顾蓓
- 作品数:87 被引量:359H指数:11
- 供职机构:中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国癌症基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- CCC-HPF-2细胞基因组DNA可作为STR分型标准物质被引量:2
- 2011年
- 目的检测细胞培养传代过程中的基因稳定性,筛选符合中国人遗传特性的DNA标准物质,建立DNA标准细胞库。方法通过显微镜下观察、免疫组织化学、核型分析检测细胞传代过程中形态、分子表达及核型是否稳定;应用PCR方法检测细胞的外源微生物及种属来源;STR检测验证细胞在传代过程中STR表达谱的平衡性及稳定性。结果 CCC-HPF-2细胞呈成纤维细胞样;波形蛋白表达阳性,CK阴性;无外源微生物污染;细胞来源于人;所有15个STR基因座都得到扩增,呈现较好的扩增平衡性,各代细胞STR表达谱一致,表现了高度稳定性。结论 CCC-HPF-2细胞来源于人,30代内的该细胞DNA可作为STR分型标准物质。
- 杨振丽卞晓翠刘玉琴王春景苏小玲顾蓓张宏
- 关键词:短串联重复序列STR细胞库标准物质
- CD133在人结肠癌细胞分化中的作用
- CD133分子在多种肿瘤包括结肠癌中都用来作为肿瘤干细胞的一个标记,但是它本身的的功能现在还不清楚。我们用Western blotting检测了44种人肿瘤细胞系中CD133的表达,8种肿瘤细胞系呈阳性表达,其中5个是结...
- 冯海凉杨丽娟卞晓翠杨振丽顾蓓张宏王春景苏小玲赵晓梅刘玉琴
- 关键词:CD133结肠癌肿瘤干细胞分化
- 文献传递
- 脑复聪对脂多糖激活的小胶质细胞合成环氧合酶-2和分泌前列腺素E_2作用的实验研究被引量:4
- 2013年
- 目的观察中药脑复聪(NFC)含药血清对脂多糖(LPS)激活后的小鼠神经小胶质细胞BV-2的形态、BV-2中环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达以及BV-2上清液中前列腺素E2(PGE2)分泌量水平的影响。方法将体外培养的小鼠神经小胶质细胞BV-2分成:正常对照组、LPS组、NFC血清组(高、中、低剂量)培养24h,用倒置相差显微镜观察细胞形态,蛋白印迹方法检测BV-2中COX-2蛋白的表达,酶联免疫吸附法测定培养BV-2上清液中PGE2蛋白的浓度。结果 (1)NFC各组对LPS所致的BV-2细胞形态变化均有一定的恢复作用。(2)LPS组BV-2中COX-2含量较正常对照组升高;与LPS组相比,NFC含药血清各剂量组COX-2蛋白含量均下降。(3)BV-2上清液中PGE2蛋白的浓度LPS组较正常对照组含量升高;与LPS组相比,NFC各剂量组PGE2含量均下降。结论 NFC含药血清可以显著下调LPS激活后BV-2中COX-2蛋白的表达量并显著减少BV-2上清液中PGE2的分泌量,减轻炎症反应,改善细胞形态。
- 崔雅忠景光婵张孟仁刘玉琴顾蓓
- 关键词:脂多糖小胶质细胞脑复聪
- 抗CD20单链抗体融合显性抗原肽的原核表达和其抑瘤活性研究被引量:2
- 2015年
