李建芳
- 作品数：43 被引量：39H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金国家科技支撑计划昆明市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 一种新型双抗原1型糖尿病疫苗及其制备方法
- 本发明涉及一种新型双抗原1型糖尿病疫苗及其制备方法，将人源性GAD65<Sub>1‑585</Sub>氨基酸序列与人源性INS<Sub>1‑110</Sub>氨基酸序列使用连接序列连接通过乳酸菌密码子偏好优化后5’端引入...
- 孙静赵修涛胡云章李腾蛟谢孟鑫施建东李建芳李彦涵乌美妮
- 壬二酸的应用、含有壬二酸的佐剂和疫苗剂
- 本发明涉及壬二酸的应用、含有壬二酸的佐剂和疫苗剂，所述壬二酸作为佐剂在疫苗中的用量为：每单份疫苗液中含有0.5～3mg的壬二酸。含有壬二酸的佐剂，由5～30μL的浓度为75v/v%的乙醇和0.5～3mg的壬二酸组成。本发...
- 胡云章李晓红王海漩胡凝珠乌美妮孙静李彦涵李建芳施建东
- 重组人LIF融合蛋白表达纯化及其活性鉴定
- 2013年
- 目的:原核表达重组hLIF融合蛋白并进行诱导表达、纯化及活性鉴定。方法:将hLIF基因克隆至pThioHisA载体,构建融合表达载体pThioHisA-hLIF,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经亲和层析后,Western blot检测目的蛋白的特异性。用小鼠胚胎干细胞脱饲养层培养对纯化后的重组hLIF融合蛋白进行生物活性的鉴定。结果:降低诱导温度和延长诱导时间能增加hLIF融合蛋白的可溶性表达,纯化后的重组蛋白纯度大于95%,Western blot检测显示了良好的特异性。在脱饲养层细胞培养条件下,添加纯化的hLIF融合蛋白能够有效的维持小鼠胚胎干细胞的未分化状态。结论:重组hLIF融合蛋白可在大肠杆菌中高效表达,具有良好的特异性,为干细胞研究及hLIF蛋白的其他功能研究奠定了基础。
- 孙静王斌段志青胡凝珠李建芳李彦涵胡云章
- 关键词：小鼠胚胎干细胞生物活性鉴定
- 幽门螺杆菌napA基因在乳酸菌中的表达及免疫原性分析被引量：14
- 2008年
- 实验目的是在乳酸菌中表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)中性粒细胞激活蛋白(NAP),口服免疫小鼠后检测其免疫原性。在实验中利用了分子克隆技术构建携带nap基因的重组原核表达质粒pNICE:sec-nap,将重组质粒转化乳酸菌NZ9000株,筛选鉴定阳性菌落,诱导表达的NAP蛋白用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。将雌性ICR(CV级)小鼠随机分为4组,分别用PBS、携带空质粒的乳酸菌、携带pNICE:sec-nap的乳酸菌、灭活的H.pylori灌胃。免疫7次后检测其特异性IgG和IgA的产生。成功扩增了nap基因并构建了重组原核表达质粒pNICE:sec-nap,转化乳酸菌NZ9000后经nisin诱导可表达Mr约17kDa的重组蛋白,表达量约占菌体总蛋白量的9.5%,表达的蛋白能与兔抗H.pylori血清特异性反应,具有良好的免疫原性。携带pNICE:sec-nap质粒的乳酸菌刺激产生的IgG水平明显高于携带空质粒组,与灭活H.pylori组没有明显的差异,但其刺激产生的IgA水平明显高于其他组。结果说明表达NAP蛋白的乳酸菌口服免疫小鼠后,能够刺激小鼠产生特异的IgG和IgA,对幽门螺杆菌疫苗的研究开发具有理论的意义。为乳酸菌作为抗原递送载体的研究和H.pylori口服疫苗的开发提供一定的实验基础。
- 李建芳彭正华肖红剑罗娜杨增福李健峰徐维明
- 关键词：幽门螺杆菌乳酸乳球菌中性粒细胞激活蛋白
- 新型疫苗佐剂关键技术创建及应用
- 胡云章胡凝珠孙静王海漩乌美妮施建东李彦涵李建芳孙晓梅段志清兰芸
- 项目组自2003年至今，在“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”等6项国家及云南省科技计划项目支持下，针对传统疫苗佐剂筛选仅靠“试错法”筛选的简单模式、缺乏充分理论依据的问题，建立了新型佐剂主动筛选理论模式，为筛选疫苗佐...
- 关键词：
- 关键词：疫苗佐剂中医药理论分子标志物传染病防治
- 甲磺酸去铁胺佐剂及含甲磺酸去铁胺佐剂的疫苗
- 本发明提供一种甲磺酸去铁胺佐剂及含有甲磺酸去铁胺佐剂的疫苗。所述含甲磺酸去铁胺佐剂的疫苗是：每单份疫苗剂中含有0.6～8mg的甲磺酸去铁胺佐剂。甲磺酸去铁胺佐剂长期应用于临床治疗，毒副作用小，在免疫剂量范围内使用是安全可...
