纪军
- 作品数：28 被引量：91H指数：6
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- 活性巨噬细胞移植促进脊髓损伤后功能恢复的实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的 探讨活性巨噬细胞移植对脊髓损伤修复的促进作用.方法 用改良Allen法制成大鼠脊髓损伤模型.随机分成对照组(A组),脊髓内微量注射生理盐水20μl;活性巨噬细胞移植组(B组),脊髓内注射活性巨噬细胞悬液20μl.移植后7、14、28 d采用斜板试验、脊髓运动功能BBB(Basse,Beattie and Bresnahan)评分法观察大鼠运动功能恢复情况,脊髓诱发电位检测观察神经功能恢复,HE染色观察脊髓损伤处空洞面积的改变情况,免疫组化法观察移植的活性巨噬细胞的存活情况及损伤部位神经纤维的再生情况.结果 术后28 d,两组斜板倾斜角度差异有统计学意义(A组44.96°±5.70°,B组52.72°±6.51°,P＜0.05);两组BBB评分差异有统计学意义(A组6.8±1.2,B组11.8±2.2,P＜0.05).同时,两组MEP潜伏期差异也有统计学意义[A组(4.69±0.47)mg,B组(3.62±1.29)ms,P＜0.05],两组SEP潜伏期差异有统计学意义[A组(4.19±1.97)ms,B组(2.01±0.55)ms,P＜0.05].两组神经轴突计数差异有统计学意义[A组(32.8±6.1)条/mm2,B组(40.8±9.0)条//mm2 P＜0.05].实验组可见损伤区巨噬细胞存在,脊髓损伤处空洞面积减小,有明显神经纤维再生.结论 活性巨噬细胞可在脊髓损伤处存活并减轻脊髓损伤,减小脊髓损伤处空洞面积,促进受损轴突的再生和运动功能的恢复.
- 任长乐吕德成纪军赵俊君
- 关键词：脊髓损伤巨噬细胞
- 大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、纯化和鉴定被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)分离、培养及鉴定的方法。方法:采用Dobbs法提取ATⅡ。肺动脉灌洗减少肺内红细胞,气管灌洗除去肺泡腔内的白细胞,将胰蛋白酶、胶原酶灌入肺内消化分离细胞;采用免疫贴附法纯化细胞,将细胞悬液培养于覆被IgG的平皿中,有Fc段受体的细胞被黏附,而无Fc段受体的ATⅡ得以纯化。ATⅡ的鉴定采用电镜和肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)免疫组化染色,其在电镜下有特征性板层小体,免疫组化染色见胞浆有SP-A表达。结果:纯化后台盼蓝染色显示细胞活力为95%以上。通过SP-A免疫组化染色判定,纯化后ATⅡ纯度可达92%。结论:分离、纯化大鼠ATⅡ时,合适的胰蛋白酶浓度及作用时间对细胞活性有重要作用,大鼠IgG黏附纯化可以得到高纯度的ATⅡ,通过电子镜观察板层小体和免疫组化染色检测细胞SP-A表达可用于鉴定ATⅡ。
- 张雪梅陈海龙王朝晖张利纪军
- 关键词：肺表面活性物质相关蛋白A细胞培养
- 不同胆汁酸诱导AR42J细胞凋亡与坏死的作用被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨7种不同胆汁酸对AR42J胰腺腺泡细胞的损伤作用,检测在各种胆汁酸作用下胰腺腺泡细胞的存活率和凋亡/坏死的改变.方法:以大鼠AR42J胰腺腺泡细胞系为研究对象,应用MTT法检测7种不同胆汁酸对细胞存活率的影响和剂量与时间依赖性,采用光学显微镜和荧光显微镜观察细胞形态学改变与凋亡/坏死的变化,流式细胞术AV/PI双染法检测细胞的凋亡/坏死率.结果:CA,GCA和GDCA在0.1-1.0mmol/L内对AR42J细胞不具有损伤作用;而DCACDCA和LCA分别从0.3mmol/L开始,TDCA从0.4mmol/L开始,呈剂量依赖性对AR42J细胞产生损伤作用.0.8mmol/LCA组细胞凋亡率与坏死率同CON组无明显区别(1.2%vs0.9%;1.0%vs1.0%,均P>0.05);0.4mmol/LDCA组细胞凋亡率和坏死率分别为45.2%和8.9%;0.8mmol/LDCA组细胞凋亡率和坏死率分别为18.6%和45.4%.
