邓穗燕 作品数:14 被引量:36 H指数:4 供职机构: 广州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广州市医药卫生科技项目 广东省医学科学技术研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
丝状真菌MALDI-TOF MS鉴定中三种样品前处理方法比较 被引量:4 2020年 目的探讨适用于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)鉴定丝状真菌的样本预处理方法。方法分别使用甲酸萃取法、液氮研磨法、液氮研磨和甲酸萃取相结合三种方法对35株丝状真菌进行破壁,用牛鲍计数板进行破壁率计算,采用单因素方差分析(F检验)比较三种方法的破壁率;MALDI-TOF MS分别测定三种方法预处理的样本,采用卡方检验(χ^2检验)分析比较三种方法的鉴定效果。结果在普通光学显微镜下,经液氮研磨的丝状真菌可见大量被碾碎的孢子和菌丝渣子,背景浑浊不清,偶见完整孢子;液氮研磨法和(液氮研磨+甲酸萃取法)的破壁率分别为(0.86±0.06)和(0.84±0.06),均高于甲酸萃取法(均P<0.001)。以(形态学+分子生物学鉴定)为金标准,经质谱鉴定,将35株丝状真菌鉴定到种和属的鉴定率:液氮研磨法为71%和14%,甲酸萃取法为54%和23%,(液氮研磨+甲酸萃)取法为86%和8%;(液氮研磨+甲酸萃取法种的鉴定效果优于甲酸萃取法,差异有统计学意义(χ^2=8.231,P=0.016),而液氮研磨法与甲酸萃取法和(液氮研磨+甲酸萃取法)在种的鉴定率上均无统计学差异(其χ^2=2.203和χ^2=2.121,P=0.214和P=0.192。)。结论液氮研磨破壁效果好,(液氮研磨+甲酸萃取法)是质谱鉴定丝状真菌良好的样本预处理方法,值得临床推广应用。 邓穗燕 郭旭光 郭旭光 唐晓华 林丽英关键词:液氮 破壁 丝状真菌 质谱 替加环素联合亚胺培南对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性研究 被引量:6 2016年 目的探讨替加环素(tigecyclin)联合亚胺培南对多重耐药鲍曼不动杆菌体外抗菌的效果,探索多药联合应用对多重耐药鲍曼不动杆菌的临床用药新途径。方法收集临床分离的40株多重耐药鲍曼不动杆菌,采用微量肉汤稀释法、棋盘法分别检测替加环素、亚胺培南单独及联合使用的最低抑菌浓度(MIC),计算药物联合使用抑菌浓度(FIC)指数,利用FIC指数判定替加环素和亚胺培南联用时对多重耐药鲍曼不动杆菌体外抗菌的效果。结果替加环素联合亚胺培南能显著降低各自的MIC值,其中表现为协同作用的菌株占70.00%,表现为相加作用的菌株占25.00%,发生无关作用的占5.00%,无拮抗作用发生。结论替加环素联合亚胺培南可对多重耐药鲍曼不动杆菌的感染进行治疗。 单靖岚 郑贵星 邓穗燕 黄俊关键词:替加环素 亚胺培南 多重耐药 鲍曼不动杆菌 粒细胞集落刺激因子对中性粒细胞碱性磷酸酶及形态学改变的分析 被引量:1 2009年 目的探讨粒细胞集落刺激因子(granu1ocyte colony—stimulating factor,G-CSF)对中性粒细胞碱性磷酸酶(neutrophilic alkaline phosphatase,NAP)及形态学的作用。方法选择化疗中使用G-CSF无合并感染的肿瘤患者为G-CSF组,具有细菌感染阳性指征的患者为感染组,另外选择100例正常体检者作为对照组。分别对三组的血涂片进行NAP染色,并作阳性率、积分计数,NAP阳性指数行单因素方差分析实现两两比对分析,同时对三组进行瑞氏染色观察中性粒细胞形态。结果100例体检者NAP阳性指数95%的医学参考区间为13~127。G-CSF组、感染组和对照组的NAP阳性积分分别为290±56、245±55和68±27,三组经单因素方差分析,两两间比较差异均有统计学意义(P<0.01);阳性率分别为(95%±5%)、(89%±8%)和(51%±18%),两两之间比较差异均有统计学意义(P<0.01)。形态学方面,感染组与对照组差异不明显,感染组、对照组分别与G-CSF组的差异较为明显。结论G-CSF可致中性粒细胞NAP阳性率、积分明显升高,并且明显高于感染所致NAP阳性率和积分的升高。