秦逍云
- 作品数：42 被引量：87H指数：5
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目广东省科技计划工业攻关项目深圳市医学重点学科建设基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学轻工技术与工程更多>>
- DEHP对大鼠睾丸组织病理损害和超微结构的影响
- 目的：探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)对雄性大鼠睾丸的病理损害和超微结构的影响.
方法：5周龄雄性SD大鼠40只,随机分为对照组、DEHP低剂量组、DEHP中剂量组、DEHP高剂量组,每组10只,...
- 秦逍云黄海燕黄新凤谭琴徐新云张倩马佺杨细飞吴德生周丽刘建军
- 关键词：邻苯二甲酸二乙基己酯毒理学睾丸组织病理损害超微结构
- 文献传递
- 三氯乙烯对CYP2E1基因高表达细胞和正常肝细胞的毒性作用被引量：4
- 2014年
- 目的 应用分子克隆技术建立CYP2E1基因高表达细胞株,观察三氯乙烯（TCE）对CYP2E1基因高表达细胞和正常肝细胞的毒性,探讨CYP2E1基因在TCE毒性中的作用.方法 用不同剂量三氯乙烯（0、0.25、0.5、1.0、2.0和4.0 mmol/L）对CYP2E1高表达细胞和正常人肝细胞（L02细胞）进行染毒12h,观察凋亡基因（Bcl-2、caspase-3、caspase-8、caspase-9）和癌基因（c-fos、c-myc、k-ras、p53）表达变化.结果 TCE染毒引起L02肝细胞和CYP2E1高表达细胞Bcl-2表达水平下降,0.25～2.0 mmol/L TCE剂量时L02肝细胞Bcl-2表达下降50％～60％,但相同剂量组的CYP2E1高表达细胞Bcl-2表达水平明显高于正常肝细胞20％～50％; 0.5～4.0 mmol/L TCE剂量时CYP2E1高表达细胞中凋亡基因caspase-3、caspase-8、caspase-9表达水平比正常肝细胞高30％～600％,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.TCE染毒后对L02肝细胞和CYP2E1高表达细胞的癌基因表达水平有明显差异,在0.5 ～4.0 mmol/L TCE染毒时,CYP2E1高表达细胞的c-fos、k-ras和c-myc基因表达水平明显高于L02肝细胞,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）,升高幅度达25％～120％; CYP2E1高表达细胞的p53表达水平比正常肝细胞表达下降10％～50％,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.结论 TCE对正常肝细胞和CYP2E1高表达细胞凋亡基因和癌基因表达存在明显差异,提示CYP2E1是TCE在体内代谢的重要因素,与TCE毒性存在一定关系.
- 徐新云毛侃琅袁建辉吴德生黄海燕秦逍云谭琴
- 关键词：三氯乙烯肝细胞细胞色素P-450
- CYP1A2基因在三氯乙烯毒性中的作用研究
- 目的:应用分子克隆技术,建立CYP1A2基因沉默和CYP1A2基因高表达细胞株,研究CYP1A2基因对三氯乙烯(TCE)毒性的影响。方法:将TCE分别染毒L02肝细胞、CYP1A2基因沉默细胞和CYP1A2基因高表达细胞...
- 毛侃琅徐新云秦逍云谭琴
- 关键词：三氯乙烯凋亡基因癌基因
- 文献传递
- 3β-HSD基因沉默细胞株的建立及其对DEHP致凋亡的影响被引量：4
- 2019年
- 目的构建3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)基因shRNA慢病毒干扰载体,建立3β-HSD基因沉默细胞株,研究3β-HSD基因沉默对塑化剂邻苯二甲酸二-(2-乙基己)酯(DEHP)致凋亡的影响。方法根据GenBank提供的3β-HSD基因mRNA序列,设计合成3条干扰序列,退火后连接到PLVX-shRNA2-puro中,将重组慢病毒载体转染293FT细胞,收集病毒上清,感染MCF-7细胞。利用嘌呤霉素筛选得到3β-HSD沉默细胞株,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Westernblot)对干扰效果进行鉴定。用不同剂量DEHP对MCF-7细胞和3β-HSD沉默细胞染毒24h,检测凋亡基因Bax、Caspase-3、Caspase-8的基因和蛋白表达水平的变化。结果该实验插入慢病毒载体PLVX-shRNA2-puro中的3β-HSD基因干扰序列与设计的序列一致;3β-HSD沉默细胞中3β-HSD基因表达水平较对照组MCF-7细胞降低77%,3β-HSD蛋白表达水平较对照组MCF-7细胞降低74%。不同剂量DEHP染毒3β-HSD沉默细胞和MCF-7细胞后,qRT-PCR结果显示,MCF-7细胞中Bax基因表达水平较对照组(0mmol/LDEHP)升高28%~54%,Caspase-3基因表达水平升高13%~49%,Caspase-8基因表达升高21%~70%。与同染毒剂量组的MCF-7细胞比较,3β-HSD沉默细胞中Bax基因表达水平降低11%~28%,Caspase-3基因表达降低12%~23%,Caspase-8基因表达降低11%~34%。Westernblot结果显示,MCF-7细胞中BAX蛋白表达水平较对照组升高28%~61%,Caspase-3蛋白表达升高40%~48%,Caspase-8蛋白表达升高31%~84%。与同染毒剂量组的MCF-7细胞比较,3β-HSD沉默细胞Bax蛋白表达水平降低11%~27%,Caspase-3蛋白表达降低21%~40%,Caspase-8蛋白表达降低12%~25%。结论该研究成功构建了3β-HSD基因沉默细胞株。DEHP可引起细胞凋亡基因及蛋白表达升高,3β-HSD基因沉默能在一定程度上抑制DEHP对凋亡基因的活化。
