰 赵岳 刘元林 童英 张毅关键词:卵巢癌 紫杉醇 P 一种细胞培养装置 本实用新型公开了一种细胞培养装置,包括:一细胞培养罐,其一端设置有种子细胞入口、营养液入口以及基质细胞添加口,其另一端设置有培养后细胞出口、代谢废液出口以及基质细胞排出口;细胞培养罐内设置有至少2根营养液供应管、一根代谢... 裴雪涛 张鹏 习佳飞 王韫芳 闫舫 吉蕾 刘雨潇文献传递 ICAM-1基因转染对小鼠间充质干细胞成脂分化功能的影响 被引量:3 2013年 目的探讨细胞间黏附分子1(ICAM-1)基因转染对小鼠间充质干细胞(MSC)向脂肪细胞分化的影响。方法构建含小鼠ICAM-1基因全长DNA片段的MIGRl-ICAM-1重组逆转录病毒质粒,连同空质粒MIGRl及包装质粒ECOS分别转染T293细胞,收集相关病毒上清并感染小鼠MSC细胞系C3H10T1/2细胞,荧光倒置显微镜下观察及real.timePCR法和流式细胞术检测转染效率,将获得稳定过表达ICAM-1的C3H10T1/2细胞(C3H10T1/2-ICAM-1细胞)和转入空质粒的C3H10T1/2细胞(C3H10T1/2-MIGRl细胞)向脂肪细胞诱导分化,以原位油红O染色和real—timePCR检测成脂分化能力及其关键转录因子C/EBPoL和PPARy mRNA的表达水平。结果成功构建MIGRl-ICAM一1逆转录病毒载体;感染C3H10T1/2细胞获得稳定过表达ICAM-1的C3H10T1/2-ICAM-1细胞和空载体对照C3H10T1/2一MIGRl细胞。成脂细胞诱导分化结果显示,无论是在自分化还是诱导分化组中,C3H10T1/2-ICAM-1细胞与转染空载体的细胞相比脂滴变小,其脂肪细胞数量分别为[(3.2±0.5)/孔、(12.2±3.8)/孔],显著少于转染空载体的细胞[(11.2±0.4)/孔、(51.3±2.8)/孔](P〈0.05);C3H10T1/2一ICAM一1细胞自分化组和诱导分化组C/EBPoLmRNA表达水平分别为1.2±0.7和2.9±0.9);PPAR-,/mRNA表达水平分别为1557.6±70.2和7547.0±442.2,均较转染空载体细胞的5.8±0.5和23.0±2.3:2453.04-215.6和9856.3±542.2下调(P〈0.05)。结论细胞表面ICAM一1过表达可抑制小鼠MSC的成脂分化。 徐芬芬 朱恒 陈继德 刘元林 刘雨潇 郑荣秀 张毅关键词:基因 ICAM-1 间充质干细胞 基因转染 细胞分化 siRNA沉默socs3对红系发育的影响 被引量:3 2008年 为了研究细胞因子信号转导分子3(suppressor of cytokine signals-3,SOCS-3)对造血发育的影响,构建了SOCS-3慢病毒siRNA干涉载体,并转染人红白血病细胞株K562.根据绿色荧光蛋白的表达进行流式分选后,获得了高表达慢病毒干涉载体的细胞.实时荧光定量PCR和Western-blot检测了转染细胞中SOCS-3基因的干涉效率,结果显示,与对照组相比,siRNA干涉后K562细胞SOCS-3基因的表达量仅为其相对表达量的22.1%,干涉效率77.9%;Western-blot结果显示,SOCS-3在蛋白质水平表达也明显受抑制.进一步对SOCS-3基因沉默后的K562细胞进行了诱导分化,并采用联苯胺染色法检测K562细胞向红系分化比例变化,免疫荧光染色检测细胞表面抗原的变化,RT-PCR检测造血相关基因的变化.结果发现,SOCS-3沉默后K562细胞向红系的发育能力显著提高.研究结果证明,SOCS-3在造血发育中有重要调控作用,而对其表达进行干涉或沉默将在规模化的红细胞诱导研究中发挥重要作用. 