在形态上,G-CSF可使中性粒细胞胞浆颗粒明显增多增粗,同时易见空泡变性及幼稚中性粒细胞。 魏小平 徐霞 邓穗燕 邓小燕关键词:粒细胞集落刺激因子 中性粒细胞碱性磷酸酶 中性粒细胞 快速检测洋葱伯克霍尔德菌巢式荧光定量PCR法建立 被引量:2 2020年 目的建立能直接快速应用于临床检测洋葱伯克霍尔德菌的巢式荧光定量PCR法。方法根据洋葱伯克霍尔德菌recA基因序列设计用于普通PCR扩增的外引物,同时设计用于荧光定量PCR的内引物。分别以洋葱伯克霍尔德菌等细菌的标准株为模板,以外引物进行第一轮PCR扩增;所得PCR产物为模板,以内引物进行染料法荧光定量PCR检测recA基因表达水平,评估巢式荧光定量PCR法的特异性。同时将洋葱伯克霍尔德菌的菌液和基因组DNA进行浓度梯度稀释,继续进行巢式荧光定量PCR,确定此方法的灵敏度。最后用巢式荧光定量PCR法和Vitek 2 Compact仪器分别鉴定35例临床标本,比较两者的检出能力。结果巢式荧光定量PCR法只针对洋葱伯克霍尔德菌有扩增曲线,而对其他菌株无检测信号。同时,巢式荧光定量PCR法的检测下限是1×10^1 CFU/mL的菌液和1×10^⁃5 ng/μL的基因组DNA,具有较高的灵敏度。巢式荧光定量PCR法能有效检测出14例临床标本存在洋葱伯克霍尔德菌感染(检出率为40.0%),而Vitek 2 Compact仪器仅检测出10例(检出率为28.6%),其中4例无法识别。结论巢式荧光定量PCR法具有有效、快速和直接应用于临床检测的优点,并且特异、灵敏和准确等特点,值得在临床推广。 林丽英 邓穗燕 郭旭光关键词:洋葱伯克霍尔德菌 RECA基因 MALDI-TOF MS自建库在红色毛癣菌感染中的临床快速诊断价值 被引量:6 2020年 目的建立并评价实验室自建的红色毛癣菌基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)数据库的可行性。方法将红色毛癣菌标准菌株ATCC 28188用沙保罗葡萄糖琼脂(SDA)平板28℃培养5d,分别用双甲酸夹心法和甲酸提取法作为蛋白提取方法,利用MALDI-TOF MS对标准菌株进行质谱数据采集,建立2种不同蛋白提取方法的菌株数据库"双甲酸夹心法自建库"和"甲酸提取法自建库";并用2种蛋白提取方法对21株红色毛癣菌临床分离株进行蛋白提取后,分别选取"双甲酸夹心法自建库+Bruker商品库"、"甲酸提取法自建库+Bruker商品库"和"Bruker商品库"做质谱鉴定,从而对各数据库的鉴定效果进行评价。结果"甲酸提取法自建库+Bruker商品库"对21株红色毛癣菌临床分离株的鉴定得分显著高于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05),匹配率为21/21;"Bruker商品数据库"与"Bruker商品数据库+双甲酸夹心法自建库"的鉴定得分比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验室建立的"甲酸提取法自建库+Bruker库"对红色毛癣菌的鉴定能力好,适用于临床微生物实验室。与待测菌统一培养条件所建立的数据库丰富了原有的数据库信息,使待测菌的鉴定更为准确。双甲酸夹心法操作简便,但对红色毛癣菌蛋白提取的效果欠佳。 邓穗燕 易江华 蔡文莹 夏勇关键词:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 红色毛癣菌 临床医学本科生开展课外科研活动的思考 2020年 医学院校开展本科生课外科研活动可以激发本科生的创造力。本研究从临床医学本科生开展课外科研活动的意义、存在的问题,以及解决途径等方面进行了分析;同时提出包括学生科研操作的规范化培训、本科生课外科研活动的时间协调、指导教师合理安排带教任务等相应对策。医学生需要处理好学习、社团、助学、课外活动以及课外科研的关系,合理安排时间参与。医学院校的青年教师需要合理安排时间来承担相应的科研带教任务。 郭旭光 邓穗燕 唐晓华 陈琼 夏勇关键词:本科生 不同抗凝剂对离子选择电极法检测钾钠氯的影响 被引量:2 2012年 目的研究不同抗凝剂对离子选择电极法检测血钾钠氯的影响,以减少检验结果分析前误差。方法用离子选择电极法检测不同抗凝剂的血清钾钠氯,并进行比较。