刘安元
- 作品数：27 被引量：141H指数：4
- 供职机构：南华大学医学院病原生物学研究所更多>>
- 发文基金：湖南省教育厅科研基金国家自然科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学经济管理更多>>
- GFP-hDaxx融合蛋白高表达抑制活化巨噬细胞分泌TNFα
- 2003年
- 目的 研究GFP -hDaxx融合蛋白 (GFP -hDaxx)即时高表达对激活巨噬细胞分泌TNFα的影响。方法 将GFP -hDaxx真核细胞表达载体pEGFP hDaxx转染巨噬细胞 ,用荧光显微镜观察GFP -hDaxx在巨噬细胞内的表达与定位。通过hDaxx在巨噬细胞内的即时高表达 ,测定LPS诱导激活巨噬细胞后 ,在 0 .5、4、1 2h时 ,活化巨噬细胞分泌细胞因子TNFα的含量。结果 GFP -hDaxx在巨噬细胞内即时高表达且定位于细胞核。GFP -hDaxx在巨噬细胞内的高表达 ,使LPS诱导活化的巨噬细胞分泌TNFα量明显降低 (在 4h及 1 2h时与对照组差异有显著性 ,P <0 .0 0 1 )。结论 hDaxx即时高表达降低活化的巨噬细胞分泌TNFα。
- 何爱桃唐旭红周艺杨露清刘安元万艳平
- 关键词：巨噬细胞TNFΑ
- hDaxx融合蛋白高表达降低活化巨噬细胞分泌IL-1β
- 2004年
- 目的 研究GFP -hDaxx融合蛋白 (GFP -hDaxx)即时高表达对激活巨噬细胞分泌IL - 1 β的影响。方法 将GFP -hDaxx真核细胞表达载体pEGFP/hDaxx转染巨噬细胞 ,利用Westernblotting检测表达产物。通过hDaxx在巨噬细胞内的即时高表达 ,测定LPS刺激巨噬细胞后 0 .5h、4h、1 2h时 ,活化巨噬细胞分泌细胞因子IL - 1 β的含量。结果 pEGFP/hDaxx在巨噬细胞内成功表达GFP -hDaxx融合蛋白。GFP -hDaxx在巨噬细胞内的高表达 ,使LPS诱导活化的巨噬细胞分泌IL - 1 β量明显降低 (在4h及 1 2h时与对照组差异有显著性 ,P <0 .0 0 1 )。结论 hDaxx即时高表达降低活化的巨噬细胞分泌IL - 1 β。
- 余敏君钟飞刘安元朱翠明万艳平
- 关键词：HDAXX巨噬细胞IL-1Β
- hDaxx高表达抑制地塞米松诱导的HeLa细胞凋亡
- 2005年
- 目的 利用真核表达载体pEGFP/hDaxx在HeLa细胞中高表达hDaxx ,研究hDaxx对HeLa细胞凋亡的影响。 方法 将pEGFP/hDaxx转染HeLa细胞,Western -blotting鉴定GFP -hDaxx融合蛋白的表达,荧光显微镜观察GFP -hDaxx融合蛋白在细胞内的表达及定位,用地塞米松诱导HeLa细胞凋亡,细胞用Giemsa染色后,观察细胞形态变化并计算HeLa细胞凋亡率。 结果 GFP -hDaxx融合蛋白在HeLa细胞中成功表达并定位于细胞核。地塞米松对照组与pEGFP对照组凋亡率无显著性差异(P >0 .0 5 ) ,而pEGFP/hDaxx组凋亡率显著降低(P <0 .0 1) ,即hDaxx即时高表达降低地塞米松诱导的HeLa细胞凋亡率。 结论 Daxx为调控蛋白,GFP -hDaxx融合蛋白在HeLa细胞中表达并定位于细胞核,且hDaxx即时高表达抑制地塞米松诱导的HeLa细胞凋亡。
- 刘安元谭立志万艳平吴移谋刘传爱余敏君
- 关键词：HDAXXHELA细胞凋亡
- Caski细胞内Daxx与HPV16 E2蛋白的结合作用
