方志锴 作品数:37 被引量:42 H指数:3 供职机构: 福建省微生物研究所 更多>> 发文基金: 福建省自然科学基金 “重大新药创制”科技重大专项 福建省属公益类科研院所基本科研专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
一种嗜铁素类化合物Fradiamine C及其发酵菌株与发酵方法 本发明属于微生物发酵技术领域,具体涉及一种新型嗜铁素类化合物,并进一步公开了可发酵所述化合物的链霉菌,以及基于所述菌株进行发酵制备所述嗜铁素类化合物的方法。本发明所述嗜铁素类化合物Fradiamine C为新型结构嗜铁素... 陈名洪 江红 陈建伟 呙瑜琪 方志锴海洋青铜小单孢菌FIM 02-523全基因组测序及分析 被引量:1 2018年 青铜小单孢菌(Micromonospora chalcea, M. chalcea)FIM 02-523能够合成对乏氧肿瘤细胞、艰难梭菌等具有活性的环脂肽类化合物rakicidins。利用Illumina HiSeq高通量测序平台,本研究首次对M. chalcea FIM 02-523进行全基因组测序,得到总长约6.74Mb的序列信息。分析表明基因组GC含量为72.89%,包含了6167个蛋白编码序列。利用AntiSMASH预测基因组中存在19个生物合成基因簇。结合PKS/NRPS生物合成特征和rakicidins化学结构特点,定位到了rakicidins的生物合成基因簇,并初步推测其生物合成途径。研究为M. chalcea FIM 02-523的功能基因组学研究和代谢调控提供了理论基础。 方志锴 江红 林风 连云阳关键词:FIM 全基因组测序 生物合成基因簇 生物合成途径 一种发酵产Rakicidin B的海洋小单孢菌株及其应用 本发明属于微生物发酵技术领域,具体涉及一种发酵产Rakicidin B的海洋小单孢菌株及其应用。本发明通过对现有产Rakicidins化合物的海洋小单孢菌株FIM02523进行诱变育种,得到一株高产Rakicidin B... 周剑 林风 江红 连云阳 江宏磊 陈丽 赵薇 方志锴文献传递 嗜盐糖单孢菌FIM SY0001-1次级代谢产物的研究 被引量:3 2017年 目的本研究对采自青海湖的嗜盐糖单孢菌FIM SY0001-1发酵液中的次级代谢产物进行提取分离纯化。方法采用大孔树脂吸附、硅胶柱层析、反相柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20及制备HPLC等方法分离纯化次级代谢产物,并通过MS和NMR等数据解析其结构。结果从该菌株发酵液中分离纯化得到6个化合物,其结构分别鉴定为N-甲基-3-甲酰胺-1H-吲哚(1)、N-乙酰基色胺(2)、β-卡巴林(3)、(Z)-9-十八碳烯酸(4)、(Z)-9-十八碳烯酸甲酯(5)、甘油醇-α-单油酸酯(6)。结论 6个化合物均为首次从该种糖单孢菌中分离得到。活性分析表明生物碱1~3具有一定的抑菌活性。 陈丽 赵薇 陈名洪 方东升 方志锴 江红 连云阳关键词:分离纯化 抑菌活性 大环内酯类化合物产生菌的基因筛选及其代谢产物研究 被引量:6 2017年 应用Ⅰ型聚酮合酶(PKS-I)基因筛选体系从32株海洋放线菌中寻找大环内酯类化合物的潜在产生菌,通过DNA序列相似性比对从5株阳性菌株中筛选获得了游动放线菌Actinoplanes sp.FIM060065。采用HPLC制备色谱从该菌株发酵液中分离纯化得到一个大环内酯类化合物FW060065,紫外、质谱以及核磁共振波谱分析表明它与台勾霉素B同质,药敏实验表明其对艰难梭菌、消化链球菌、双歧杆菌等革兰氏阳性厌氧菌显示出较强的抗菌能力。本研究通过基因筛选获得了台勾霉素的产生菌及其相应的代谢产物,为Ⅰ型聚酮合酶基因与大环内酯类化合物之间的联系提供了证据。 