徐殿胜 作品数:67 被引量:211 H指数:9 供职机构: 华东理工大学 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家科技支撑计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 环境科学与工程 更多>>
结核病核酸疫苗纯化过程的初步研究 被引量:1 2006年 对结核病核酸疫苗的质粒DNA的制备性纯化过程进行了初步研究。此工艺主要包括以简化的碱裂解法处理大肠杆菌、超滤与离心法除大部分杂质并浓缩样品、Q-Sepharose阴离子交换层析、DNA B ioSepharTMFF亲和层析等步骤,以去除细胞RNA和蛋白等杂质,并对不同分子结构的质粒DNA作分离。结果表明:以碱裂液中质粒DNA为计算基准的得率为56.61%、超螺旋质粒DNA的电泳纯度100%。 毛记军 徐殿胜 夏杰 陆兵关键词:结核病 核酸疫苗 质粒 纯化 层析 进境苹果果实中梨火疫病菌的套式PCR检测 被引量:9 2009年 针对进境商用苹果果实携带梨火疫病菌Erwinia amylovora数量有限的特点,选取源于病菌pEA29质粒的2对引物P29A/P29B和PEANT1/PEANT2配对组合成套式PCR,其检测灵敏度可达0.15 pg菌体DNA,检测灵敏度高于EPPO推荐的单管套式PCR方法和常规PCR方法。分别利用这3种PCR检测方法对美国、新西兰、日本和智利等国进境的166批苹果样品进行检测,3种检测方法的样品阳性率分别为53.6%、38.0%和8.4%,试验结果表明此套式PCR检测方法可用于进境商用苹果的梨火疫病菌快速检测。进境样品的检测结果证实了进境商用苹果果实中存在梨火疫病菌的可能性。 贾平乔 周国梁 吴杏霞 张卫东 杨晓君 徐殿胜 易建平关键词:梨火疫病菌 苹果果实 套式PCR 微载体培养Vero细胞工艺条件初探 1989年 本文研究了细胞生长过程中微载体的种类,浓度及细胞的接种量、溶解氧水平对培养Vero细胞的影响。在pH为7.0~7.4,液解氧水平为30%~50%空气饱和浓度,搅拌速度为25~35r/min,温度为37℃时,在1.5升Celligen^(TM)系统中,连续培养7天,可使细胞浓度达到2.5×10~6 Cells/ml,为接种量的12倍,细胞生长旺盛,形态正常。 徐殿胜 董树沛 华平 王国政 俞俊棠 宋家骊 陈列胜 贺适民关键词:细胞培养 VERO细胞 微载体 溶解氧 一种连续流生物催化合成(S)-5-甲基-2-吡咯烷酮的方法 本发明公开了一种连续流生物催化合成(S)‑5‑甲基‑2‑吡咯烷酮的方法,使用胺脱氢酶催化乙酰丙酸不对称还原制备光学4‑氨基戊酸,再通过中间产物光学4‑氨基戊酸的分子内环化合成(S)‑5‑甲基‑2‑吡咯烷酮,酶促反应中,甲... 白云鹏 钱源益 张晓彦 徐殿胜治疗性DNA疫苗生产工艺及质量检测的研究 被引量:1 2009年 研究了治疗性DNA疫苗的大规模生产工艺。利用硫酸铵沉淀法和超滤技术对发酵菌体的碱裂解液进行预处理,除去发酵液中大量的RNA;然后依次用凝胶过滤层析、亲和层析和离子交换层析对DNA疫苗进行纯化;并对最终质粒DNA溶液进行全面的质量检测。结果表明,DNA疫苗总产率可达62%,各项质量指标均符合药用DNA疫苗质量标准。