刘清海
- 作品数：16 被引量：6H指数：2
- 供职机构：华东理工大学更多>>
- 发文基金：上海市科委科技攻关项目上海市教育委员会重点学科基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：化学工程医药卫生轻工技术与工程理学更多>>
- 甾体转化的细胞工厂创建及甾体药物绿色制造技术
- 魏东芝王风清陶欣艺王学东刘清海应明华朱秀燕魏巍王玮赵莉高蓓王华磊林金萍任宇红孙爱友
- 该项目属生物化工领域。甾体药物临床用药有300多种，在消炎、生育、避孕、抗肿瘤及危重病人抢救等方面为刚需用药，销售额约占医药总额的10%。传统甾体药物主要依赖于半合成法生产，从原料到产品转化过程冗长复杂，涉及重金属和危险...
- 关键词：
- 关键词：甾体药物合成工艺
- 抗肿瘤药物TAT(m)－Survivin(T34A)的纯化复性方法
- 本发明提供了一种重组抗肿瘤蛋白新药TAT(m)－Survivin(T34A)的纯化复性方法，所述方法包括以下步骤：包涵体制备与洗涤，包涵体变性，蛋白复性，蛋白纯化，其特征在于，蛋白复性采用阴离子交换层析复性，蛋白纯化采用...
- 魏东芝马兴元张海毅李明华郑文云赵莉刘清海
- 文献传递
- 生物转化甾醇生产甾体药物中间体的创新途径与技术
- 魏东芝王风清王学东陶欣艺刘清海魏巍王玮赵莉高蓓王华磊顾向忠林金萍谢静莉孙爱友徐丽琴
- 该项目属生物化工领域。甾体药物是仅次于抗生素的第二大类药物，临床用药约有300种，销售额约500亿美元，约占世界医药产品销售额的10%。甾药以激素药物为主，在消炎、生育、避孕、抗肿瘤、内分泌调控以及抢救危重病人等方面属刚...
- 关键词：
- 一种S型ω-转氨酶高活性突变体
- 本发明属于生物催化领域，具体涉及一种转氨酶高活性突变体。本发明公开了一种S型ω‑转氨酶高活性的突变体，其氨基酸序列为基于但不同于SEQ ID NO:1，并且与SEQ ID NO:1相比，所述突变体中的残基差异是25位的谷...
- 王继国王华磊刘清海魏东芝
- 文献传递
- 重组人甲状旁腺激素1－84的制备方法
- 本发明公开了一种利用基因工程技术制备重组人甲状旁腺激素1－84的方法。采用大肠杆菌偏爱密码子，本发明设计合成了rhPTH 1－84的编码序列并构建了载体和工程菌。本发明以可溶形式在大肠杆菌胞质中高效表达含hPTH 1－8...
- 刘清海陶欣艺熊玉春刘美云宋庆训马兴元杨忠童望宇魏东芝
- 文献传递
- 末端连接ω-氨基酸的聚乙二醇修饰剂的制备被引量：1
- 2007年
- 提出了一种新型聚乙二醇(PEG)修饰剂的合成方法。首先以两种ω-氨基酸和单甲氧基PEG为主要原料,经连接、纯化和水解等步骤,得到末端以酰胺键连接ω-氨基酸的PEG酸,再将得到的PEG酸用N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)进行活化,得到聚乙二醇-β-丙氨酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯(PEG-BPA-NHS)和聚乙二醇-γ-氨基丁酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯(PEG-GABA-NHS),总收率为60%。这类新的修饰剂经验证具有较长的水解半衰期(分别为7.6 min和16.7 min)和良好的蛋白修饰能力。
- 熊玉春刘清海何明磊魏东芝
- 关键词：聚乙二醇聚乙二醇修饰活化
- 生产抗癌药物TAT(m)－Survivin(T34A)的工程菌的发酵放大工艺
- 本发明提供了生产抗癌药物TAT(m)－Survivin(T34A)的工程菌的发酵放大工艺，该工艺包括以下步骤：A)将种子液接种于发酵液中发酵，温度35－38℃，pH6.5－7.5，通气量2－5ml/min，生长期溶解氧浓...
- 魏东芝马兴元张海毅姚雪凌王恒伟李明华郑文云赵莉刘清海
- 文献传递
- 微生物转化在米格列醇合成中的应用
- 1米格列醇的介绍糖尿病是最为常见的一种内分泌代谢失调引起的疾病,主要分为Ⅰ型糖尿病(胰岛素依赖性糖尿病,IDD)和Ⅱ型糖尿病(非胰岛素依赖性糖尿病,NIDD)。随着人民生活水平的提高和营养结构的改善,糖尿病作为慢性非传染...
- 林金萍粟武刘清海高克亮魏东芝
- 关键词：米格列醇降糖效果微生物转化
- 文献传递
- 定向转化多元醇的细胞催化剂创制及其应用关键技术
- 魏东芝林金萍刘清海陶欣艺王风清赵莉王华磊王学东孙爱友马昱澍任宇红毛相朝刘旭杨雪鹏韦柳静
- 该项目技术属于生物化工领域，列入国家863计划、上海市科技攻关计划等资助计划。鉴于以化学催化为核心的基础物质加工业面临资源、能源和环境三大危机，生物催化已成为化学工业可持续发展的重要支撑技术。生物质基多元醇作为一种结构多...
- 关键词：
- 关键词：生物催化
- 重组HIV-TATm-Survivin(T34A)蛋白制备及其促癌细胞凋亡活性研究被引量：3
- 2006年
- 从人乳腺癌细胞系B-Cap-37中克隆出Survivin的cDNA,并对其中编码34位Thr的密码子定点突变为Ala的密码子后,经一系列基因操作方法将天然HIV-TAT转导肽的突变体基因HIV-TATm引入Survivin(T34A)基因的5′端,正确构建了表达载体pRSET-B-HIV-TATm-Survivin(T34A),经转化E.coliBL21(DE3)后诱导表达,目的蛋白质以包涵体形式表达,占菌体总蛋白的45%。经3.7L发酵罐分批发酵可收获650mg/L的包涵体,经阳离子交换、凝胶层析分离和柱上复性与透析,得到纯度达96%以上的可溶性目的蛋白HIV-TATm-Survivin(T34A)。目的蛋白对人乳腺癌细胞B-Cap-37、人胰腺癌细胞SW1990和人肝癌细胞SSMC-7721作用4h后有在细胞形态上呈现出显著的凋亡特征,而对人宫颈癌细胞系Hela不敏感,对正常的人内皮细胞系EVC-304未见明显影响。作用24h时MTT法检测显示,120μg/mL目的蛋白对SW1990、B-Cap-37、SSMC-7721和Hela细胞的抑制率分别达到89%、63%、59.5%和39%,且具有剂量依赖性。对最为敏感的SW1990和B-Cap-37以每孔60μg/mL终浓度的目的蛋白作用48h的流式细胞技术检测发现,凋亡率分别为25.6%和19.3%,与对照相比,实验组细胞出现明显的凋亡峰,细胞周期的分布发生明显的变化,65%以上的癌细胞被阻滞于G1期。体外实验结果显示重组目的蛋白具有较强的抑制癌细胞增殖和促进凋亡作用,预示着良好的抗癌前景。
- 郑文云马兴元魏东芝王锦之刘清海马昱澍杨胜利
- 关键词：表达纯化