- 胡凝珠罗婷王海漩胡云章李彦涵李建芳
- 文献传递
- 甘草酸二铵佐剂及含甘草酸二铵佐剂的疫苗
- 本发明提供一种甘草酸二铵佐剂及含有甘草酸二铵佐剂的疫苗。所述含有甘草酸二铵佐剂的疫苗是：每单份疫苗剂中含有0.1mg～1mg的甘草酸二铵佐剂。本发明提供的佐剂效果良好、成本低廉、性质稳定、安全可靠，可以作为疫苗佐剂。该佐...
- 胡凝珠王霄王海漩胡云章李彦涵李建芳
- 文献传递
- 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸与氢氧化铝联合佐剂对HBsAg诱导小鼠体液免疫应答的影响被引量：3
- 2012年
- 目的研究烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)与氢氧化铝联合佐剂对HBsAg诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法将NAD与氢氧化铝按不同剂量联合后,与不同剂量的HBsAg混合,分别经肌肉注射免疫ICR小鼠1针或2针(间隔2周),每只注射0.2 ml,并设阴性对照组(生理盐水)、单纯抗原对照组、单纯铝佐剂对照组和单纯NAD对照组,共23组,每组6只。分别于末次免疫后2、4、6、8、10、12周采血,分离血清,采用ELISA法检测小鼠血清中抗HBsAg IgG水平;试验期内,观察小鼠是否发生异常状况;14周后,取最佳剂量免疫组及阴性对照组小鼠心、肝、脾、肺组织做组织切片,进行病理分析。结果阴性对照组在各时间点均未检测到抗HBsAg IgG抗体,除联合佐剂12组外,其余各组血清抗HBsAg IgG抗体水平均在末次免疫后第6周达峰值,随着时间的延长,抗体水平呈下降趋势;联合佐剂14组(HBsAg 2μg+氢氧化铝100μg+NAD 2.5μg)产生的抗体水平最高,且持续时间较长,其对HBsAg的体液免疫增强效应显著优于单纯抗原对照组、单纯铝佐剂对照组及单纯NAD佐剂对照组(P<0.05)。试验期内,各组小鼠均未出现异常反应;最佳剂量免疫组(14组)及阴性对照组组织切片观察结果显示,均为发生病变。结论 NAD与氢氧化铝联合佐剂能显著增强HBsAg诱导的小鼠特异性体液免疫应答,在免疫剂量范围内,联合佐剂安全性良好。
- 王琳王海漩李建芳李彦涵胡凝珠胡云章
- 关键词：NAD氢氧化铝佐剂乙型肝炎表面抗原体液免疫应答
- 广谱流感噬菌体微球疫苗对豚鼠的免疫保护作用
- 2011年
- 目的探讨广谱流感噬菌体微球疫苗对分别感染H3N2、H1N1和B型流感病毒豚鼠的免疫保护作用。方法以广谱流感噬菌体微球疫苗免疫豚鼠,1个月后采血,间接ELISA法检测豚鼠血清中抗流感病毒IgG抗体的滴度;并于采血后3 d,经滴鼻途径分别攻击3个型别的流感病毒,攻击后3 d,检测豚鼠鼻腔洗液和肺组织中的病毒滴度。结果免疫豚鼠血清中均能检测出抗H1N1、H3N2和B型流感毒株的IgG抗体;分别以H3N2、H1N1和B型流感病毒攻击后3 d,在疫苗组豚鼠鼻腔洗液中检出少量病毒,而肺组织中则未检出,空白对照组豚鼠鼻腔洗液和肺组织中均检出较大量的流感病毒。结论广谱流感噬菌体微球疫苗对感染H3N2、H1N1和B型流感病毒的豚鼠均具有一定的免疫保护效果。
- 王海漩乌美妮汤洋李建芳李彦涵胡云章赵蕊蕊沈霏段志青胡凝珠
- 关键词：流感病毒A型H3N2亚型流感病毒A型H1N1亚型流感病毒B型噬菌体
- 甘油-3-磷酸的应用、含有甘油-3-磷酸的佐剂和疫苗剂
- 本发明公开甘油‑3‑磷酸的应用、含有甘油‑3‑磷酸的佐剂和疫苗剂，甘油‑3‑磷酸作为佐剂在疫苗中的用量为：每单份疫苗液中含有1～8mg的甘油‑3‑磷酸。含有甘油‑3‑磷酸的佐剂，由54μL的生理盐水和1～8mg的甘油‑3...
- 胡凝珠金晓胡云章孙静乌美妮李建芳李彦涵施建东
- 文献传递