- 目的:人工设计并表达美罗华(C2B8)单链可变区抗体与李斯特菌溶细胞素O(Listeriolysin O,LLO)显性抗原表位构成的重组融合蛋白(Sc Fv-p LLO),初步分析其抗淋巴瘤细胞活性。方法:查询数据库获得美罗华(C2B8)单抗VH和VL基因序列,构建抗CD20单链抗体(Sc Fv)基因序列,选取LLO的2个CD4+T细胞表位,构建单链抗体融合抗原表位的重组蛋白基因序列,克隆至原核表达载体,经诱导表达纯化,流式细胞术和免疫共沉淀分析其与淋巴瘤细胞结合能力,细胞增殖实验测定其对淋巴瘤细胞生长的影响,凋亡实验分析其诱导淋巴瘤细胞凋亡的能力,淋巴细胞增殖实验分析其免疫原性。结果:成功诱导表达重组蛋白Sc Fv-p LLO。Sc Fv-p LLO可不同程度地靶向结合不同淋巴瘤细胞系,并明显抑制Raji细胞生长和诱导其凋亡。Sc Fv-p LLO可刺激免疫小鼠脾细胞增殖。结论:重组蛋白Sc Fv-p LLO保留了Sc Fv的功能,可靶向结合和抑制CD20阳性淋巴瘤细胞的生长,同时可激活机体免疫应答,为进一步研究其模拟瘤细胞表面抗原和作为瘤细胞疫苗佐剂的功能奠定基础。
- 孙蕊朱琰冯海凉卞晓翠顾蓓王春景刘玉琴
- 关键词:CD20B细胞淋巴瘤
- ω-3多烯酸乙酯对肿瘤恶病质的影响及其机制被引量:1
- 2012年
- 目的临床上肿瘤恶病质的治疗十分棘手,初步的研究提示ω-3多不饱和脂肪酸本身作为免疫营养素具有改善肿瘤恶病质的功能。本研究应用在心血管疾病中广泛使用的ω-3多烯酸乙酯口服制剂来干预荷瘤小白鼠,探讨其对肿瘤恶病质的改善作用及机制。方法使用小白鼠结肠癌细胞株C-26皮下注射Balb/c小白鼠,构建荷瘤小白鼠肿瘤恶病质模型,将小白鼠分为3组:对照组(无荷瘤小白鼠组)、荷瘤无干预组和荷瘤ω-3多烯酸乙酯干预组,荷瘤ω-3多烯酸乙酯干预组小白鼠给予ω-3多烯酸乙酯(DHA、EPA>80%)灌胃(2 g.kg-1.d-1,体积<0.1 ml)。连续2周记录小白鼠饮食量、体质量及腓肠肌重量等指标,并比较各组肿瘤组织炎性因子IL-1β、IL-6的mRNA表达差异。结果ω-3多烯酸乙酯干预组相对于荷瘤无干预组可显著改善荷瘤小白鼠的体质量减轻程度,减少瘦肉体(腓肠肌)的丢失,并降低肿瘤组织的炎性因子IL-1β、IL-6的mRNA表达水平。结论口服ω-3多烯酸乙酯可以降低组织炎性因子表达,达到改善肿瘤恶病质的作用。
- 郭丹柳欣欣刘玉琴顾蓓徐锡霞
- 关键词:鱼油炎性因子肿瘤恶病质
- 金龙胶囊和蛇毒对小鼠子宫颈癌(U14)抗复发和转移的观察被引量:22
- 2000年
- 目的 观察鲜动物药金龙胶囊和蛇毒制剂对实验性手术后肿瘤局部复发和转移的作用。方法 以小鼠子宫颈癌 (U 14 )高转移肿瘤模型为对象 ,用金龙胶囊和蛇毒制剂进行实验性治疗 ,抑瘤率和抑制转移率为主要指标 ,与化疗组和对照组进行对比观察。结果 金龙胶囊对局部肿瘤复发两次抑制率各为 5 4.8%和 6 6 .3 % ;对转移抑制率各为5 0 %和 5 4%。蛇毒对局部肿瘤复发两次抑制率各为 5 4.4%和 6 8.3 % ;对转移抑制率各为 45 .8%和 6 6 .8%。结论 这两种鲜动物药制剂对实验性手术后治疗肿瘤局部复发及术后转移有显著的抑制作用。本实验对鲜动物药的临床应用提供了很有用资料。
- 刘玉琴赵雪梅顾蓓薛克勋李建生高进
- 关键词:鲜动物药金龙胶囊蛇毒子宫颈癌
- 槲皮素通过自噬途径减轻高糖致体外培养RSC96细胞的损伤被引量:8
