刘俊宁 作品数:19 被引量:65 H指数:5 供职机构: 福建中医药大学骨伤学院 更多>> 发文基金: 福建省自然科学基金 国家自然科学基金 福建省教育厅资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
两种人骨肉瘤U20S细胞阿霉素耐药株的比较 被引量:1 2012年 目的研究不同方式建立的人骨肉瘤U20S细胞阿霉素耐药株的生物学特性及其耐药机制。方法采用大剂量间隙作用、浓度梯度递增间隙作用建立U20S阿霉素耐药株U20S/ADM1,U20S/ADM2,光镜及透射电镜下观察细胞形态变化;MTT法测定其耐药指数、药物敏感性,绘制生长曲线计算倍增时间;罗丹明外排实验检测P-糖蛋白(P-gP)泵功能;RT-PCR检测多药耐药基因1(MDR1)mRNA、多药耐药相关蛋白1(MRP1)mR-NA的表达。结果U20S/ADMl,U20S/ADM2的耐药指数分别为79.63和91.06,对紫杉醇、顺铂有交叉耐药;细胞倍增时间延长(P〈0.01);耐药株细胞线粒体丰富,粗面内质网及游离核糖体增多;细胞内罗丹明蓄积量低于亲本细胞(P〈0.01),两种耐药株之间无明显差异(P〉0.05);MDR1mRNA,MRP1mRNA表达均高于亲本细胞(P〈0.05),MDRlmRNA表达两种耐药株问无明显差异(P〉0.05),U20S/ADM1的MRP1mRNA表达低于U20S/ADM2(P〈0.05)。结论两种耐药株均可产生MDR,耐药机制可能与MDR1,MRP1过表达有关;不同建立方式存在一定差异,浓度梯度递增间隙作用方式更容易产生耐药。 张燕 刘俊宁 王琪鸿 刘宇 张俐关键词:骨肉瘤 阿霉素 多药耐药 以培养自主学习能力为目标的教学方法探讨 被引量:3 2011年 医学教育是一个终身学习的过程,在医学课堂教学过程中,注重通过多种教学方法和教学手段的应用,使学生掌握科学的学习方法,培养学生主动获取知识,不断充实自己的终身学习能力,为提高临床能力奠定基础。 张燕 牛素生 刘俊宁关键词:自主学习能力 教学方法 中医骨伤特色模块临床技能实训课的探索 被引量:2 2017年 中医骨伤科临床技能实训课程是中医骨伤专业的特色必修课程,是中医骨伤学生从理论学习过渡到临床实践的重要环节。中医骨伤技能实训课程的开设可使学生在掌握理论知识的基础上提高临床思维能力和临床操作能力。中医骨伤特色模块为福建中医药大学新开设的选修模块,这一新的学生群体中医骨伤专业基础知识理论水平优于非中医骨伤专业学生,但略逊于中医骨伤科学专业学生。因此,如何构建新的、有针对性的教学措施和质量考核办法值得在教学和考核过程中探索和思考。 刘俊宁 李楠 高弘建关键词:中医骨伤 教学改革 片仔癀与阿霉素联用对骨肉瘤耐药细胞增殖和凋亡的影响 被引量:15 2015年 目的:探讨片仔癀与阿霉素(ADM)联用对骨肉瘤耐药细胞U2OS/ADM增殖及凋亡的影响。方法:不同浓度片仔癀干预骨肉瘤U2OS细胞和其耐药细胞U2OS/ADM,筛选出无细胞毒作用的片仔癀浓度为联用浓度。ADM、片仔癀与ADM联用干预U2OS/ADM细胞,MTT法检测细胞增殖情况;Annexin V-FITC/PI双染FCM检测细胞凋亡;RT-PCR检测Bcl-2、Bax的表达。结果:U2OS细胞和U2OS/ADM2细胞对片仔癀的IC50无统计学差异,U2OS/ADM细胞对片仔癀无交叉耐药;U2OS/ADM细胞对ADM的IC50为(14.57±0.15)μg/m L,片仔癀与ADM联用后其对ADM的IC50为(6.75±0.29)μg/m L,逆转指数为2.16;联用组细胞凋亡率较ADM组显著增加(P<0.05);联用组Bcl-2表达下降(P<0.05),Bax表达上调(P<0.05)。结论:片仔癀与ADM联用可提高U2OS/ADM细胞对ADM的敏感性,促进U2OS/ADM细胞凋亡,其机制与改变Bcl-2/Bax的比例有关。 张燕 王琪鸿 牛素生 刘俊宁 张俐关键词:片仔癀 阿霉素 骨肉瘤 耐药细胞 龟鹿二仙胶对去卵巢大鼠骨显微结构的影响及机制 目的 通过观察龟鹿二仙胶对去卵巢大鼠股骨骨显微结构的影响及骨代谢指标的变化,探讨龟鹿二仙胶对去卵巢大鼠骨显微结构的影响及作用机制.方法36只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雷奈酸锶组、龟鹿二仙胶低剂量组(低剂量... 牛素生 李楠 张燕 刘俊宁 林建华龟鹿二仙胶含药血清诱导大鼠骨髓基质干细胞成骨分化的作用及机制 被引量:9 2015年 目的观察龟鹿二仙胶含药血清诱导大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)成骨分化的作用并探讨其机制。方法全骨髓贴壁法分离BMSCs,培养至F3代。