结果用乙二胺四乙酸(EDTA)作抗凝剂检测血钾时血钾水平比无抗凝剂组显著增高(P<0.01),用枸橼酸钠作抗凝剂检测血钠时血钠水平比无抗凝剂组显著增高(P<0.01),用EDTA或枸橼酸钠作抗凝剂检测血氯时血氯水平与无抗凝剂组比较无明显变化(P>0.01)。结论 EDTA作抗凝剂检测血钾时会造成血钾假性升高,枸橼酸钠作抗凝剂检测血钠时会造成血钠假性升高。因此,在检测血钾钠时要选择合适的抗凝剂,对于减少分析前检验误差有很重要的作用。 郭旭光 邓穗燕 唐希才 夏勇关键词:离子 钾 钠 抗凝剂 离子选择电极法 检验技师担任兼职班主任在医学检验教育中的思考 被引量:2 2020年 随着我国教育水平的提高、大学不断扩招,如何对众多学生进行管理,保证学生在校园里健康成长是扩招后面临的挑战。各大高校普遍采取兼职班主任配合辅导员完成学生工作的模式,有其明显的优势,亦有不足之处。医学检验专业作为国家级特色专业、省级名牌专业和重点专业,从2013年入学开始,在学制上从5年改为4年,学位从医学学位改为理学学位,成为了一个尴尬的专业。该文以问卷调查的方式分析了医学院校79名检验技术专业大一新生对专业的认同感,针对得出的数据思考并提出附属医院检验科老师作为医学检验技术本科生兼职班主任在教学活动中的对策,促进医学检验技术专业兼职班主任教学相长。 邓穗燕 刘小青 夏勇关键词:兼职班主任 本科生 专业认同感 医学高校 教育 实时荧光环介导等温扩增检测毛癣菌属方法的建立 被引量:1 2020年 目的建立实时荧光环介导等温扩增(Real-time Loop-mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术检测皮肤癣的方法,实现皮肤癣菌病的快速实验室诊断。方法通过在NCBI官网查找下载皮肤癣菌中毛癣菌属、小孢子菌属和表皮癣菌属临床分离率较高的菌种rRNA序列(18S rRNA,ITS1,5.8S rRNA,ITS2和28S rRNA),运用DNASTAR Lasergene软件进行分析比对,寻找出毛癣菌属内高度保守的靶序列,且该段靶序列要与其他属存在差异,运用Primer Explorer V5设计LAMP引物。提取须癣毛癣菌NBRC6202基因组DNA作为模板筛选引物以及建立LAMP检测毛癣菌属的反应体系,以红色毛癣菌ATCC28188基因组DNA作为模板测试其敏感性和稳定性,以毛癣菌属以外的其他真菌、细菌基因组DNA验证LAMP反应体系的特异性。结果筛选的4套引物里,primer2的扩增效果较好,可在22 min检测出须癣毛癣菌,且可以特异地检测出红色毛癣菌、指间毛癣菌、疣状毛癣菌、许兰毛癣菌、紫色毛癣菌。本研究建立的毛癣菌属RT-LAMP检测方法的最低检测限为1 pg/μL;在10000 pg/μL、100 pg/μL和1 pg/μL三个浓度的分别10次重复检测实验中平均CT值和CV%分别为9.24±0.30,3.29%、10.57±0.54,5.12%、15.95±0.52,3.24%。结论实验建立的毛癣菌属LAMP检测方法在特异性、敏感性和稳定性三方面均表现出优越的性能,能快速准确地检测出毛癣菌属常见菌种,具有良好的临床应用前景。 邓穗燕 郭旭光 何文茵 易江华 夏勇关键词:皮肤癣菌 502株金黄色葡萄球菌的耐药性分析 被引量:1 2013年 目的了解2011年1月至2012年8月该院分离的金黄色葡萄球菌的耐药性以及对万古霉素的敏感性趋势。方法对该院2011年1月~2012年8月从各类标本分离出的502株金黄色葡萄球菌药物敏感性测定结果进行回顾性统计分析。结果未见对万古霉素、利奈唑胺、喹努普汀/达福普汀和替加环素耐药的金黄色葡萄球菌,而对青霉素G基本耐药;两年来克林霉素、亚胺培南、左氧氟沙星、四环素和复方磺胺甲恶唑等多种抗菌药物敏感性有所上升;万古霉素MIC达0.5μg/mL的金黄色葡萄球菌从2011年的34.7%升至2012年的47.7%,MIC达2μg/mL的菌株则从29.8%下降为16.3%。结论临床分离金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物敏感性有所上升,这与近年来医疗系统对细菌耐药性的高度重视以及规范使用抗菌药物的落实到位密不可分。 邓穗燕 夏勇 江镜全 郭旭光 单靖岚关键词:万古霉素 药物敏感性测定