刘晓明
- 作品数：49 被引量：92H指数：5
- 供职机构：宁夏大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 绵羊肺炎支原体功能基因挖掘及其与宿主细胞互作机制的初步研究
- 李敏薛頔姜中佳李雅楠孙远航阳辉李旭卉刘晓明王玉炯
- 肺泡上皮细胞减轻巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染中TLR信号介导的炎症反应
- 本研究模拟体内肺泡的气液相环境,采用肺脏上皮细胞与巨噬细胞的气液相共培养模型,探讨肺脏上皮细胞对巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染的免疫调节作用.通过建立人肺泡上皮细胞A549与人单核细胞U937分化而来的巨噬细胞的气液相共培养...
- 孙颖飞杨易程龙贾元元任奇杰李勇刘晓明王玉炯
- 经典Wnt信号途径在肺脏上皮细胞抗结核分枝杆菌感染中的作用被引量：3
- 2013年
- 目的:肺脏上皮细胞在抵抗外源微生物入侵中发挥着重要保护作用,最近研究揭示,在器官组织发育中发挥调控作用的经典Wnt信号具有免疫调节功能。因此,有必要研究肺脏上皮细胞A549中Wnt信号经典途径在抗结核分枝杆菌(Mtb)感染中的免疫调节作用。方法:用牛结核分枝杆菌卡介苗(BCG)刺激转入Wnt信号报告基因质粒BATflash的A549细胞,利用双荧光素酶报告系统、Western blot和ELISA方法分析细胞中Wnt信号经典途径主要相关信号因子和免疫反应炎症因子的表达变化。结果:BCG感染A549细胞后抑制了Wnt信号报告荧光素酶的活性,Western blot结果表明,随着细胞浆内磷酸化β-catenin含量增加,Wnt信号的抑制基因GSK3β和Axin2表达上调,而细胞核中的效应子β-catenin基因活性组分和下游转录因子TCF4与Lef-1的表达下调;BCG感染过表达β-catenin的细胞时导致IL-6、NF-κB、MyD88和TRAF6蛋白表达下调,但不影响TNF-α的表达。结论:肺脏上皮细胞在抗结核分枝杆菌感染过程中通过下调Wnt信号活性而抑制细胞中的MyD88/TRAF6/NF-κB信号通路来降低免疫反应以保护宿主细胞免受感染造成的免疫损伤。
- 石娟杨佳丽马凌洁包少文马彦程龙马春燕李勇李勇
- 猪肺脏气道上皮细胞的形态与结构研究被引量：3
- 2013年
- 为了研究猪气道上皮细胞的类型和分布的形态学特征,试验采用组织化学染色[苏木精-伊红(H.E.)和高碘酸-希夫(PAS)染色]和免疫组织化学(IHC)染色等方法对猪肺脏大气道各个区段(气管、支气管和细支气管)主要上皮细胞的类型进行形态学观察,并对其组成比例进行统计分析。结果表明:猪肺脏大气道上皮主要由基底细胞、克拉拉细胞、纤毛细胞和杯状细胞等组成,其中不同区段上皮细胞的类型组成比例有所差异;并且这种形态组成特征和人类的肺脏比较接近,而与小鼠肺脏气道上皮细胞形态组成有较大差异。说明猪肺脏比小鼠肺脏更适合用于人类肺脏疾病的研究。
- 杨佳丽石娟马凌洁马彦程龙郝秀静曾瑾李勇刘晓明
- 关键词：肺脏气道上皮细胞免疫组织化学
- 血清中sIL‑7R在诊断系统性红斑狼疮肾炎中的应用
- 本发明公开了一种血清中sIL‑7R在诊断系统性红斑狼疮肾炎中的应用，其是将血清sIL‑7R蛋白作为标志物来诊断系统性红斑狼疮肾炎的。本发明通过酶联吸附法，荧光定量法通过蛋白，mRNA水平检测系统性红斑狼疮肾炎患者血清中s...
- 池淑红刘晓明薛青石娟杨佳丽
- 文献传递
- 不同方法对滩羊卵母细胞孤雌激活及重构胚发育影响的研究
- 2015年
- 旨在探索宁夏滩羊卵母细胞孤雌激活及胚胎培养条件,并建立转Cherry基因滩羊体细胞重构胚的融合与体外培养体系。试验分析了3种激活方法即电激活、Ionomycin结合6-DMAP与电激活结合6-DMAP对成熟的滩羊卵母细胞激活的影响,以及3种胚胎培养液mSOFaa、M16和KSOM的培养筛选,并优化了滩羊体细胞重构胚的融合与体外培养条件。结果表明:在卵母细胞孤雌激活中,最适电压为1 600V/cm,获得卵裂率和囊胚率分别为58.5%和19.5%;5μmol离子霉素结合2 mmol 6-DMAP能有效地激活成熟的滩羊卵母细胞,卵裂率为81.0%,囊胚率为26.2%;并发现mSOFaa胚胎培养液的卵裂率和囊胚显著优于M16和KSOM培养液;在转基因重构胚融合中发现在电压1 800V/cm、脉冲时间10μs、脉冲次数2次和间隔时间为1s的条件下,卵裂率和囊胚率为40.0%、21.4%。本试验建立的滩羊孤雌激活和转基因重构胚融合与体外培养体系为宁夏滩羊的分子育种奠定了基础。
- 李勇李勇程龙孙毅杨易杨易
- 关键词：滩羊孤雌激活转基因电融合重构胚
- 一种用于多种细胞3D互作嵌套培养的实验装置
- 本实用新型涉及细胞培养技术领域，尤其是一种用于多种细胞3D互作嵌套培养的实验装置，包括培养皿体，所述培养皿体上方连接有培养皿盖，所述培养皿体内腔底壁固定连接三个呈三角分布的定位管，三个所述定位管上均插接支撑杆，三个所述支...