- 2015年
- 目的研究人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白在Caski细胞内与Daxx的相互作用,探讨它们在HPV16所致宫颈癌发生发展中的作用。方法利用间接免疫荧光染色技术观察HPV16 E2和Daxx在Caski细胞中的分布或共定位;通过免疫共沉淀试验和免疫印迹分析HPV16 E2与Daxx在Caski细胞内的相互作用。结果在Caski细胞内,Daxx和HPV16 E2主要分布于胞浆,少数分布于胞核,且两种信号在细胞浆内有一定的共存;抗E2抗体能沉淀Daxx,反之抗Daxx抗体同样能够沉淀HPV16 E2。结论 HPV16 E2与Daxx在Caski细胞存在直接的相互作用。
- 刘越唐双阳刘安元蔡恒玲安振刘志敏万艳平
- 关键词：人乳头瘤病毒16型CASKI细胞E2蛋白
- 人巨细胞病毒IE1核酸疫苗的免疫效果研究
- 2011年
- [目的]用人巨细胞病毒(HCMV)IE1核酸疫苗pcDNA3.1(-)-IE1免疫BALB/c小鼠,初步研究其产生的体液免疫和细胞免疫应答水平。[方法]将pcDNA3.1(-)-IE1通过肌肉注射免疫BALB/c小鼠,通过PCR测定和免疫组化检测其在肌细胞中的表达,细胞因子测定、淋巴细胞转化实验检测免疫效果。[结果]PCR检测到与IE1大小一致的片段,免疫组化结果显示IE1基因在小鼠肌细胞中表达IE1目的蛋白。小鼠脾淋巴细胞经PHA刺激后,实验组IL-4、IL-2、IFN-γ含量以及淋巴细胞转化率显著增高,与对照组比较差异有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]pcDNA3.1(-)-IE1核酸疫苗能在BALB/c小鼠肌细胞中稳定存在并能表达HCMV IE1蛋白,pcDNA3.1(-)-IE1核酸疫苗可诱导BALB/c小鼠脾细胞分泌IL-4、IL-2、IFN-r并刺激BALB/c小鼠脾细胞增殖。
- 刘安元曹清香唐双阳陈琳万艳平
- 关键词：疫苗免疫应答
- GFP-hDaxx融合蛋白在真核细胞中的表达与鉴定被引量：4
- 2003年
- 目的构建GFP—hDaxx融合蛋白真核表达载体pEGFP/hDaxx,并在HeLa细胞中表达,为进一步研究hDaxx在细胞凋亡、病毒感染中的作用提供实验基础。方法 用T4DNA连接酶将hDaxx亚克隆入载体pEGFP,筛选阳性克隆。将质粒pEGFP/hDaxx转染HeLa细胞,Western—Blotting鉴定表达产物,荧光显微镜观察GFP—hDaxx融合蛋白在细胞内的定位。结果成功构建了GFP—hDaxx融合蛋白真核表达载体pEGFP/hDaxx,GFP—hDaxx融合蛋白成功表达并定位HeLa细胞核。结论GFP—hDaxx融合蛋白成功地在真核细胞表达并定位于细胞核。
- 刘安元谭立志万艳平吴移谋余敏君粟盛梅
- 关键词：融合蛋白真核细胞细胞核HDAXX早幼粒细胞白血病
- GFP-hDaxx融合蛋白在巨噬细胞中的表达与定位被引量：3
- 2003年
- 目的 构建GFP -hDaxx融合蛋白真核表达载体pEGFP/hDaxx并在巨噬细胞中表达 ,为研究hDaxx对巨噬细胞凋亡及分泌活性的影响提供实验基础。 方法 将hDaxxcDNA片段亚克隆入载体pEGFP ,构建GFP -hDaxx融合蛋白真核表达载体。将质粒pEGFP/hDaxx转染巨噬细胞 ,Westernblotting鉴定表达产物 ,荧光显微镜观察GFP -hDaxx融合蛋白在细胞内的表达与定位。 结果 成功构建了GFP -hDaxx融合蛋白真核表达载体pEGFP/hDaxx ,GFP -hDaxx融合蛋白在巨噬细胞中表达并定位于细胞核。 结论 pEGFP/hDaxx在巨噬细胞中即时高表达GFP
