李青
- 作品数:18 被引量:37H指数:4
- 供职机构:重庆医科大学脂糖代谢性疾病重庆市重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生政治法律理学更多>>
- 炎症对脂肪酸负荷的肾细胞FAT/CD36表达的影响被引量:5
- 2012年
- 目的:观察炎症是否干扰脂肪酸负荷的肾细胞[人系膜细胞(HMCs)和肾小管上皮细胞HK-2]脂肪酸转运蛋白(FAT/CD36)的表达。方法:分别给予不同浓度软脂酸(0 mmol/L、0.02 mmol/L、0.04 mmol/L、0.08 mmol/L、0.16 mmol/L、0.32 mmol/L)处理HMCs和HK-2细胞24 h。采用实时定量PCR和Western blotting方法检测细胞FAT/CD36的mRNA及蛋白的表达。进一步选取0.04 mmol/L软脂酸联合炎症因子(25μg/L TNF-α或20μg/L IL-6)处理肾细胞24 h后,观察炎症因子对肾细胞FAT/CD36 mRNA及蛋白表达的影响;油红O染色及酶比色法检测细胞甘油三酯(TG)水平;ELISA检测细胞游离脂肪酸(FFA)含量。结果:软脂酸呈浓度依赖性上调HMCs和HK-2细胞FAT/CD36 mRNA和蛋白表达。炎症因子明显刺激脂肪酸负荷的肾细胞FAT/CD36mRNA和蛋白表达进一步增加。油红O染色及胞内TG和FFA含量测定显示炎症因子促进肾细胞脂质积聚。结论:炎症上调脂肪酸负荷的肾细胞FAT/CD36表达,加重胞内脂质积聚。
- 万克强廖俊蕾赵蕾李青陈压西阮雄中
- 关键词:系膜细胞HK-2细胞炎症
- 炎症对脂肪酸负荷的肾细胞FAT/CD36表达的影响
- 目的:脂肪酸转运酶(FAT/CD36)在调节脂肪酸在肾脏的跨膜转运起到重要作用。正常状态下,FAT/cD36作为B类清道夫受体在巨噬细胞有高表达,若在内皮细胞、肾小管上皮细胞等上有表达增强,则提示与一些病理改变有关。炎症...
- 万克强廖俊蕾赵蕾李青陈压西阮雄中
- 关键词:炎症肾细胞基因表达
- 文献传递
- 高脂饮食对C57BL/6J小鼠肝脏组织糖异生的影响被引量:2
- 2013年
- 目的:研究高脂饮食对C57BL/6J小鼠肝脏组织糖异生的影响。方法:将8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为普通饮食组和高脂饮食组。饲养14周后处死,收集血清和肝脏组织,ELISA和酶学方法检测血清与肝脏组织中甘油三脂(triglyceride,TG)、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量,测定血清中胰岛素水平;过碘酸-希夫(periodic acid-Schiff,PAS)染色观察肝细胞糖原颗粒;实时定量PCR和Western blot分别检测肝脏组织糖异生相关的磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate car-boxykinase,PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸激酶(glucose-6-phosphatase,G-6-Pase)的基因和蛋白表达水平;葡萄糖耐量实验评价小鼠胰岛素抵抗程度。结果:饲养14周后,高脂饮食组小鼠体质量较普通饮食组明显增加;与普通饮食组相比,高脂饮食组小鼠血清与肝脏组织中TG、FFA含量明显增加;PAS染色表明高脂饮食组肝脏糖原含量明显增多;基因和蛋白检测结果显示高脂饮食组肝脏组织中糖异生相关的基因、蛋白表达增加;同时空腹血糖及血清胰岛素明显增加;葡萄糖耐量实验异常,血糖峰值延迟。结论:高脂饮食使C57BL/6J小鼠肝脏组织PEPCK、G-6-Pase表达增加,糖异生增加,导致空腹血糖增加,葡萄糖耐量受损。