- 王利秦逍云徐新云曾怀才郑凯王冰玉龙鼎新
- 关键词：基因沉默
- 超高效液相色谱-四极杆串联线性离子阱质谱法测定贝类中的脂溶性贝类毒素被引量：3
- 2021年
- 目的建立一种超高效液相色谱-四极杆串联线性离子阱质谱技术测定贝类食品中12种脂溶性贝类毒素的方法。方法贝类中12种脂溶性贝类毒素采用甲醇超声提取,经Strata-X固相萃取小柱净化,用含0.3%(V/V)氨水的甲醇洗脱后,0.22μm微孔滤膜过滤,经Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)(150 mm×2.1 mm,1.7μm)超高效液相色谱柱分离,选用乙腈-水(含0.01%氨水和2 mmol/L甲酸铵)为流动相,梯度洗脱分离12种脂溶性贝类毒素;在优化的串联四极杆质谱条件下,采用电喷雾电离源、正负离子同时扫描模式、多反应监测方式,外标法定量,采用信息依赖采集扫描功能结合增强子离子扫描模式对检出阳性结果进行定性分析。结果方法的线性范围为0.5~50μg/L,12种脂溶性贝类毒素在各种样品基质中均有良好的线性关系,相关系数(r)在0.9984~0.9999,方法检出限为0.15~0.29μg/kg;方法回收率为80.0%~116.0%,相对标准偏差为0.6%~6.4%(n=7)。结论该方法测定12种脂溶性贝类毒素的残留量简便、快速、定性准确,可以满足对贝类食品中脂溶性贝类毒素的监测要求。
- 刘红河秦逍云廖仕成康莉毛丽莎肖惠贞尹江伟
- 关键词：贝类
- 超高效液相色谱-串联质谱法同时检测中药材及植物性食品中23种有毒生物碱被引量：12
- 2022年
- 目的建立一种超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定中药材及植物性食品样品中23种有毒生物碱的检测方法。方法样品用氢氧化钠调节pH至7.5,加入硼砂-氢氧化钠缓冲液,乙酸乙酯萃取,氮吹近干后,用UPLC-MS/MS法同时对23种生物碱进行定性定量分析,外标法定量。结果在相应的质量浓度范围内,23种生物碱在不同基质样品中均有良好的线性关系,相关系数在0.9989~0.9999。全部样品回收率为61.2%~107.3%,相对标准偏差为1.1%~8.4%。各类样品检出限为0.01~0.40μg/kg,定量限为0.03~1.33μg/kg。结论本方法简单、准确、快速,可实现23种常见生物碱的多组分同时测定,为生物碱中毒的快速筛查和确证提供了检测时间上的优势,可用于疑似中药材和植物性食品生物碱中毒的应急事件处理,并为临床治疗提供技术支撑。
- 廖仕成李荷丽刘红河方舒正秦逍云
- 关键词：生物碱超高效液相色谱-串联质谱法中药材植物性食品
- DEHP对雄性大鼠激素相关基因表达水平的影响
- 目的:探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对雄性大鼠睾丸中激素相关基因表达水平的影响,为研究DEHP生殖毒性提供科学依据.
方法:40只5周龄雄性SPF级SD大鼠,随机分为对照组(玉米油)、DEHP低剂...
- 秦逍云徐新云谭琴吴德生黄海燕
- 关键词：邻苯二甲酸二乙基己酯睾丸组织
- 文献传递
- CYP1A2基因在三氯乙烯毒性中的作用研究
- 目的：应用分子克隆技术,建立CYP1A2基因沉默和CYP1A2基因高表达细胞株,研究CYP1A2基因对三氯乙烯(TCE)毒性的影响.方法：将TCE分别染毒L02肝细胞、CYP1A2基因沉默细胞和CYP1A2基因高表达细胞...
- 毛佩琅徐新云秦逍云谭琴
- 关键词：三氯乙烯凋亡基因癌基因
- 塑化剂DEHP对卵巢毒性作用和激素相关受体蛋白表达水平的影响
- 目的：探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对大鼠卵巢细胞超微结构和卵巢组织中黄体生成素受体(LHR)、促性腺激素释放激素受体(GnRHR)蛋白表达水平变化，为研究DEHP的雌性生殖毒性提供科学依据。方法：SPF级...
- 谭琴秦逍云徐新云黄海燕吴德生王利彭鹏
- 关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯生殖毒性激素受体
- DEHP对大鼠睾丸组织病理损害和超微结构的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)对雄性大鼠睾丸的病理损害和超微结构的影响。方法 5周龄雄性SD大鼠40只,随机分为对照组、DEHP低剂量组、DEHP中剂量组、DEHP高剂量组,每组10只,每天灌胃1次,每周5次,连续灌胃6周。于末次染毒24 h后处死动物,称量大鼠体重及睾丸湿重,并计算睾丸系数;苏木精-伊红染色(HE染色)后进行光镜和电镜检查。结果与对照组相比,DEHP中剂量组及高剂量组睾丸重量、睾丸脏器系数明显降低;病理检查发现,DEHP中剂量组及高剂量组睾丸支持细胞形成大量空泡,睾丸间质细胞异常增生,生精细胞严重脱落;电镜检查发现,DEHP中剂量组及高剂量组睾丸内线粒体断脊、脱颗粒,精细胞内的线粒体鞘异常,精原细胞内大量空泡。结论 DEHP可引起大鼠睾丸明显病理损害和超微机构改变,产生雄性生殖毒性。
- 秦逍云谭琴徐新云张倩马佺杨细飞
- 关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯睾丸超微结构生殖毒性
