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柯华昕: 作品数：18 被引量：41H指数：4; 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>; 相关领域：医药卫生化学工程农业科学更多>>

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甲型肝炎减毒活疫苗生产中病毒释放的最佳方法探索被引量：2: 2001年; 目的　探索甲型肝炎减毒活疫苗 (简称甲肝活疫苗 )生产中感染细胞释放病毒的最佳方法。方法　采用超声波细胞粉碎仪、- 70℃及液氮冻融 3种方法粉碎细胞 ,对细胞破碎情况、病毒抗原滴度和感染性滴度进行了比较。结果　超声波连续粉碎 3次 (90秒 /次 )、- 70℃反复冻融粉碎 4次和液氮冻融粉碎 6次 ,细胞破碎率分别为 94%、82 %和 81% ;病毒抗原滴度和感染性滴度均达高峰 ;抗原滴度均为 1∶2 5 6 ,感染性滴度 (logCCID50 /ml)分别为 8 6 7、6 5和 6 0。继续超声和 -70℃冻融粉碎细胞 ,病毒抗原滴度和感染性滴度基本不变 ,而液氮冻融至第 10次时 ,抗原滴度无明显变化 ,感染性滴度下降2 0logCCID50 /ml。结论　超声波破碎率最高 ,细胞碎片最小 ,病毒充分释放 ,且不损伤病毒 ;- 70℃和液氮冻融破碎率较低 ,细胞碎片较大 ,病毒释放效率低 ,病毒损伤以液氮冻融为重。; 杨净思胡云章蒋国润杨晓蕾柯华昕杨伟杨蓉; 关键词：甲型肝炎减毒活疫苗超声波冻融

一株引起无菌性脑膜脑炎柯萨奇B组3型病毒的分离和VP1基因分析被引量：1: 2011年; 摘要目的对一株从无菌性脑膜脑炎患者中分离到的柯萨奇B组3型病毒（coxsackievirusB3，CVB3）分离株KMA103-09进行VP1区的基因特征分析。方法采用Hep-2、RD细胞对患者粪便标本进行病毒分离，肠道病毒组合血清进行鉴别，反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）扩增病毒目的片段，测序后进行VP1基因分析，用Mega4．1等软件分析处理。结果肠道病毒组合血清鉴别为柯萨奇病毒B组3型（Cox．B3），从病毒性脑膜脑炎患者粪便标本中，分离到CVB3，其VPl区的核苷酸长度为849bp，未发现核苷酸插入与丢失。与山东04433／SD／CHN／2004／CB3株、山东05280／SD／CHN／2005／CB3株及山东YZ127／SD／CHN／2005／CB3株氨基酸同源，与其余国内分离株同源性高于为99．29％，与国外毒株的同源性为95．41％-96．47％。在进化树上与AM06HZ／SD／CHN／2006／CB3株显示在同一个分支上。结论分离的肠道病毒为柯萨奇病毒B组3型（Cox．B3），分离株（KMA103—09）VP1区变异较小。; 李华杨卉娟柯华昕陈俊英施海晶孙强明马绍辉; 关键词：无菌性脑膜脑炎 VP1基因

反相高效液相色谱法测定甲肝灭活疫苗中的2-苯氧基乙醇含量被引量：1: 2006年; 目的建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC法)测定甲型肝炎灭活疫苗中2-苯氧基乙醇的含量。方法采用C18柱,以50%乙腈为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为270nm,柱温为室温。以外标法测定含量。结果2-苯氧基乙醇的浓度线性范围是0.55～111μg/mL(r=0.9995),平均回收率为100.37%,RSD为1.77%。结论RP-HPLC法可用于甲型肝炎灭活疫苗中2-苯氧基乙醇的含量测定。; 李华柯华昕阎玲梅周文晶谢忠平; 关键词：反相高效液相色谱法甲型肝炎灭活疫苗

口服脊髓灰质炎活疫苗糖丸的病毒滴度及其分析: 2000年; 对１９９４～１９９８年共５年间生产的口服脊髓灰质炎活疫苗糖丸的病毒滴度的检定结果进行质量分析。结果显示：近５年生产的口服脊髓灰质炎活疫苗糖丸中，其病毒滴度稳中有升，平均滴度由６－１３ｌｏｇＴＣＩＤ５０／人份上升到６－２５ｌｏｇＴＣＩＤ５０／人份；同时疫苗的热稳定性试验结果也在逐步提高，其病毒滴度的平均基础滴度与３７℃４８ｈ平均滴度差值的平均值由０－８７ｌｏｇＴＣＩＤ５０／人份下降到０－６３ｌｏｇＴＣＩＤ５０／人份。; 白巍李华柯华昕史荔; 关键词：脊髓灰质炎活疫苗糖丸热稳定性