MTT法检测龟鹿二仙胶含药血清增殖作用并确定最佳浓度;F3细胞分为10%FBS组、10%KB组、10%GLEXJ组和Classical组,检测碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)比活性,茜素红染色方法观察对BMSCs成骨分化的作用,RT-PCR方法和Western blot检测Fzd-2、Axin-2基因和蛋白表达的变化。结果 MTT结果显示浓度为10%的龟鹿二仙胶含药血清能促进BMSCs增殖;10%GLEXJ组和Classical组ALP比活性高于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05);且随着时间的延长,增加更明显(P<0.05或P<0.01),茜素红染色见橘红色钙结节着色;10%GLEXJ组Fzd-2 m RNA和蛋白表达水平显著高于其余各组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);10%GLEXJ组Axin-2 m RNA和蛋白表达水平显著低于10%FBS组和10%KB组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论龟鹿二仙胶含药血清能促进BMSCs增殖并诱导其向成骨细胞分化,其机制可能与增强Fzd-2表达、抑制Axin-2表达和激活Wnt/β-catenin通路密切相关。 牛素生 李楠 张燕 刘俊宁 林建华关键词:龟鹿二仙胶 骨质疏松症 骨髓基质干细胞 成骨分化 龟鹿二仙胶对去卵巢大鼠骨显微结构的影响 被引量:5 2015年 目的:观察龟鹿二仙胶对去卵巢大鼠骨显微结构的影响并探讨其机制。方法:36只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雷奈酸锶组,龟鹿二仙胶高剂量组、中剂量组、低剂量组,除假手术组外,其余均切除双侧卵巢,干预12周后检测血清雌二醇(E2)、血清骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)、左侧股骨骨密度(BMD)、最大载荷,右股骨髁部平均骨小梁面积(%Tb.Ar)、平均骨小梁宽度(Tb.Th)、平均骨小梁分离度(Tb.Sp)以及骨小梁数目(Tb.N)。结果:①龟鹿二仙胶各组血清E2、BALP水平、股骨骨密度、最大载荷显著高于模型组(P<0.05,P<0.01),中剂量组TRACP-5b水平显著降低(P<0.05);②龟鹿二仙胶中剂量组Tb.Ar、Tb.Th显著高于模型组(P<0.05),各剂量组Tb.Sp显著低于模型组(P<0.05);中、高剂量组Tb.N较模型组高(P<0.05)。结论:龟鹿二仙胶能调节去卵巢大鼠激素水平,具有促进骨形成和抑制骨吸收双重作用,能显著改善去卵巢大鼠骨显微结构,提高骨密度,增强骨强度。 牛素生 林建华 李楠 张燕 刘俊宁关键词:骨质疏松症 龟鹿二仙胶 去卵巢大鼠 骨肉瘤化疗耐药机制及逆转治疗的研究进展 被引量:1 2012年 骨肉瘤是常见的骨源性恶性肿瘤,化疗是其重要的治疗手段,但肿瘤耐药性的存在,成为骨肉瘤复发和治疗失败的重要原因。明确其耐药机制,有效预防或逆转骨肉瘤耐药是目前临床亟待解决的问题。本文将对骨肉瘤耐药机制及其逆转策略的研究进展作一综述。 张燕 张俐 牛素生 刘俊宁关键词:骨肉瘤 耐药机制 逆转 片仔癀诱导骨肉瘤U2OS细胞凋亡与线粒体膜电位的关系 被引量:5 2014年 目的:探讨片仔癀诱导骨肉瘤U2OS细胞凋亡与线粒体跨膜电位(Δψm)的关系。方法:采用不同浓度的片仔癀(0.8、1.2、1.6mg/mL)作用U2OS细胞后,Hoechst 33258染色镜下观察、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡情况;JC-1染色流式细胞仪检测线粒体跨膜电位;分光光度法检测Caspase-9、Caspase-3活性;Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:随剂量的增加,片仔癀可明显诱导骨肉瘤U2OS细胞凋亡、降低细胞线粒体膜电位,增加Caspase-9、Caspase-3活性,各干预组与阴性对照组比较均有明显差异(P<0.05,P<0.01),Western blot检测结果表明Bcl-2蛋白表达下降,而Bax蛋白表达上调。结论:片仔癀可降低细胞线粒体跨膜电位,改变线粒体通透性,促使骨肉瘤细胞凋亡。 张燕 王琪鸿 牛素生 刘俊宁 张俐关键词:片仔癀 骨肉瘤 线粒体膜电位 凋亡 龟鹿二仙胶对去卵巢大鼠骨显微结构的影响及机制 目的 观察龟鹿二仙胶对去卵巢大鼠骨显微结构的影响并探讨其作用机制.方法 36只SD大鼠随机分为假手术组(S)、模型组(Ovx)、雷奈酸锶组(SrR)、龟鹿二仙胶高剂量组(GH)、龟鹿二仙胶中剂量组(GM)、龟鹿二仙胶低剂... 牛素生 林建华 李楠 张燕 刘俊宁关键词:骨质疏松症 龟鹿二仙胶 去卵巢大鼠