- 张桂信陈海龙纪军张利吴圆圆王永鹏尚东
- 不同的风湿免疫性疾病患者免疫功能差异分析被引量：5
- 2020年
- 目的探讨分析不同风湿免疫性疾病患者的免疫功能差异。方法选取2016年1月至2017年9月大连市中心医院风湿免疫病房收治的类风湿性关节炎(RA)、强直性脊柱炎(AS)、骨关节炎(OA)和痛风性关节炎(AG)患者62例为研究对象,另选取同期25例健康人作为对照组。比较不同风湿免疫性疾病患者外周血T淋巴细胞亚群、Treg细胞数量和PD-1表达的差异。结果与对照组比较,RA、AS、AG组患者CD4^+T细胞明显升高,CD8^+T细胞所有组均明显下降,所有组CD4^+/CD8^+比值与对照组比较均明显升高。发现Treg细胞在每组中变化也不同,与对照组比较,RA组患者Treg细胞没有变化,AS、OA、AG组患者Treg细胞明显升高。还检测了CD4^+T细胞和CD8^+T细胞上PD-1的表达。与对照组比较,AS组和OA组CD4^+T细胞上PD-1表达明显升高,而RA组和AG组无明显变化,而每一组患者CD8^+T细胞上PD-1表达均出现明显降低。结论不同风湿免疫性疾病的免疫病理损伤及组织器官类型不一样,其自身免疫特点也不尽相同,但共同点为免疫功能紊乱,不同的风湿免疫性疾病中T淋巴细胞亚群、Treg和PD-1均存在明显的不同,免疫调节异常是风湿免疫性疾病发生发展的重要因素。
- 潘艳艳吴园园蔡红娇纪军张利
- 关键词：风湿免疫性疾病PD-1TREG淋巴细胞亚群
- 右旋柠檬烯诱导人白血病细胞凋亡作用机制的初步研究被引量：9
- 2008年
- 目的:探讨右旋柠檬烯(d-limonene)诱导人白血病细胞凋亡的作用机制。方法:以人白血病细胞株K562和HL-60为研究对象,采用MTT法及锥虫蓝染色法检测d-limonene对细胞增殖的影响,AnnexinⅤ/PI双重染色法检测其对细胞凋亡的影响,Western印迹法检测线粒体凋亡途径相关蛋白的表达。结果:d-Limonene作用后K562、HL-60细胞凋亡率呈时间及剂量相关性增加;且处理组Bcl-2/Bax比值下降,细胞质中细胞色素c表达增高,caspase-9表达以及caspase-3分裂明显增高。结论:d-limonene能够诱导人白血病细胞凋亡,线粒体凋亡途径的激活可能是其凋亡诱导的主要机制。
- 杨真纪军刁凤声
- 关键词：白血病柠檬烯细胞凋亡线粒体蛋白质类
- 成人自体心肌干细胞体外高效扩增及特异性鉴定
- 2012年
- [目的]建立一种稳定、高效的成人自体心肌干细胞体外培养扩增及特异性鉴定方法。[方法]手术中取下的心脏组织标本,通过胶原酶消化的方法获得细胞,使用自体血清进行贴壁培养和传代的方法纯化细胞,细胞增殖至3代后进行RT-PCR基因表达检测,流式细胞表面标记检测及染色体核型分析的鉴定。[结果]通过本实验的方法可以在成人心肌组织中分离和纯化心肌干细胞,并在体外可大量增殖,至3代细胞可增殖至5×107。RT-PCR鉴定其具有全能干细胞因子Nanog、Oct-4、Sox-2、Rex-1的mRNA表达,及心肌转录因子Nkx2.5和GATA4的mRNA和蛋白表达;表达间质干细胞表面标记CD29、CD90、CD105;不表达造血干细胞表面标记CD45和人免疫抗原HLA-DR;且培养后46条染色体无移位和缺失等染色体突变。[结论]通过本研究确立了一种稳定、高效的成人自体心肌干细胞体外培养,扩增和特异性鉴定的方法,为自体心肌干细胞移植技术的临床应用奠定重要的基础。
- 纪军张利桑丽敏林海龙何学志吴园园颜培实孙喜琢
- 关键词：自体组织心肌干细胞流式细胞术核型分析
- 地塞米松对重症急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响被引量：8
- 2012年
- 目的研究地塞米松对重症急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡凋亡的作用。方法通过胆胰管注入脱氧胆酸钠制备重症急性胰腺炎大鼠模型,设立对照组、模型组和地塞米松治疗组。显微镜观察并进行胰腺组织病理学评分;TUNEL方法测定胰腺腺泡细胞凋亡指数;RT-PCR技术检测胰腺组织Bax与Caspase-8 mRNA水平表达;免疫组织化学检测Bax与Caspase-8蛋白水平的表达。结果同模型组比较,地塞米松组大鼠胰腺组织病理损伤明显减轻;腺泡细胞凋亡指数显著升高[(11.10±2.42)vs(6.50±1.58),P<0.05];Bax mRNA与Bax蛋白水平显著升高分别为[(1.370±0.297)vs(1.046±0.337),P<0.05;(457.20±36.56)vs(339.40±26.73),P<0.05]。结论地塞米松可上调促凋亡基因Bax表达而诱导腺泡细胞凋亡,使胰腺组织病理学改变减轻,改善了病情。
- 张桂信陈海龙纪军张利尚东
- 关键词：地塞米松重症急性胰腺炎
- 右旋柠烯通过线粒体途径诱导人白血病细胞凋亡
- 目的:研究右旋柠烯(d-limonene)诱导人白血病细胞凋亡的作用机制。
方法:以人白血病细胞株K562和HL-60细胞为研究对象,采用Hoechst荧光和Annexin V/PI双重染色法检测对细胞凋亡的影响,...
