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夜来香均一化全长cDNA文库的构建与花香相关基因的遗传转化: 夜来香（Cestrum nocturanum）是茄科（Solanaceae）夜香树属（Cestrum）植物，可用于开发生物农药，可用于盆栽、插花、布置庭院、窗前、塘边和亭畔，是一种极具开发利用价值和应用前景广阔的园林花卉...; 郑鸿昌; 关键词：夜来香超表达; 文献传递

夜香树均一化全长cDNA文库的构建及EST分析被引量：3: 2016年; 为构建高质量的夜香树(Cestrum nocturnum)均一化全长c DNA文库,以其花朵为材料,采用DSN均一化技术与改进的SMART技术相结合,将连接产物进行脱盐浓缩后电转化进行构建。结果表明,未脱盐连接产物的转化效率为1μL连接产物有7000个菌落,理论重组率为96%;脱盐后,提升为4.1×106个菌落,理论重组率为98%;蓝斑也有插入片段,实际重组率应为100%;插入片段大小平均为1.6 kb。随机挑取500个单克隆(含50个蓝斑)测序,共获得464条EST,单一序列(unigene)为426条,占91.8%,其中片段重叠群26个,单基因400个,冗余率仅为8.1%,表明构建文库的均一化效果较好,可满足后续功能基因的筛选和基因信息的研究。; 郑鸿昌刘涛吕恃衡陈建军何水林潘东明陈桂信; 关键词：EST

■生长发育过程中和受机械损伤后PPO基因的表达被引量：6: 2012年; 从■(Prunus salicina Lindl.var.cordataJ.Y.Zhang et al.)成熟叶片均一化全长cDNA文库中新分离得到了1个PPO基因,命名为PsPPO2,基因登录号为JF681036.1。经NCBI-BLAST分析,其核苷酸序列与蔷薇科果树中的河北鸭梨和富士苹果果实的PPO基因具有很高的同源性,分别为81%和80%;与作者先前分离克隆的PsPPO1和PsPPO3基因同源性分别为55%和56%,说明此克隆是PPO基因家族的新成员。通过RT-PCR分析,PsPPO1、PsPPO2和PsPPO这3个基因在■不同生长发育时期和果实受损伤后的表达模式。在叶片发育过程中,PsPPO2表达量都很高;PsPPO1在嫩芽和幼叶中表达;PsPPO3只在嫩芽中表达;在果实发育的不同时期,PsPPO2和PsPPO3在早期表达,随着果实成熟表达量下降,PsPPO1在褐变果中表达量较高。受机械损伤后,PsPPO1受诱导,而PsPPO2和PsPPO3不受诱导。; 姜翠翠陈桂信潘东明潘腾飞赖燕郑鸿昌; 关键词：多酚氧化酶基因表达机械损伤

[木奈]褐变果实均一化全长cDNA文库的构建及部分ESTs序列分析被引量：4: 2013年; 以发生褐变初期的(木奈)果肉总RNA为材料,对SMARTTMcDNA合成方法进行改良,并将长距离PCR、DSN处理和定向克隆相结合,成功构建(木奈)褐变果实均一化全长cDNA文库。经检测,该文库的初始滴度为2.0×106pfu/mL,重组率为99%,插入片段大小平均为1.8 kb,文库质量良好。随机挑取720个阳性克隆进行5′EST测序,共获得684条有效的ESTs序列;并将684条有效序列拼接后,58条被组装成21个重叠群(contigs),单拷贝(singlets)基因有626条,共得到647个单基因簇(unigenes),文库冗余率为8.4%。用Blast 2 go在线软件对测序结果进行功能注释和归类分析,结果显示,已知功能基因与能量代谢、蛋白质合成与降解、次生代谢物质、细胞壁代谢和转录因子有关。该文库的构建有利于从分子水平上研究(木奈)果实褐变发生的机制。; 姜翠翠陈桂信潘东明赖燕郑鸿昌; 关键词：褐变表达序列标签

夜来香Dof基因及其启动子的克隆被引量：1: 2013年; 为探究夜来香生物钟的调控机制,本研究从花瓣均一化cDNA文库EST序列中获得Dof基因的部分cDNA序列,通过RACE获得Dof基因的全长cDNA,命名为CnDof,在此基础上,采用APA-Genomic walking技术,分离获得该基因的启动子,启动子长度为2 054 bp,通过在线软件PlantCare分析顺式作用元件。结果表明:该基因全长cDNA为2 087 bp,ORF为1 530 bp,编码一条含510个氨基酸的多肽链,在该多肽链的N端有典型Dof结构域,可初步推断,该基因是Dof的同源基因;所获得的启动子中含有大量与光反应相关的元件,可初步推测,Dof基因可能参与夜来香生物钟的调控。; 吕恃衡陈桂信郑鸿昌潘东明; 关键词：夜来香启动子生物钟

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郑鸿昌