药品生产中水的质量控制被引量：4: 2007年; 目的考察水作为药品生产特别是生物制品生产中的主要原辅材料的质量。方法按2005年版《中国药典(二部)》收载的注射用水检测项目进行相关检测。结果对2004—2006年水的质量进行检测及质量控制,并对以水为原辅料生产的终产品进行质量检定,注射用水的质量符合《中国药典(二部)》要求。结论所生产的注射液用水是优质的,可以用于药品生产。; 李华徐琼芳周玉波谢忠平柯华昕唐桂珍; 关键词：药品生产注射用水

一种柯萨奇病毒A组10型抗原检测试剂盒: 本发明提供了一种柯萨奇病毒A组10型抗原检测试剂盒，属于生物检测技术领域。本发明所述试剂盒是基于ELISA方法的检测试剂盒，所述试剂盒含有兔抗CV‑A10多克隆抗体和辣根过氧化物酶标记CV‑A10抗体。该方法在抗原与抗体...; 李华谢忠平杨婷谢天宏岳磊向虹张也戴永娟柯华昕卫星辰赵红张宇昊

赋形剂—甘露醇粉剂细菌内毒素检查法的研究: 2005年; Objective To establish the inspection method of endotoxin in mannitol powder.Methods The experiment was implemented according to the endotoxin inspection in China Pharmacopoeia(II,2000ED).Results The mannitol power did not interfere with the agglutination reaction of TAL.The mannitol powder was assayed by TAL labeled the sensitivity of 0.25EU/mL for endotoxin.The results were proved by the endotoxin inspection of transfer factor(TF).Conclusion The endotoxin inspection method can be used for mannitol powder.; 李华柯华昕龙润乡崔萍芳丁雪凤谢忠平; 关键词：赋形剂细菌内毒素鲎试剂

2009年云南省2株肠道病毒71型分离株全基因组序列遗传特性分析被引量：6: 2012年; 对2009年云南省肠道病毒71型分离株KMM09和KM186-09进行全基因组序列测序,并与我国及其它国家流行的EV71基因型进行比较和进化分析。KMM09和KM186-09基因组长为7409bp,编码2193个氨基酸,VP1系统进化分析显示2009年云南分离株属于C4基因型的C4a亚型。在结构区,与其它基因型相比较,C基因型之间的核苷酸和氨基酸的同源性高于其它基因型;而在非结构区,C4与B基因型和CA16原型株G10同源性高于其它C基因亚型。通过RDP3重组软件和blast比对分析,发现EV71C4基因型与B3基因型,与CA16原型株G10的基因组在非结构区存在重组。EV71全基因组序列的比较和分析,对了解引起我国手足口病暴发或流行C4基因亚型EV71毒株的遗传特性具有重要意义。; 李华邵聪文潘玥柯华昕马绍辉; 关键词：肠道病毒71型全基因组

pH值对甲肝减毒活疫苗后处理得率的影响被引量：1: 2001年; 在甲肝减毒疫苗生产工艺中不同pH对疫苗得率有一定的影响 ,为提高疫苗的产量 ,在传统的氯仿抽提条件下 ,使用不同pH值 (pH1.0～ 12 .0 )的磷酸盐缓冲体系进行氯仿抽提 ,检测抽提后甲肝病毒(HepatitisAVirus ,HAV)抗原滴度和感染性滴度 ,结果表明 :经氯仿抽提后 ,HAV抗原滴度和感染性滴度均在pH8.0～ 9.0时最高 ,相应得率也比常规处理的得率有显著的提高 .说明改进pH抽提条件对甲型肝炎减毒活疫苗后处理工艺效率的提高 ,成品疫苗产量的增加具有实际应用价值 .; 胡凝珠王晓辉柯华昕杨丽仙杨伟路虹吴忠香金琼仙杨净思; 关键词：甲型肝炎减毒活疫苗 PH值生产工艺后处理得率

悬浮吸附方法生产H_2株甲肝减毒活疫苗的产量质量及免疫效果被引量：3: 2001年; :目的　在生产规模条件下 ,对悬浮和单层吸附方法应用于H2 株甲肝减毒活疫苗生产进行了 5年产量质量及人体免疫效果的比较。方法　采用悬浮吸附方法和单层吸附方法并进行比较。结果　悬浮吸附方法HAV增殖高峰比单层吸附方法提前 4天 ,抗原滴度高一个稀释度 ,病毒繁殖全程细胞质量优于单层吸附方法 ,整个生产周期可缩短 9天。历年大规模对比生产和人体免疫效果观察结果表明 :悬浮吸附方法生产甲肝疫苗滴度略高于单层吸附方法 ,两者生产的疫苗在人体免疫效果方面无显著差异。结论　悬浮吸附方法更适宜H2 株甲肝减毒活疫苗工业化、规模化生产。; 杨净思曹逸云王晓辉胡凝珠蒋国润柯华昕杨晓蕾王东宝董德祥; 关键词：免疫效果

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