该纯化工艺操作简便、成本低,适用于大规模工业化生产。 王浪 陆兵 夏杰 徐殿胜关键词:DNA疫苗 生产工艺 纯化 层析 一种医用丝素蛋白材料的表面处理方法 本发明公开了一种医用丝素蛋白材料的表面处理方法,首先通过一定条件下的深层次清洗,消除材料上的痕量污染,恢复丝素蛋白固有的本色,然后通过在材料表面耦合促进细胞生长的细胞生长因子,使材料表面含有细胞生长因子,从而大大提高和改... 徐殿胜 陆兵 夏杰 谢菁文献传递 培养基组分对hCG核酸疫苗质粒拷贝数的影响 被引量:1 2009年 研究了培养基组分对hCG核酸疫苗质粒拷贝数的影响。结果表明,复合培养基比合成培养基更利于hCG核酸疫苗质粒DNA的生产。通过均匀设计实验确定,当培养基中含有胰蛋白胨10g·L-1、酵母浸出粉8g·L-1、NaCl10g·L-1、甘油10g·L-1、KH2PO40.37g·L-1、K2HPO42.01g·L-1时,单位菌体质粒含量可达6.68mg·g-1;在此基础上添加乙酸2.0g·L-1、谷氨酰胺1.2g·L-1、甘氨酸1.0g·L-1、天门冬氨酸0.4g·L-1,可使质粒拷贝数进一步扩增,单位菌体质粒含量可达9.32mg·g-1,为LB培养基的5.12倍。 王剑 夏杰 陆兵 徐殿胜关键词:DNA疫苗 质粒 拷贝数 培养基 核酸疫苗载体pVAX-44质粒高拷贝研究 被引量:1 2008年 研究了质粒复制的前体物质、蛋白质合成抑制剂及金属离子对核酸疫苗载体pVAX-44质粒拷贝数的影响。结果表明,在改良的LB培养基中分别添加谷氨酰胺、甘氨酸、天门冬氨酸和Fe3+时,单位菌体质粒含量分别达到5.88mg.g-1、7.15 mg.g-1、5.93 mg.g-1、7.38 mg.g-1,同时添加这几种物质时,质粒拷贝数可以得到进一步扩增。均匀设计实验结果表明,改良的LB培养基中含有1.6 g.L-1甘氨酸、1.0 g.L-1天门冬氨酸、0.2 g.L-1谷氨酰胺、0.4mmol.L-1Fe3+时,单位菌体质粒含量可达到9.11 mg.g-1,明显高于单独添加这几种物质时的质粒拷贝数。在此基础上加入0.1 g.L-1链霉素抑制蛋白质合成,单位菌体质粒含量可达到9.53 mg.g-1,较对照提高了56.25%。 丁霞 陆兵 夏杰 徐殿胜关键词:质粒 拷贝数 核酸疫苗 昆虫细胞(Sf9)培养中葡萄糖、乳酸的影响 被引量:2 1996年 昆虫细胞培养已经在小儿灰髓炎、乙肝表面抗原等研究中得到系统应用,此外,许多高值的治疗性蛋白药物,如tPA、白细胞介素-2、β-干扰素和促红细胞生成素等的研究过程中昆虫细胞及杆状病毒的培养已成为新的生物工程手段。在美国、荷兰等国已成功地得到了外源基因大量表达的药物。在我国也已成功构建了人-α干扰素的昆虫细胞/杆状病毒表达系统。同时昆虫杆状病毒本身可以制备成各种专一性较强的广谱、无公害、无毒性的的农用杀虫剂。 徐殿胜 陈国豪 陆兵 俞俊棠关键词:昆虫 细胞培养 葡萄糖 乳酸 落地生根叶中黄酮的分离与鉴定 被引量:12 2005年 本实验通过甲醇萃取、大孔树脂吸附、乙醇-氯仿混合溶剂萃取和聚酰胺层析以及制备色谱从落地生根Bryophyllum pinnatum叶中分得槲皮素-3-α-L-鼠李糖-β-D-木糖苷。 曹宏 夏杰 徐殿胜 陆兵 陈国豪关键词:黄酮