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顾全保: 作品数：22 被引量：228H指数：8; 供职机构：复旦大学上海市针灸经络研究中心更多>>; 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学自然科学总论文化科学更多>>

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黄芪对感染病毒大鼠心肌细胞L型钙通道的效应被引量：43: 1998年; 目的:了解黄芪对感染柯萨奇病毒心肌细胞 L 型钙通道的影响,以探讨黄芪用于心肌炎治疗的作用机制。方法:以柯萨奇 B_3病毒感染急性分离的成年大鼠心肌细胞,利用膜片钳技术记录 L 型钙通道电流。结果:黄芪不影响正常心肌细胞 L 型钙通道电流的幅度,但可减缓 L 型钙通道电流的衰减。病毒感染增加心肌细胞 L 型钙通道电流的幅度,并改变其电压依赖性而使电流电压曲线向左下偏移。黄芪可抑制病毒感染细胞 L 型钙通道电流的增加。结论:黄芪通过抑制感染细胞经 L 型钙通道的跨膜钙内流和稳定 L 型钙通道的作用,可防止病毒感染可能导致的细胞内钙超载和异常电活动。; 刘恭鑫杨英珍顾全保郭棋虞勇; 关键词：膜片钳柯萨奇

用于针刺穴位研究的结缔组织片模型被引量：5: 2009年; 目的:先前研究发现,穴区功能与穴区结缔组织结构有密切关系,本文旨在建立基于穴区原位组织上的膜片钳研究方法。方法:急性分离出SD大鼠"后三里"穴皮下结缔组织,并安置在含有孵育液的浴槽内。组织片内肥大细胞可用甲苯胺蓝或中性红进行标记。在膜片钳实验中,通过记录电极对组织片内原位肥大细胞施加-30、-60和-90 cmH2O的负压刺激,并记录细胞上机械激活性全细胞电流。结果:制备的皮下结缔组织片标本经甲苯胺蓝或中性红染色显示,肥大细胞散在分布于组织片中的基质中。肥大细胞脱颗粒现象也能通过染色清晰可见。膜片钳记录表明穴区组织片肥大细胞的全细胞电流随着机械负压的施加而增大。结论:大鼠穴区皮下结缔组织片原位肥大细胞全细胞电流能被机械刺激激活。结合显微技术和电生理技术,大鼠"后三里"穴区皮下结缔组织片可以做为研究针刺效应外周机制的一种模型,并提示穴位肥大细胞可能参与针刺过程中机械信号的转导。该模型也可为今后进一步在细胞水平上研究穴位中细胞、胶原纤维、蛋白多糖等各成分的特性及其之间的相互作用提供基础。; 汪丽娜Wolfgang Schwarz顾全保丁光宏; 关键词：针刺肥大细胞膜片钳

通过构建嵌合分子研究mEAAC1和mASCT1的底物结合区域: 1998年; 采用重组ＰＣＲ的方法，构建了小鼠兴奋性氨基酸转运蛋白家族２种亚型ｍＥＡＡＣ１和ｍＡＳＣＴ１的ｃＤＮＡ嵌合分子，通过体外转录成ｃＲＮＡ，显微注射亚洲爪蟾卵母细胞中外源表达后，用同位素示踪技术进行＾３－Ｇ和＾３Ｈ－Ｓｅｒ流量测定，结果表明，该２种转运蛋白的－ＮＨ２末端及其相邻的部分可能不含有决定底物特异性的氨基酸，它们也许仅对底物结合位点的形成起结构支持作用。; 李静彭基斌费俭黄芳顾全保郭礼和; 关键词：嵌合分子神经递质