- 刘晓明杨佳丽王玉炯
- 文献传递
- 结核分枝杆菌诱导人巨噬细胞和肺泡上皮细胞SOX基因家族的表达差异研究
- 研究人SOX基因家族在结核分枝杆菌感染其靶细胞-人巨噬细胞和肺泡上皮细胞中的表达差异.采用结核分枝杆菌强毒株H37Rv感染人U937单核细胞分化的巨噬细胞和A549肺泡上皮细胞,qRT-PCR检测感染后两种细胞内人SOX...
- 贾元元杨易孙颖飞任奇杰李勇刘晓明
- 抑制Wnt/β-catenin信号和NOX4表达阻碍二氧化硅诱导肺上皮细胞损伤的修复被引量：4
- 2021年
- 目的探究Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)相互作用对二氧化硅(SiO_(2))诱导的肺脏上皮细胞增殖的影响。方法采用二氧化硅气道滴灌C57BL/6小鼠制备小鼠矽肺模型,免疫组织化学染色法检测矽肺模型小鼠肺组织NOX4的表达;二氧化硅刺激BEAS-2B人肺上皮细胞制备上皮细胞氧化损伤细胞模型,Wnt信号活化的条件培养基(Wnt3a-CM)及Wnt信号抑制剂XAV939改变Wnt信号活性,表达NOX4短发夹RNA(NOX4 shRNA)的腺病毒感染人肺上皮细胞敲低细胞NOX4水平。Western blot法检测肺组织和人肺上皮细胞Wnt3a、活化β联蛋白(ABC)、转录因子4(TCF4)、NOX4和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的蛋白表达;CCK-8法检测不同剂量二氧化硅刺激人肺上皮细胞24 h和48 h对细胞存活率及敲低NOX4的表达对细胞增殖的影响;CellROX?荧光探针负载法检测二氧化硅作用下人肺上皮细胞活性氧(ROS)的水平。结果成功制备小鼠矽肺模型和氧化损伤细胞模型。二氧化硅刺激肺脏上皮细胞可显著激活Wnt/β-catenin信号和诱导NOX4表达,使ROS大量释放,而ROS清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)与二氧化硅共同作用可抑制ROS的释放,进而抑制Wnt/β-catenin信号ABC蛋白表达;Wnt3a-CM诱导的Wnt信号激活可上调NOX4的表达;反之,Wnt信号抑制剂XAV939则抑制NOX4的表达;而敲低NOX4表达后,可显著抑制Wnt/β-catenin信号ABC蛋白和cyclin D1的表达,抑制细胞增殖。结论阻断Wnt/β-catenin信号、下调NOX4表达抑制肺上皮细胞增殖,抑制二氧化硅诱导的肺脏上皮细胞损伤修复。
- 马佳马佳杨佳丽杨丹丹杨佳丽
- 关键词：WNT矽肺
- 人胎盘胎儿侧间充质干细胞无血清培养上清对肺脏上皮细胞氧化应激的保护作用被引量：6
- 2017年
- 背景:前期研究证实人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清具有一定的清除活性氧自由基的能力,且本身具有一定的抗氧化酶活性。目的:探究人胎盘胎儿侧间充质干细胞在无血清培养条件下所得上清对氧化应激损伤的肺脏上皮细胞的保护作用及其作用机制。方法:分别使用不同浓度的过氧化氢(200,400,500,600,800μmol/L)对肺脏上皮细胞A549细胞系进行6,12,24 h的氧化刺激,通过CCK-8法对肺脏上皮细胞存活率进行检测,得出存活率为50%时的过氧化氢浓度作为氧化损伤模型的最适条件。用Hochest33258染色及Western Blot对模型有效性进行验证。采用无血清培养基培养胎盘胎儿侧间充质干细胞,收集P3代细胞培养上清将其作用于氧化损伤的肺脏上皮细胞,培养24 h,即上清组。同时设立损伤组(仅进行氧化损伤)和维生素C组(培养基中添加100μmol/L的维生素C)。利用流式细胞术对各组细胞凋亡情况进行检测以及Western Blot检测凋亡相关蛋白及氧化应激经典信号通路Nrf2-Keap1-ARE信号通路相关蛋白的表达。结果与结论:(1)CCK-8法检测得出,采用600μmol/L的过氧化氢对肺脏上皮细胞进行24 h的氧化刺激,A549细胞存活率为(56.41±3.31)%。Hochest33258染色及Western Blot证实模型的可靠性;(2)流式细胞术结果显示维生素C组和上清组氧化损伤细胞的凋亡率与损伤组细胞相比有不同程度的降低,其中上清组与损伤组相比差异有统计学意义(P<0.05);(3)Western Blot对凋亡相关蛋白的检测显示,与损伤组对比,维生素C组和上清组凋亡促进基因Bax蛋白表达减弱,凋亡抑制基因Bcl-2蛋白表达增强,且差异有统计学意义(P<0.05)。Nrf2-Keap1-ARE信号通路相关蛋白显示与损伤组对比,维生素C组和上清组Nrf2蛋白表达增强,Keap1分子表达减弱且差异有统计学意义(P<0.05);(4)上述结果提示,实验成功构建了肺脏上皮细胞损伤模型,且人胎盘胎儿侧间充�
- 付雪刘国攀张玉洁严秀蕊马晓娜刘晓明魏军
- 关键词：干细胞间充质干细胞氧化应激WESTERNBLOT法