- 谭立志刘传爱刘安元万艳平
- 关键词：HDAXX巨噬细胞
- HPV16 E6蛋白与hDaxx的相互作用及其对HeLa细胞凋亡的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:研究HPV16 E6(human papillomavirus type16 E6)蛋白与hDaxx(human death domain associated protein)的相互作用及其对HeLa细胞凋亡的影响,为探索HPV16 E6蛋白的致癌机制提供实验依据。方法:构建pGADT7-E6和pGBKT7-hDaxx重组载体,利用酵母双杂交系统检测HPV16 E6蛋白与hDaxx的相互作用,并用Western印迹法检测二者在酵母菌中的表达。将E6与hDaxx的真核表达载体共转染HeLa细胞,用5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导凋亡,FCM法检测凋亡率。结果:E6蛋白与hDaxx在细胞内存在相互作用。共转染pcDNA3.1(-)/E6和pcDNA3.1(-)/hDaxx的HeLa细胞,随pcDNA3.1(-)/hDaxx转染量的增加凋亡率上升,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:HPV16 E6蛋白与hDaxx在细胞内相互作用,hDaxx过表达可提高表达E6蛋白的HeLa细胞对5-FU的敏感性,且这种关系存在剂量依赖性。E6蛋白可能通过和hDaxx的相互作用抑制细胞凋亡。
- 王鑫朱翠明刘安元尹卫国李金丽蔡恒玲万艳平
- 关键词：HELA细胞双杂交系统技术细胞凋亡
- 人巨细胞病毒IE1蛋白促进巨噬细胞分泌IL-1β、TNF-α及凋亡被引量：1
- 2008年
- 为了研究HCMV IE1-GFP融合蛋白瞬时高表达对巨噬细胞分泌活性及其凋亡的影响,将真核表达载体pEGFP/IE1转染至巨噬细胞(Mφ),转染48h后,用荧光显微镜观察GFP-IE1融合蛋白或GFP的表达与定位。ELISA法检测细胞培养上清中IL-1β或TNF-α的含量以及用RT-PCR检测其mRNA的表达情况,并收集Mφ经PI染色后流式细胞术(FCM)检测其凋亡率。结果发现,GFP-IE1融合蛋白在Mφ内瞬时表达且定位于细胞核,GFP定位于整个细胞中。GFP-IE1融合蛋白在Mφ内瞬时高表达使Mφ分泌IL-1β和TNF-α量及其mRNA表达量均增加且Mφ凋亡率明显上升,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),而GFP表达对Mφ分泌及其凋亡无影响(P>0.05)。HCMV IE1瞬时高表达可上调Mφ分泌细胞因子IL-1β和TNF-α并促进Mφ凋亡。
- 刘安元陈琳万艳平陈熙朱翠明余敏君曹清香
- 关键词：巨噬细胞IL-1ΒTNF-Α凋亡
- 硕士研究生培养模式构建研究——以南华大学研究生教育为例
- 本文简述了国内外研究生培养模式的发展史：学徒式培养模式、专业化模式、协作式培养模式、教学式培养模式;并分析了南华大学研究生教育现状及特点，并探讨了构建硕士研究生培养模式的思路。
- 周晓东樊华刘锋刘安元张良久
- 关键词：研究生教育教育质量课程设置
- 文献传递