新生小鼠兴奋性氨基酸转运蛋白家族成员cDNA的克隆和分析: 2000年; 兴奋性氨基酸转运蛋白家族包含几种结构相似的膜蛋白,它们在终止谷氨酸的突触传递作用,维持神经系统正常的递质水平起重要作用。为了在同一物种中研究这些蛋白和基因的功能,本工作对新生小鼠脑的兴奋性氨基酸转运蛋白家族成员进行了克隆,获得了3个谷氨酸转运蛋白亚型(mGLAST-1,mGLT-1,mEAAC1)和一个中性氨基酸转运蛋白(mASCT1)的cDNA,其中在小鼠中mASCT1序列为首次发表。序列分析表明,mASCT1cDNA的长度为3787hp,编码一个532个氨基酸残基的蛋白,和人的ASCT1蛋白序列有89.3%的同源性,用非洲爪蟾卵母细胞表达系统证实了它具有转运丝氨酸的活性。同时,我们的研究表明,兴奋性氨基酸转运蛋白mRNA的5’UTR和3’UTR普遍存在组成和长度的不均一性,这种现象可能提示该家族成员的基因表达具有转录后调控机制。; 彭基斌费俭黄芳金小平顾全保郭礼和; 关键词：兴奋性氨基酸基因克隆

维拉帕米对CVB_3感染心肌细胞Ca^(2+)内流及CVB_3-RNA含量的影响被引量：1: 1996年; 观察了维拉帕米(Verapamil,Ver)对感染柯萨奇B_3病毒(CVB_3)的大鼠培养心肌细胞Ca^(2+)内流及CVB_3-RNA复制的影响。结果发现在感染48h后,Ver对感染细胞及正常对照的Ca^(2+)内流均有显著的抑制作用(P<0.01);若在病毒感染同时加入Ver,经48h培养后,细胞中CVB_3-RNA含量显著高于病毒对照组(P<0.05)。提示钙拮抗剂(如Ver)可减少病毒感染引起的心肌Ca^(2+)内流增加,有可能减轻感染细胞的继发性Ca^(2+)损伤;但Ver会促进病毒RNA的复制,提示在急性病毒性心肌炎临床上用Ver治疗心律失常时宜慎重。; 郭棋彭天庆杨英珍顾全保赵剑星; 关键词：柯萨奇B3病毒维拉帕米钙内流; 全文增补中

耳蜗毛细胞分离方法的改良: 1998年; 目的探讨耳蜗毛细胞的分离方法。方法选出生３周的ＳＤ大白鼠，雌雄兼用，在自制的外淋巴液中取出耳蜗基底膜，置于０．２５ｍｇ／ｍｌ木瓜蛋白酶中，３７℃３０ｍｉｎ消化后，洗去酶液，用钢针在普通解剖镜下剥离毛细胞并置倒置相差显微镜下观察，记录成活时间。结果每侧耳蜗可获２００左右成活的毛细胞，５ｈ后仍有７０％的毛细胞成活。结论用自制改良外淋巴液，并简化了操作过程，可以满意地获得形态。; 张勤修迟放鲁曹恒明赵剑星赵剑星; 关键词：耳蜗毛细胞大白鼠

大鼠心肌细胞L型和T型钙通道的特性被引量：6: 1998年; 目的研究大鼠心肌细胞Ｌ型和Ｔ型钙通道的特性。方法参照Ｈａｍｉｌ法记录全细胞跨膜钙电流。结果Ｔ型和Ｌ型钙通道可并存于大鼠心肌细胞膜上。Ｔ型钙通道激活电压在－７０～－６０ｍＶ，持续时间在２０～３０ｍｓ，电流幅度较小；Ｌ型钙通道激活电压在－３０～－２０ｍＶ，持续时间在１５０～２００ｍｓ，电流幅度较大。在细胞外钙离子浓度为０．５、２和１０ｍｍｏｌ／Ｌ时，Ｌ型钙通道的平均电流分别为（１．４３±０．３６）、（１．９６±０．３９）和（４．１３±０．７５）ｐＡ／ｐＦ；峰电流分别为（５．５０±１．５８）、（８．１７±２．１４）和（１３．６３±３．５９）ｐＡ／ｐＦ；电流幅度随时间变化可分为无明显衰减、缓慢衰减和快速衰减３种方式。与豚鼠心肌细胞相比，大鼠心肌细胞对钙通道特异性阻断剂相对不敏感。结论Ｌ型钙通道是大鼠心肌细胞膜上的主要电压依赖性钙通道，而Ｔ型钙通道在心室肌细胞上不起主要作用。; 刘恭鑫杨英珍顾全保顾全保郭棋; 关键词：钙通道膜片钳电生理学

