黄晓明
- 作品数：4 被引量：24H指数：2
- 供职机构：东南大学医学院更多>>
- 发文基金：铁道部科技基金国家自然科学基金镇江市科技支撑计划(社会发展)项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细胞周期蛋白D1特异性核酶表达载体的构建及其活性
- 2007年
- 应用mfold程序对锤头状核酶(ribozyme,Rz)和大鼠细胞周期蛋白(cyclin)D1基因的二级结构进行分析,设计合成锤头状Rz基因,通过RT-PCR扩增获得大鼠细胞周期蛋白D1目的基因,将Rz基因和细胞周期蛋白D1基因分别克隆入载体pGEM-3Zf(+)中,体外转录Rz基因和靶基因并进行切割实验;将Rz基因与逆转录病毒载体pLXSN重组得到Rz真核表达载体pLXSN-Rz,将其转染入HSC-T6细胞,G418筛选出阳性细胞克隆,用RT-PCR检测细胞周期蛋白D1基因的表达。结果显示:针对目的基因的832位点设计合成了Rz832,成功获得Rz832基因、细胞周期蛋白D1mRNA的体外转录载体pGEM3Zf-Rz832和pGEM3Zf-cD1,经体外转录出Rz832(105nt)及细胞周期蛋白D1mRNA(1079nt)。体外切割实验证实Rz832能够特异性切割细胞周期蛋白D1mRNA,产生1014nt和65nt的切割产物,切割效率为80%。所构建的pLXSN-Rz832经酶切电泳、PCR鉴定显示,插入的Rz832序列大小约为57bp,与预期结果相同,经测序证实Rz832序列正确。转染pLXSN-Rz832的肝星状细胞(hepaticstellatecells,HSCs)细胞周期蛋白D1mRNA的表达受到明显抑制,仅为对照组的42.22%(t=-193.443,P<0.01),结果表明:Rz832能够在体外特异性切割细胞周期蛋白D1mRNA、并在HSC-T6细胞内有效抑制细胞周期蛋白D1基因的表达。
- 夏金荣黄晓明刘乃丰胡向阳
- 关键词：核酶细胞周期蛋白D1体外转录
- 新生儿缺氧缺血性脑病模型鼠脑皮质、海马细胞凋亡的研究被引量：18
- 2001年
- 目的 证实和比较新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE)发病过程中皮质、海马神经元凋亡的现象和差异。方法 通过HIE动物模型 ,应用原位末端标记技术 (TUNEL)、电镜对皮质、海马细胞凋亡出现时间和强度进行了对应比较。结果 电镜下显示核膜皱缩、染色质边集 ;原位末端标记显现阳性着色细胞。经计量分析发现皮质和海马出现凋亡高峰时间不一致 ,皮质 18h点、海马 40h点凋亡最明显。结论 证实了HIE中神经细胞凋亡的存在 ;皮质、海马对缺氧缺血的反应有时间和程度的差异。
- 蒋犁汤云珍丁艳洁黄晓明陈平圣
- 关键词：缺氧缺血性脑病脑皮质海马细胞凋亡新生儿
- 抗人S100A4单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用被引量：1
- 2009年
- 目的:制备抗人S100A4单克隆抗体(mAb),建立检测肿瘤样品中S100A4蛋白的可靠方法。方法:采用标准杂交瘤技术得到抗重组人S100A4的mAb。以ELISA、Western blot和免疫组织化学法对抗体进行鉴定。并将抗体应用于临床人乳癌和结肠癌样品的免疫组织化学检测。结果:获得了1株稳定分泌抗人S100A4蛋白mAb的杂交瘤细胞株D101。在免疫印迹实验中,该mAb较多抗特异性更好。该mAb适用于来源于人组织的样品S100A4表达的检测,在少量乳癌和结肠癌样品的检测中给出的结果与商品化多抗的结果一致。结论:该mAb是S100A4特异的,在临床应用中有更好的重复性。
- 胡向阳黄晓明张南何道伟叶银英
- 关键词：S100A4MAB肿瘤标志
- 高度糖基化终产物对大鼠主动脉平滑肌细胞G-蛋白亚基基因表达的影响被引量：5
- 2004年
- 目的 :研究高度糖基化终产物 (AGEs)对G 蛋白亚基基因表达的影响 ,了解G 蛋白在AGEs介导的胞内信号转导途径中的作用。方法 :利用半定量RT PCR技术分析大鼠主动脉平滑肌细胞受AGEs作用后G 蛋白亚基Goα、GsαmRNA的改变。结果 :AGEs在大鼠主动脉平滑肌细胞中上调Gsα的表达 ,但却使GoαmRNA水平显著下降。结论 :G
- 胡向阳黄晓明刘乃丰金辉
- 关键词：主动脉平滑肌细胞基因表达细胞培养信号转导途径