刘雨潇 吉蕾 袁红丰 陈琳 薛郡 管兆轩 南雪 白慈贤 王韫芳 岳文 裴雪涛关键词:SOCS-3 慢病毒 K562细胞 体外诱导脐带血来源的造血干细胞分化为成熟红细胞 目的:目前临床输血治疗面临血源紧张和相关传染病的发生等问题,寻找血液替代来源一直是输血医学的重要研究方向,为解决这一问题我们建立了体外诱导脐带血来源的造血干细胞分化为成熟红细胞的方法,为体外获得新的安全的血液来源进行基础... 习佳飞 张鹏 王韫芳 吉蕾 刘雨潇 南雪 白慈贤 裴雪涛关键词:造血干细胞 红细胞 文献传递 干细胞移植治疗神经系统疾病的研究进展 被引量:1 2012年 神经系统的疾病包括损伤性病变、遗传缺陷性或退行性病变,前者如脑血管意外、脑损伤、感染等;后者则包含阿尔茨海默病、帕金森病等。神经系统病变主要表现为神经细胞损伤,其治疗一直是个医学难题,目前多采取综合支持治疗和对症康复治疗,然而这些方法不能从根本上修复受损神经细胞,常导致难以治愈的神经功能障碍。 刘雨潇 郭晓明 张志文关键词:神经系统疾病 细胞移植治疗 神经细胞损伤 神经变性疾病 退行性病变 冷诱导RNA结合蛋白在急性脑外伤后的表达变化及其促炎作用研究 2015年 目的:观察小鼠急性脑外伤后,冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)的表达变化情况及其对炎症因子的影响,旨在探讨CIRP在神经系统损伤性疾病中的作用,为该疾病的临床治疗提供新的思路。方法:成年小鼠随机分为正常组(n=10)和手术组(n=36),用液压打击法建立小鼠急性脑外伤模型,利用HE染色法观察模型建立后小鼠大脑的损伤情况;损伤后24、48 h时间点,采用实时PCR检测大脑损伤部位CIRP和炎症因子肿瘤坏死因子α(TNFα)m RNA的表达,免疫组织化学法检测CIRP蛋白水平的表达;分析CIRP表达变化与炎症因子TNFα相关性。结果:急性脑外伤后小鼠脑损伤部位的CIRP m RNA及蛋白表达水平呈上升趋势,CIRP表达与炎症因子TNFα表达正相关。结论:CIRP可能参与了小鼠脑外伤的炎性反应过程。 刘雨潇 刘文佳 苏宁 张志文 薛菁辉关键词:急性脑损伤 炎症因子 胚胎干细胞自我复制及亚全能分化特性维持的分子机制 被引量:1 2007年 微环境中的各种细胞因子与细胞内的多种转录因子通过一定的信号系统相互作用构成网络,共同调控胚胎干细胞的自我复制.本文对维持胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)亚全能分化特性的相关分子、信号通路以及它们的作用方式进行了综述,探讨了胚胎干细胞自我复制及亚全能分化特性维持的分子机制. 刘雨潇 吉蕾 王韫芳 裴雪涛关键词:自我复制 信号网络 分子机制 CIRP的功能与用途 本发明属于医疗技术领域,具体涉及CIRP的功能与用途。本发明经过广泛而深入的研究,首次揭示了冷诱导结合蛋白CIRP在胶质瘤细胞异常表达,其表达水平与肿瘤分级及耐药相关,目前CIRP基因表达水平与胶质瘤恶性分化程度、转移及... 刘雨潇 张志文 薛菁晖 刘爱军 张海涛 李首春文献传递 永生化胎猪胰腺源间充质干细胞移植糖尿病小鼠的研究 被引量:1 2013年 为研究长春花生物碱(conophylline)诱导永生化猪胰腺源间充质干细胞(iPMSCs)对糖尿病小鼠的治疗效果,将长春花生物碱诱导的iPMSCs细胞移植到裸鼠体内2周后进行致瘤性安全检测;以双硫腙染色(DTZ)检测诱导iPMSCs的胰岛素功能性分化;将诱导的iPMSCs移植到糖尿病模型的小鼠体内,通过监测小鼠体重和血糖的变化,判断长春花生物碱诱导的iPMSCs对糖尿病小鼠的治疗效果。结果表明,诱导后的iPMSCs无致瘤性,呈DTZ阳性。诱导的iPMSCs移植到糖尿病小鼠体内后,与对照组小鼠相比,诱导的细胞会减缓糖尿病小鼠体重的降低趋势,且在短期内(1周)能恢复高血糖至正常水平。说明长春花生物碱具有诱导iPMSCs分泌胰岛素、短期治疗糖尿病的作用。 张慧茹 李丹 刘雨潇 王雪琴 李强 冯九星关键词:细胞移植 糖尿病 小鼠