- 杜琳敏赵蕾李青阮雄中陈压西
- 关键词:高脂饮食肝脏组织糖异生
- 血液中痕量乙醇代谢物:乙基葡萄糖醛酸苷的气相色谱质谱法测定
- 2011年
- 目的建立气相色谱质谱(GC-MS)检测人体血液中乙醇代谢产物乙基葡萄糖醛酸苷(EtG)的方法。方法 1 ml乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)抗凝全血离心后取上层血浆,采用高氯酸去蛋白,并经氨基固相萃取小柱富集净化,提取物经BSTFA+TMCS(99∶1,v/v)衍生化,采用气相色谱-质谱法检测,总离子和选择离子模式(SIM)同时扫描,内标法定量分析。结果样品在0.2~4.0 mg/L范围内线性关系良好(0.998 8),检出限为0.17 mg/L,绝对回收率位于75.3%~85.6%之间,相对标准偏差(RSD)为5.6%~7.6%。结论该方法灵敏度高,特异性好,分析结果准确可靠,适用于法医学鉴定和临床检验中EtG的分析测定。
- 于天晓李青李剑波丁世家
- 关键词:气相色谱-质谱
- 单次负荷量他汀对稳定型心绞痛患者PCI术后炎症反应、血小板活性及心脏事件的影响
- 背景经皮冠状动脉介入术,即(percutaneous coronaryintervention,PCI),在开通病变血管、恢复血供的同时亦可能会引起血管内皮完整性受破坏,造成内膜下基质暴露,血小板活化并释放出血栓素A2等...
- 李青
- 关键词:血小板活化主要不良心脏事件
- 文献传递
- 基于invA基因的电化学DNA传感器的构建及用于沙门氏菌快速高灵敏的检测
- 沙门氏菌,是世界范围内最常见的食源性致病菌之一,主要通过污染的动物性食品(主要有肉类、家禽、蛋类和牛奶)传播。致病性沙门菌主要引起人类和动物的食物中毒、胃肠炎、伤寒和败血症等疾病,沙门氏菌不仅是公共卫生健康的重大问题,还...
- 李青
- 关键词:电化学生物传感器细菌检测沙门氏菌聚合酶链式反应
- 文献传递
- 沉默胆固醇调节原件结合蛋白2基因对炎症因子所致HepG2细胞内胆固醇异常积聚的影响被引量:4
- 2012年
- 目的探讨沉默胆固醇调节原件结合蛋白(SREBP)2对炎症因子所致HepG2细胞内脂质异常积聚的影响。方法通过脂质体转染SREBP2-shRNA质粒、G418抗性筛选HepG2细胞,建立沉默SREBP2的HepG2稳定细胞株(SREBP2 shRNA-HepG2)及阴性对照质粒HepG2稳定细胞株(NC shRNA—HepG2)。对两种细胞分别给予无血清培养处理(对照组)、炎症因子[肿瘤坏死因子(TNF)α 20ng/ml]、高脂[低密度脂蛋白(LDL)100μg/ml]和联合干预(20ng/ml TNFα+100μg/ml LDL)处理。油红O染色及酶法检测细胞中脂质积聚情况,实时定量PCR和Western blot分别检测SREBP2及其下游靶基因低密度脂蛋白受体(LDLr)和3-羟-3-甲基戊二酰辅酶A(HMGCoA)还原酶的基因和蛋白表迭隋况。对数据用单因素方差分析及2×2×2析因设计方差分析比较。结果成功建立阴性对照稳定细胞株NC shRNA—HepG2及抑制SREBP2表达的稳定细胞株sREBP2 shRNA—HepG2。在NC shRNA—HepG2细胞中,TNFα处理使细胞内胆固醇积聚增加,并能上调SREBP2下游靶基因LDLr、HMGCoA还原酶基因和蛋白的表达,其mRNA相对表达量分别为1.68±0.03、1.31±0.05,F值分别为107.42,59.08,P值均〈0.01;其蛋白相对表达量分别为1.49±0.10、1.54±0.06,F值分别为46.24,247.10,P值均〈0.01。而在SREBP2 shRNA—HepG2细胞中,TNFα对胞内胆固醇沉积的作用可以被明显减弱,进一步基因和蛋白检测结果显示,炎症因子TNFα对LDLr、HMGCoA还原酶的上调作用亦被明显抑制。结论炎症因子通过促进SREBP2及其下游靶基因表达致HepG2细胞内胆固醇异常积聚,而通过RNA干扰抑制SREBP2的表达,可以明显减轻炎症因子所致的细胞内胆固醇的异常积聚。
