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黄仪秀: 作品数：22 被引量：89H指数：4; 供职机构：北京大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金中国科学院科研项目更多>>; 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>

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细菌染色体的高级结构被引量：2: 1991年; <正> 大肠杆菌(Escherichia coli)及大部分细菌的细胞通常含有一个染色体,称为细菌染色体(bacterial chromosome)或类核(nucleoid)。大肠杆菌染色体DNA的分子量大约是2.6×10~9,相当于4×10~6碱基对,估计可携带约4000个基因。; 黄仪秀; 关键词：细菌染色体

一种蛋白质芯片: 本发明公开了一种蛋白质芯片。该蛋白质芯片，是由基片和表面展示有用作分子检测器的蛋白质的重组噬菌体组成，所述表面展示有用作分子检测器的蛋白质的重组噬菌体以微阵列固定在基片上。本发明将制作芯片的蛋白质展示于噬菌体上，使蛋白质...; 朱圣庚赵新生毕群黄仪秀洪龙廖玮岑晓东谭涛超; 文献传递

ICAM-1特异结合肽的淘选与性质研究被引量：1: 2002年; 利用噬菌体展示载体pCANTAB5G8构建了随机十五肽库 ,根据转化率计算库容量为 1 36× 10 8。用PCR SSCP检验了库的异质性。以固相包被亲和淘选的方法 ,经过 4轮淘选和ELISA分析 ,得到了 5个可与重组人细胞间粘附分子 1(ICAM 1)特异结合的噬菌体克隆 ,对所展示的十五肽进行了序列分析。其中活性较高的噬菌体展示十五肽与ICAM 1的亲和常数约为 7 87× 10 7。; 赵乐群赵佳慧程庆砾黄仪秀朱圣庚; 关键词：噬菌体展示细胞间粘附分子1

利用PCR技术构建体外高效转录系统被引量：2: 1993年; 设计并合成了一对 PCR 反应引物,其5′端引物除含有目的基因5′端序列外,还外加 T7 RNA 聚合酶启动子的17个核苷酸.3′端引物则按常规设计.以染色体 DNA为模板,通过 PCR,可扩增出带有 T7 RNA 聚合酶启动子的目的基因 DNA 片段.以此 PCR 产物为模板,在体外成功实现了高效转录.这是一种快速、简便构建体外高效转录系统的好方法.; 黄仪秀张磊朱圣庚; 关键词：聚合酶链反应转录

细胞间粘附分子-1特异结合肽的筛选: 细胞间粘附分子1(Intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)属免疫球蛋白超家族,是单链跨膜糖蛋白,其核心多肽分子量位55kD,不同种类细胞上ICAM-1的分子量不同(76-114k...; 赵乐群赵佳慧程庆砾黄仪秀朱圣庚; 关键词：结合肽丝状噬菌体细胞间粘附分子; 文献传递

水蛭素基因的递归PCR合成和在大肠杆菌中的表达与分泌被引量：7: 1997年; 水蛭素是凝血酶最强的特异抑制剂，可望成为预防和治疗各种血栓疾病的有效药物。根据医用水蛭（Ｈｉｒｕｄｏｍｅｄｉｃｉｎａｌｉｓ）头部水蛭素（ＨＶ－２）的氨基酸序列，通过递归ＰＣＲ，合成水蛭素基因，并重组到本实验室改建的大肠杆菌分泌型表达载体ｐＩＮ－ｏｍｐＡ－ＨＩ中，使水蛭素基因的编码序列直接位于大肠杆菌外膜蛋白Ａ信号肽序列的下游。转化大肠杆菌ＤＨ５α，筛选出重组体，经ＰＣＲ，限制酶切图谱和序列分析，结果表明所合成的水蛭素基因与设计完全一致。水蛭素基因在大肠杆菌中得到表达，重组水蛭素（ｒＨＶ－２）被分泌到细胞周质及培养基中，表达量占菌体蛋白的１９．８％，并且有明显抗凝血酶生物活性。经分离纯化，产物在质谱分析中显示基本为单一成分，分子量为６８９３．１Ｄａ，证明重组水蛭素在分泌过程得到正确加工。; 毕群黄仪秀朱圣庚; 关键词：水蛭素大肠杆菌基因表达抗凝血药

小鼠噬菌体抗体库的构建和N-肽结合单链抗体的筛选被引量：3: 2000年; 成功构建一库容量为 1.7× 10 8的小鼠噬菌体抗体库 ,并从中淘选出对N 肽有结合活性的单链抗体。首先从未免疫小鼠的脾脏中提取总RNA ,分离出mRNA ,经逆转录合成其总cDNA。随后通过PCR分别扩增出抗体重链和轻链可变区VH、VL 的基因片断 ,再经重组PCR将两片断由一编码 (Gly4 Ser) 3十五肽的接头连在一起 ,并克隆到噬菌质粒 pCANTAB 5E中 ,电击转化大肠杆菌TG1。经辅助噬菌体M 13KO7超感染回收全部重组噬菌体 ,此即噬菌体抗体库。N 肽是一种新发现的神经肽 ,其N端与阿片肽高度同源 ,可与阿片肽受体相互作用。对其研究可能有助于了解成瘾机制和有临床应用价值。将生物素化的N 肽与抗体库相互作用 ,用偶联有链霉亲和素的磁珠富集与N 肽结合的重组噬菌体 ,经四轮淘选 ,得到亲和力较高的单链抗体。; 高新胜黄仪秀郭振泉朱圣庚陈玉珍; 关键词：噬菌体展示技术抗体库神经肽小鼠

DNA改组技术在水蛭素实验进化中的应用被引量：8: 2001年; Hirudin gene was mutated by error\|prone PCR and DNA shuffling.The shuffled genes were inserted into phagemid pCANTAB\|5G8.After the introduction of the recombinant DNA into E.coli TG1,the hirudin mutants were displayed on the surface of bacteriophage M13.A mutant with increased specific activity of antithrombin was selected by two rounds of panning with decreased amounts of thrombin,and was identified as N47K.Activity analysis of HV2 and its mutants N47K,N26S,D5A,P46L/S50G suggested that K47,P46 were important to the interaction of hirudin and thrombin.Hirudin mutants with improved properties could be hopefully aquired through directed evolution by DNA shuffling.; 周育刘晖谭涛超黄仪秀朱圣庚; 关键词：DNA改组技术水蛭素

从噬菌体抗体库中淘选人绒毛膜促性腺激素的单链抗体被引量：1: 2002年; 由鼠源噬菌体抗体库淘选到展示有人绒毛膜促性腺激素单链抗体的噬菌体克隆。用ELISA方法进行检测 ,从结合力最强的克隆中分离单链抗体基因 ,插入经改造的高效表达载体pET 2 1a(+ )中 ,转化大肠杆菌 ,诱导表达。从培养基中可检测到可溶性抗人绒毛膜促性腺激素的单链抗体。; 路小龙张凤英郭振泉黄仪秀朱圣庚; 关键词：噬菌体抗体库人绒毛膜促性腺激素单链抗体 ELISA方法基因工程