- 纪军
- 关键词：右旋柠烯白血病细胞细胞凋亡线粒体凋亡途径
- PTEN基因的克隆及其在HepG2细胞中的表达被引量：2
- 2006年
- 目的克隆人抑癌基因PTEN全长cDNA,构建其真核表达载体并检测其在人肝癌细胞HepG2中的表达。方法采用RT-PCR法从人正常肝组织中扩增PTEN全长cDNA,将之与pMD18-T Simple Vector连接、测序,获得PTEN基因。将该基因与pcDNA3·1(+)载体连接,构建pcDNA3.1-PTEN真核表达载体。用该载体转染HepG2细胞,RT-PCR检测PTEN的表达。结果酶切和测序证实PTEN基因克隆和真核表达载体构建成功。HepG2-PTEN细胞中PTEN mRNA的表达显著高于未转染的HepG2细胞。结论人抑癌基因PTEN在人肝癌细胞系HepG2细胞中能够高效、稳定地表达,为其在肝癌基因治疗研究中的应用奠定了基础。
- 吴园园张利肖继贤朱晓钰纪军孙喜琢张众
- 关键词：肿瘤抑制基因PTEN基因分子克隆真核表达载体
- 传染性单核细胞增多症和传染性单核细胞综合征患儿PD-1以及Tregs差异比较被引量：2
- 2021年
- 目的探讨传染性单核细胞增多症(IM)患儿和传染性单核细胞综合征(IMS)患儿程序性死亡受体1(PD-1)以及调节性T细胞(Tregs)的差异。方法选择2016年1月至2019年9月大连市中心医院儿科收治的IM患儿40例与IMS患儿40例为观察对象。IMS组男24例,女16例,年龄(5.11±4.07)岁;IM组男22例,女18例,年龄(8.33±5.32)岁。流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群百分数、Tregs细胞百分数以及CD4^(+)T和CD8^(+)T细胞PD-1的表达水平。希森美康XE-2100进行外周血细胞分类检测,用奥林巴斯显微镜进行异型淋巴细胞计数,采用散射比浊法检测血清免疫球蛋白G(IgG)、IgM、IgA,补体C3和C4水平。结果IM组外周血CD3^(+)CD8^(+)T细胞百分数、CD3^(+)T细胞百分数、CD8^(+)PD-1^(+)细胞百分数、PD-1^(+)细胞百分数、白细胞计数[(17.83±8.81)比(7.81±4.82)×10^(9)/L]、淋巴细胞百分数[(63.49±15.61)%比(44.21±13.80)%]、淋巴细胞绝对值[(10.29±2.91)比(3.28±1.63)×10^(9)/L]、异型淋巴细胞百分数[(19.23±11.24)%比(0.78±0.90)%]、抗体水平[IgG:(1314.86±408.14)比(874.46±222.10)mg/dl,IgA:(206.53±81.31)比(10^(9).24±73.26)mg/dl]都较IMS组明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);而CD3^(+)CD4^(+)T细胞、Tregs细胞百分数和补体水平[补体C3:(85.52±8.53)比(103.85±13.01)mg/dl;补体C4:(20.84±1.31)比(28.36±6.81)mg/dl]较IMS组明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论IM患儿较IMS患儿免疫细胞PD-1的表达明显增高,Tregs明显下降,为临床鉴别诊断以及疾病治疗提供依据。
- 吴园园潘艳艳蔡红娇纪军张利
- 关键词：传染性单核细胞增多症免疫功能TREGSPD-1
