肖丽容
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省科技厅科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 利用活体电转化技术研究小鼠视网膜发育过程中的重要转录因子
- 目的:利用活体电转化技术,将转录因子Sine oculis homeobox homolog 1及其辅助因子导入新生小鼠视网膜中,研究其对小鼠视网膜发育的影响。方法:通过新生小鼠视网膜下注射的方法,利用活体电转化仪将高浓...
- 闫乃红肖丽容陈大年
- 关键词：新生小鼠外源基因发育过程
- 文献传递
- 活体电转化技术在新生小鼠视网膜中的应用被引量：1
- 2014年
- 活体电转化技术是在高电压的脉冲作用下,瞬态增加细胞膜的渗透性从而将外源基因高效导入细胞的方法。与病毒载体等其他方法相比,活体电转化技术具有安全、高效、快速、稳定及应用范围广等优点,近年来在很多组织和器官中得到广泛使用,包括在眼科研究领域。文章介绍了活体电转化技术在新生小鼠视网膜中的应用,通过新生小鼠视网膜下注射的方法,经几次高电压的脉冲,将高浓度的绿色荧光蛋白表达质粒导入新生小鼠视网膜细胞内。通过冰冻切片观察绿色荧光蛋白在视网膜中的表达。结果表明绿色荧光蛋白在视网膜外核层高表达,证实了活体电转化技术可以将外源基因高效、快捷的导入视网膜,从而为研究视网膜发育及功能提供一种有效的手段。
- 肖丽容陈大年闫乃红
- 关键词：新生小鼠视网膜冰冻切片
- 组蛋白甲基化酶抑制剂对人淋巴瘤Raji细胞生存、凋亡及细胞周期的影响被引量：2
- 2019年
- 目的研究组蛋白甲基化酶Zeste基因增强子同源物2 (enhancer of zeste homolog 2, EZH2)的3种抑制剂(UNC1999、DZNep及GSK343)对人B细胞非霍奇金淋巴瘤Raji细胞的影响。方法 PCR扩增EZH2基因16(Y641)和18(A677)外显子,Sanger测序检测其突变情况;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测正常成年人淋巴细胞及Raji细胞EZH2的表达;使用不同浓度的UNC1999、DZNep及GSK343处理Raji细胞,CCK-8技术检测Raji细胞的生存情况;流式细胞术检测Raji细胞的凋亡情况和细胞周期变化;Western blot检测药物处理后EZH2及H3K27 me3的表达。结果 Sanger测序显示Raji细胞不携带EZH2基因Y641和A677突变位点。Western blot显示,相比正常成年人淋巴细胞,Raji细胞EZH2蛋白高表达。CCK-8法结果显示UNC1999、DZNep及GSK343对Raji细胞均有抑制生存的作用, DZNep抑制能力最弱。流式细胞术凋亡检测显示UNC1999、DZNep及GSK343促进Raji细胞的凋亡,UNC1999作用强于GSK343与DZNep;3种抑制剂均阻滞Raji细胞于G_1/G_0期,UNC1999组细胞周期阻滞最显著。Western blot显示UNC1999和GSK343抑制EZH2组蛋白甲基化酶的活性,降低H3K27 me3的表达。结论 EZH2抑制剂可通过降低H3K27 me3的表达抑制Raji细胞生存,促进细胞凋亡,改变细胞周期。UNC1999作用效果优于GSK343及DZNep,且EZH2抑制剂对Raji细胞的作用不依赖于EZH2的突变。
- 肖丽容侯宸郑仕洁郭波陈大年闫乃红
- 关键词：细胞周期
- 小鼠视网膜体外电转化及Transwell体外培养的方法被引量：2
- 2018年
- 目的介绍小鼠视网膜体外电转化及体外培养的方法 ,并对其关键技术步骤进行探讨。方法将新生小鼠处死后,取出眼球分离视网膜,利用电转化仪将携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)报告基因的质粒转入视网膜细胞,然后在Transwell小室中铺片培养,利用免疫荧光方法检测Rhodopsin基因的表达。结果视网膜体外培养10d,Rhodopsin和DAPI染色显示视网膜形态完整。通过电转化方法将GFP质粒导入视网膜细胞,进行体外培养5～10 d后可检测GFP报告基因的表达。结论视网膜体外电转化结合体外培养方法是一种快速、高效研究视网膜相关基因的方法 ,可以应用于视网膜疾病、视网膜发育及相关基因功能等研究,具有独特的优势。
- 肖丽容郑仕洁侯宸闫乃红
- 关键词：体外培养免疫荧光染色