- 廖梭蕾赵蕾陈曜李青陈昱杨阮雄中陈压西
- 关键词:脂肪肝胆固醇肿瘤坏死因子
- 炎症干扰PPARγ-LXRα-ABCA1途径介导的肾小球系膜细胞胆固醇外流被引量:7
- 2010年
- 目的:观察炎症能否干扰过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)-肝X受体α(LXRα)-三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)途径介导的人肾小球系膜细胞(HMCs)的胆固醇外流。方法:将HMCs分为4组:对照组、高脂组[细胞给予100 mg/L低密度脂蛋白(LDL)处理]、炎症组[细胞给予20μg/L肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理]、联合干预组(细胞给予20μg/L TNF-α+100 mg/L LDL处理)。采用实时定量PCR和W esternb lotting方法检测PPARγ、LXRα和ABCA1的mRNA及蛋白表达水平。用[3H]标记胆固醇,液体闪烁计数法检测胆固醇外流量。用油红O染色法及化学酶促-比色法观察HMCs中脂质积聚情况。结果:与对照组相比,高脂组PPARγ、LXRα和ABCA1 mRNA及蛋白的表达明显增加,单纯的炎症刺激可下调它们的表达,而联合干预组中上述各基因和蛋白表达量比高脂组明显下降。胆固醇外流测定结果显示:与对照组相比,高脂组胆固醇外流量增加,而炎症组胆固醇外流量降低,联合干预组比高脂组胆固醇外流量明显减少。油红O染色提示联合干预组细胞内脂质积聚明显高于其余3组。细胞内胆固醇含量测定亦显示炎症能进一步加重胞内脂质积聚。结论:炎症因子可通过抑制PPARγ-LXRα-ABCA1表达导致HMCs胆固醇外流减少,加重细胞内脂质积聚。
- 陈昱杨陈曜赵蕾李青阮雄中陈压西
- 关键词:炎症三磷酸腺苷结合盒转运体A1人肾小球系膜细胞胆固醇外流
- 固相萃取-气相色谱-质谱法检测尿液中乙基葡萄糖醛酸苷被引量:2
- 2011年
- 建立了固相萃取(SPE)-气相色谱-质谱(GC-MS)检测尿液样本中乙基葡萄糖醛酸苷(EtG)的方法。1 mL尿液样本经100μL 3 mol/L盐酸去蛋白后,通过SPE法提取上清液中的目标物质及内标,提取物经衍生化后,采用GC-MS检测,选择离子模式(SIM)扫描,内标法定量分析。该方法在0.1~3.2 mg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数(r)为0.992 1,检出限为28.4μg/L,绝对回收率范围为92.5%~108.7%,相对标准偏差均小于5%。实验结果表明该法灵敏度高、特异性好、分析结果准确可靠,适用于法医学鉴定和临床检验中对EtG的分析测定。
- 于天晓李青万涛李剑波丁世家
- 关键词:固相萃取气相色谱-质谱衍生化
- ET-1促进CD133+卵巢癌干细胞血管新生的机制研究
- 目的:研究卵巢癌3AO细胞系中CD133+细胞的生物学特征和比例,探索CD133+细胞通过响应内皮素-1(ET-1)作用促进卵巢血管新生的机制。 方法:通过免疫磁珠方法分离卵巢癌3AO细胞系中CD133+肿瘤干细胞,利...
- 李青
- 关键词:卵巢癌生物学特征内皮素-1