- 2015年
- 目的观察槲皮素对高浓度葡萄糖培养的大鼠雪旺细胞系细胞(rat Schwann cell line,RSC96)自噬、增殖活性和凋亡的影响。方法高浓度葡萄糖(125 mmol/L)及槲皮素(25μmol/L)离体培养RSC96细胞,作用72小时后,噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞增殖活性,原位末端标记法[terminal dexynucleotidyl transferase(Td T)-mediated d UTP nick end labeling,TUNEL]评价凋亡,Western blot法检测caspase-9活化的P35亚基、caspase-3活化的P20亚基及自噬相关蛋白Beclin1的蛋白表达。结果高糖抑制离体培养的RSC96细胞的增殖活性,吸光度(optical density,OD)值降低,凋亡率增加,P35亚基、P20亚基蛋白表达上调(P<0.05,P<0.01);槲皮素能够增加高糖培养RSC96细胞的增殖活性,下调P35、P20蛋白表达及凋亡率(P<0.05,P<0.01)。然而当自噬被抑制后,槲皮素上述保护作用则被削弱,细胞死亡增多(P<0.01)。结论槲皮素通过增加自噬以促进RSC96细胞的增殖、减少凋亡,从而减轻高浓葡萄糖的损伤。
- 屈岭梁晓春顾蓓张宏石玥
- 关键词:自噬槲皮素雪旺细胞高浓度葡萄糖
- 槲皮素通过Akt-mTOR途径上调高糖培养RSC96细胞的自噬
- :探讨槲皮素对高糖离体培养的RSC96细胞自噬变化规律的影响. 方法:RSC96细胞培养于含有槲皮素的高糖培养基中,超微结构应用透射电子显微镜观察,用免疫荧光法、Western blot法检测Beclin1、LC3...
- 屈岭梁晓春顾蓓张宏戴成石玥
- 关键词:槲皮素雪旺细胞实验药理
- 转染反义6A8cDNA对人鼻咽癌细胞肺转移的抑制被引量:2
- 1999年
- 人鼻咽癌高肺转移克隆株CNE 2L2转染编码人α 甘露糖苷酶的cDNA( 6A8cDNA ,GenBank接受号为U3 72 48)的重组反义表达载体 ( pRc/CMV 反义6A8cDNA)后 ,与转染空载质粒pRc/CMV及未作任何转染的细胞相比 ,其生长受一定程度抑制 .接种于无胸腺鼠皮下 2个月 ,野型CNE 2L2细胞组有肺转移的小鼠数为 9/10 ( 90 % ) ,其中Ⅲ级 8只 ,Ⅱ级 1只 ;转染空载质粒pRc/CMV ,有肺转移者为6/8( 75 % ) ,其中Ⅲ级 1只 ,Ⅱ级 2只 ,Ⅰ级 3只 ;转染pRc/CMV 反义 6A8cDNA ,有肺转移者为 3 /10 ( 3 0 % ) ,全部为Ⅰ级 .
- 张立新刘玉琴马凤蓉顾蓓史耕先赵雪梅李波高进赵方萄张淑珍李国燕王讯朱立平
- 关键词:CDNA转染鼻咽癌细胞株肺转移
- 应用聚合酶链式反应进行实验细胞来源的种属鉴定
- 目的应用聚合酶链式反应(PCR法)鉴定常见细胞来源的种属,以判断培养细胞是否存在种间的交叉污染。方法离心柱法提取待检测细胞的基因组DNA;针对人、小鼠、大鼠、中国仓鼠、叙利亚仓鼠、非洲绿猴、兔、猪、牛、狗等十种常见细胞来...
- 卞晓翠刘玉琴王春景苏小玲赵晓梅顾蓓张宏
- 关键词:聚合酶链式反应细胞培养种属鉴定
- 文献传递