黄芪对感染病毒大鼠心肌细胞钙通道及钠钙交换载体的效应被引量：43: 1999年; 目的与方法：以柯萨奇Ｂ３病毒感染急性分离的成年大鼠心肌细胞，利用膜片钳记录技术了解黄芪对感染柯萨奇病毒后心肌细胞Ｌ型钙通道及钠钙交换载体的影响，以探讨黄芪用于心肌炎治疗的作用机制。结果：黄芪不影响正常心肌细胞Ｌ型钙通道电流的幅度，但可减缓Ｌ型钙通道电流的衰减。黄芪也不影响内向ＮＣＥ电流，但使外向ＮＣＥ电流增加，从而使动作电位期间由ＮＣＥ转运入细胞内的钙离子增加。病毒感染增加心肌细胞Ｌ型钙通道电流的幅度，抑制内向钠钙交换电流，并使钠钙交换电流的逆转电位负移。黄芪可抑制病毒感染细胞Ｌ型钙通道电流的增加，减轻ＣＶＢ３对内向ＮＣＥ电流的抑制作用和使负移的逆转电位正常化。结论：黄芪通过拮抗ＣＶＢ３感染对Ｌ型钙通道和钠钙交换电流的影响，可防止病毒感染可能导致的细胞内钙超载和异常电活动，从而对感染细胞起到保护作用。; 刘恭鑫杨英珍顾全保顾全保虞勇; 关键词：柯萨奇病毒钙通道心肌中医药疗法

Effects of taurine on L-type voltage-dependent Ca^(2+) channel in rat cardiomyocytes infected with coxsackievirus B_3被引量：3: 1998年; 目的：观察牛磺酸对正常和感染柯萨奇Ｂ３病毒大鼠心肌细胞Ｌ型钙通道的影响．方法：用膜片箝技术记录经Ｌ型钙通道的Ｃａ２＋电流．结果：正常心肌细胞Ｌ型钙通道的Ｃａ２＋电流密度为４１±０８ｐＡ／ｐＦ，柯萨奇Ｂ３病毒感染后Ｃａ２＋电流密度增加到４９±１４ｐＡ／ｐＦ．牛磺酸１６ｍｍｏｌ·Ｌ－１不仅使正常心肌细胞Ｌ型钙通道的Ｃａ２＋电流密度降为３５±０５ｐＡ／ｐＦ，也使感染柯萨奇Ｂ３病毒后心肌细胞的Ｃａ２＋电流密度降为３８±０８ｐＡ／ｐＦ．柯萨奇Ｂ３病毒感染使引起最大Ｃａ２＋电流的膜电压（Ｖｐ）由８±８ｍＶ减为５±３ｍＶ，牛磺酸可使降低的Ｖｐ恢复到８±４ｍＶ．结论：牛磺酸抑制柯萨奇Ｂ３病毒感染引起的Ｃａ２＋电流的增加，并使因感染而降低的引起最大Ｃａ２＋电流的膜电压正常化．牛磺酸对Ｌ型钙通道的影响是牛磺酸减轻病毒感染引起的细胞内Ｃａ２＋增加和异常电活动的机制之一．; 刘恭鑫杨英珍顾全保顾全保刘艳红; 关键词：柯萨奇B病毒膜片箝技术

水飞蓟宾对成年大鼠分离的心肌细胞质膜Ca^（2＋）通道活性的影响被引量：10: 1996年; 目的：观察药物水飞蓟宾对分离的成年大鼠心肌细胞钙通道阻滞效应。方法：用成年大鼠分离的心肌细胞，以放射性同位素４５Ｃａ２＋作示踪，通过对经细胞膜Ｃａ２＋流入测定，研究药物水飞蓟宾对钙通道的抑制效应，并与钙通道阻滞剂维拉帕米对照。结果：维拉帕米组Ｃａ２＋流入的平均抑制效应为３０％左右（Ｐ＜０．００１），水飞蓟宾组为３６．５０％左右（Ｐ＜０．００１）。; 梁瑞廉葛兆莺顾全保许惠钟顾全保; 关键词：钙通道水飞蓟宾

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