江宏磊 方志锴 陈名洪 彭飞 江红 连云阳关键词:聚酮合酶 基因筛选 代谢产物 海洋青铜小单孢菌菌FIM02-523全基因组序列测定及分析 周剑 方志锴 孙菲31-去甲氧基-他克莫司的突变生物合成 2017年 目的通过突变生物合成获得31-去甲氧基-他克莫司。方法针对大环内酯类免疫抑制剂他克莫司的聚酮链起始底物4,5-二羟基-1-烯-环己酸(DHCHC)合成酶fkbO基因,构建基因敲除载体pFIM412-fkbO并对他克莫司产生菌Streptomyces sp.FCZ-0311 fkbO基因进行框内缺失。结果获得突变株Streptomyces sp.OD14-1,经摇瓶发酵和产物HPLC分析,该突变株完全丧失了合成他克莫司的能力。在OD14-1摇瓶发酵36h后添加DHCHC类似物反式-4-羟基环己烷羧酸,发酵6d后经HPLC-MS检测发现分子量为773的他克莫司衍生物31-去甲氧基-他克莫司。结论构建了可用于他克莫司突变生物合成的基因工程菌Streptomyces sp.OD14-1,并通过外源物质的添加获得31-去甲氧基-他克莫司。 方志锴 吴声栋 江红 严凌斌 连云阳关键词:他克莫司 一种发酵产Rakicidin A的海洋小单孢菌株及其应用 本发明属于微生物发酵技术领域,具体涉及一种发酵产Rakicidin A的海洋小单孢菌株及其应用。本发明通过对现有产Rakicidins化合物的海洋小单孢菌株FIM02523进行诱变育种,得到一株高产Rakicidin A... 周剑 林风 江红 连云阳 江宏磊 陈丽 赵薇 方志锴文献传递 一株链霉菌的鉴定及其产格尔德霉素的发酵工艺研究 2024年 【目的】对链霉菌Streptomyce sp.FIM18-0592进行菌种鉴定,并对其胞外格尔德霉素产量进行发酵工艺优化,旨在提高产量并降低发酵成本。【方法】通过形态特征、培养特征和生理生化特性,结合16S rDNA序列分析构建系统发育树进行菌种鉴定;采用单因素试验优化培养条件及培养基配方,进一步使用最陡爬坡试验和响应面试验优化培养基配方的含量。【结果】通过对链霉菌FIM18-0592的形态特征、培养特征及生理生化特征进行初步培养观察发现,其在ISP2等培养基上生长较好,气生菌丝旺盛,产黑色素。结合16S rDNA分子鉴定,确定该菌为格尔德霉素链霉菌(Streptomyces geldanamycininus)。通过单因素试验对发酵条件以及培养基配方进行优化,得到最适宜菌株发酵的培养条件为转速140 r/min、装液量12%(体积分数)、接种量7%(体积分数)、培养时间144 h。最佳的碳源、氮源、无机盐分别为葡萄糖、黄豆饼粉和硫酸铵。采用最陡爬坡试验和响应面优化试验确定了其最优的发酵培养基为:葡萄糖10.42%、黄豆饼粉1.68%、硫酸铵0.3%、乳酸0.3%、甘油4%、硫酸镁0.1%、碳酸钙0.4%,在此条件下,格尔德霉素的发酵效价达到2887μg/mL,较原始发酵工艺效价提高了66%。【结论】链霉菌FIM18-0592为格尔德霉素链霉菌,通过对其发酵工艺进行优化显著提高格尔德霉素的产量,为格尔德霉素及其衍生物的开发和利用奠定基础。 杨鹭 袁源 方志锴 林如 江红 周剑关键词:格尔德霉素 菌种鉴定 发酵优化 响应面试验 小单孢菌FIM060152中抗肿瘤活性成分的提取分离纯化 被引量:1 2017年 本文是探讨分离和提取纯化小单孢菌FIM060152发酵液中的抗肿瘤抗生素的方法。实验采用HZ816大孔吸附树脂柱层析、萃取、硅胶柱层析、半制备色谱等方法对菌株FIM060152的发酵液中次级代谢产物进行提取分离纯化,获得化合物FIM060152-C1。理化性质和UV、MS以及NMR波谱分析结果表明化合物FIM060152-C1为Calicheamicinγ_1~I。化合物FIM060152-C1的抗肿瘤活性通过DNA断裂法进行检测,其断裂质粒pBR的最低浓度约为0.20μg/mL。 陈丽 林如 王海龙 方志锴 江红 连云阳关键词:分离纯化