王国富
- 作品数：44 被引量：132H指数：6
- 供职机构：大理学院基础医学院更多>>
- 发文基金：云南省教育厅科学研究基金云南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 幽门螺杆菌融合蛋白HCTV的保护性研究被引量：3
- 2007年
- 目的探讨幽门螺杆菌融合蛋白HCTV(HpaA-CtxB-VacA,HCTV)小鼠口服后的免疫应答。方法以Ni2+-NTA柱纯化HCTV为抗原,与重组蛋白HpaA和VacA分别给小鼠灌胃免疫,ELISPOT检测小鼠胃黏膜和派伊尔小结(Peyer patches,PP)特异性抗体分泌细胞(Antibody-secreting cells,ASC),ELISA检测血清IgG和IgA、小肠黏液sIgA和粪便sIgA。结果ELISPOT和ELISA检测结果表明,胃黏膜和PPsIgA-ASC、IgG-ASC数量明显增加,尤以sIgA-ASC为甚,同时血清IgA和IgG、粪便sIgA、肠黏液sIgA也明显高于HpaA组、VacA组和对照组,差异均有显著意义。结论已成功获得纯化的融合蛋白HCTV,小鼠灌胃免疫可有效诱导黏膜免疫应答,产生高水平的sIgA,可作候选Hp口服疫苗。
- 王国富吴利先白丽王晶郭利军潘云华
- 关键词：幽门螺杆菌黏附素霍乱毒素B亚单位融合蛋白
- 屎肠球菌类毒力基因hyl功能的动物实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的构建屎肠球菌透明质酸酶基因(hyaluronidase,hyl)突变株(*hyl),通过动物实验来研究hyl基因的功能。方法通过小鼠腹膜炎模型和兔心内膜炎模型来评价屎肠球菌hyl基因突变株(*hyl)的毒力下降情况。结果突变株在小鼠腹膜炎模型中的半数致死量(LD50)提高了7倍,存活率也明显高于野生株,引起的兔心内膜炎的病理改变也较野生株轻微。结论hyl基因在屎肠球菌致病中起着重要的作用,可能是屎肠球菌的毒力因子之一。
- 吴利先王国富黄文祥
- 关键词：屎肠球菌
- 尖锐湿疣患者HPV亚型及免疫功能被引量：3
- 2004年
- 尖锐湿疣容易复发,这与尖锐湿疣患者感染的人乳头瘤病毒亚型及机体免疫功能密切相关。以人乳头瘤病毒16/18型为代表的高危感染,外周血T淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞异常,以及细胞因子产生失衡所引起一系列细胞免疫抑制是最主要原因。本文就这两方面的研究进展作了综述,为尖锐湿疣的防治提供理论依据。
- 王国富白丽
- 关键词：尖锐湿疣HPV亚型免疫功能T淋巴细胞亚群自然杀伤细胞
- 志贺菌感染的多重PCR快速诊断技术的建立被引量：3
- 2012年
- 目的探讨多重PCR技术在志贺菌感染快速诊断中的应用。方法用多重PCR法对临床分离的68株志贺菌毒力基因shet1A、shet1B、ial和ipaH进行扩增检测。结果 68株志贺菌均在423bp(ipaH)处出现条带,在147bp(shet1B)、309bp(shet1A)、320bp(ial)处均出现了至少一个条带,与常规鉴定法的符合率达100%。结论成功建立了志贺菌感染的多重PCR快速诊断技术。
- 王国富吴利先薛士鹏
- 关键词：志贺菌多重PCR
- 福氏志贺菌ipaB基因的克隆及序列测定
- 2012年
- 目的:克隆福氏志贺菌(Shigella flexneri,S.flexne)的ipaB基因。方法:以福氏志贺菌2a 2457T(Nal)r为模板,用PCR扩增ipaB目的基因片段,克隆至pQE-30表达载体中,构建含目的基因的表达质粒pQE-ipaB。结果:构建了重组质粒pQE-ipaB,ipaB基因全长1 743 bp,经测序分析与预期相符。结论:成功克隆了ipaB基因。
- 王国富白丽薛士鹏吴利先
- 关键词：福氏志贺菌克隆
- 幽门螺杆菌融合蛋白HCTV的表达及免疫原性研究被引量：1
- 2006年
- 目的构建表达幽门螺杆菌融合蛋白粘附素-细胞空泡毒素A-霍乱毒素B亚单位(HpaA-CtxB-VacA,HCTV)的原核表达载体,并诱导表达,为制备具有治疗与预防作用的多联疫苗奠定基础。方法用PCR技术从pQE-hctB扩增hpaA和ctxB目的基因片段,从pQE30-V质粒扩增出vacA基因,同时插入表达载体pQE-30,构建成pQE-hctv。再将pQE-hctv转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析表达结果。Western blotting鉴定其抗原性。结果融合蛋白的相对分子量约为68000,可溶性表达占全菌的15%以上,经亲和层析后可获得纯度为90%以上的重组蛋白。Western blotting分析其能分别与HpaA抗血清、VacA抗血清和CT抗血清特异性反应。结论重组表达质粒pQE30-hctv表达成功,而且具有各自蛋白的抗原性,为进一步研究融和蛋白的功能和制备集预防和治疗为一体的Hp候选口服疫苗提供基础。
- 王国富吴利先白丽王晶郭利军
- 关键词：幽门螺杆菌粘附素细胞空泡毒素霍乱毒素B亚单位融合蛋白
- HpaA蛋白在幽门螺杆菌感染诊断中的应用被引量：2
- 2006年
- 目的建立检测血清HpaA抗体的ELISA间接法,探讨以重组蛋白作为抗原在诊断H.pylori感染中的价值。方法将从临床分离菌株中获得的HpaA基因在大肠杆菌中表达,用Ni2+-NTA柱纯化表达的HpaA作为抗原,建立检测血清HpaA抗体的ELISA间接法,与诊断标准比较评价其应用的可行性。结果经超声破碎后,用SDS-PAGE分析显示,HpaA蛋白主要存在于上清中,纯化抗原检测临床标本中HpaA抗体的敏感性和特异性分别为100.0%和90.1%。结论以重组蛋白为抗原初步建立检测血清HpaA抗体的ELISA间接法敏感性、特异性高,为制备商品化的试剂盒奠定了基础。
- 吴利先王国富白丽王晶潘云华郭利军
- 关键词：幽门螺杆菌ELISA诊断试剂
- 幽门螺杆菌感染慢性胃炎与红细胞免疫功能相关性研究被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨幽门螺杆菌感染慢性胃炎患者对红细胞免疫功能的影响。方法:采用红细胞C3b受体花环(RBC-C3bRR)百分率试验和免疫复合物花环(RBC-ICR)百分率试验,检测86例Hp阳性慢性胃炎患者、42例Hp阴性慢性胃炎患者以及38例健康志愿者红细胞免疫功能情况。结果:慢性胃炎组RBC-C3bRR％低于正常组(P<0．01);RBC-ICR％高于正常对照组(P<0．05);Hp阳性慢性胃炎组RBC-C33bRR明显低于Hp阴性组(P<0．05),RBC-ICR明显高于Hp阴性组(P<0．05)。结论:慢性胃炎患者红细胞免疫功能低下与Hp感染存在相关性。
- 吴利先王国富孙小平
- 关键词：幽门螺杆菌感染慢性胃炎红细胞免疫
- 屎肠球菌类毒力基因hyl的致病性研究被引量：3
- 2009年
- 采用菌落杂交法检测364株不同脉冲场电泳(PFGE)型的屎肠球菌中透明质酸酶(hyl)基因的分布。用自杀质粒pTX4577通过体内同源重组,筛选获得hyl基因的突变株,体外研究hyl基因缺失对突变株生长能力的影响。采用小鼠腹膜炎模型体内研究hyl基因突变株的毒力下降情况。结果显示,在临床分离菌株中hyl基因阳性率为32.76%,明显高于非临床分离菌株(5.30%)。经同源重组,利用卡那霉素抗性筛选,PCR、PFGE和Southern印迹进行鉴定获得hyl基因突变株,命名为*hyl。突变株在体外的生长能力低于野生株。小鼠腹膜炎模型中,在相同细菌感染浓度(3.7×109cfu)下,野生株TX2466组小鼠的存活率为0,而*hyl组小鼠的存活率为50%,差异有显著性。hyl基因主要出现于临床感染的屎肠球菌中,在屎肠球菌致病中起着重要的作用,可能是屎肠球菌的毒力因子之一。
- 吴利先黄文祥王国富孙小平
- 关键词：屎肠球菌毒力基因透明质酸酶
- 两歧双歧杆菌抗福氏痢疾杆菌感染的机制研究被引量：4
- 2010年
- 目的：以福氏痢疾杆菌感染大鼠为模型,研究两歧双歧杆菌对福氏痢疾杆菌感染大鼠肿癌坏死因子-α（TNF-α）水平的影响,从而探讨其抗福氏痢疾杆菌感染的机制。方法：先用硫酸链霉素给正常大鼠灌胃,出现菌群失调症状,再通过福氏痢疾杆菌灌胃感染大鼠,使用两歧双歧杆菌液干预治疗福氏痢疾杆菌感染大鼠,检测干预治疗后各组大鼠血及脾中TNF-α的含量。结果：福氏痢疾杆菌感染各组与正常组相比,大鼠体内血及脾中TNF-α的含量均有明显差异;福氏痢疾杆菌感染各组中,未干预组、生理盐水组及双歧杆菌组脾中TNF-α的含量有显著变化。其中,双歧杆菌组的TNF-α水平升高更明显。结论：两歧双歧杆菌对福氏痢疾杆菌感染机体的TNF-α分泌有一定促进作用,是其抗福氏痢疾杆菌感染的可能机制。
- 吴利先王国富高峰
- 关键词：两歧双歧杆菌福氏痢疾杆菌肿瘤坏死因子-Α
