董秋明
- 作品数:18 被引量:37H指数:3
- 供职机构:苏州大学医学部医学生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生环境科学与工程生物学化学工程更多>>
- 鼠抗人4-1BB单克隆抗体的制备及其生物学功能的初步研究
- 4-1BB(ILA,CD137)属肿瘤坏死因子受体(TNFR)家族成员,蛋白分子为含254个氨基酸的Ⅰ型跨膜糖蛋白,分子量为30kDa。其基因定位于人1p36。人4-1BB可诱导性表达在活化的T淋巴细胞(CD4+、CD8...
- 董秋明
- 关键词:T细胞免疫应答
- 丙型肝炎病毒感染机制的研究进展
- 2002年
- 丙型肝炎病毒感染的机制目前尚不明了,大量的证据表明CD81是该病毒感染的最初受体,也有实验认为病毒与低密度脂蛋白结合后通过低密度脂蛋白受体的介导进入细胞。本文对该病毒感染的受体及它们的多态性研究作一综述。
- 董秋明高锦声卢大儒
- 关键词:丙型肝炎
- 利用光合细菌降解有机废水中硫化物的初步研究被引量:8
- 1998年
- 主要研究了光合细菌对废水中硫化物的降解作用,实验表明,光合细菌对各种浓度的含硫有机废水脱硫效果明显,且在厌氧光照条件下处理效果更好.因此。
- 董秋明高为佘栋栋吴平
- 关键词:光合细菌降解硫化物有机废水废水处理
- 人4-1BB转基因细胞的构建及体外生物学功能的研究被引量:2
- 2006年
- 目的构建人共刺激分子4-1BB转基因细胞并探讨4-1BB的体外生物学功能。方法利用RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞总RNA中克隆出人4-1BB基因,经双酶切装入逆转录病毒载体pGEZ-Term中,重组逆转录病毒载体4-1BB/pGEZ-Term与两个辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T,用含有完整病毒颗粒的293T细胞的培养上清感染重新铺板的293T细胞,加入Zeocin选择性培养基进行筛选。经RT-PCR、Western blot、流式细胞仪表型检测等方法鉴定转基因细胞;3H-TdR掺入法分析转基因细胞对T细胞的作用;DCs培养过程中,加入转基因细胞与激发型CD40单抗5C11,流式细胞仪分析DCs表面分子CD80、CD83和CD86的表达。结果成功构建了能稳定表达人4-1BB蛋白的转基因细胞4-1BB/293T,该转基因细胞与T细胞共培养可抑制其体外增殖,可协同5C11促进DCs的体外成熟,上调DCs表面分子CD80、CD83和CD86的表达。结论稳定表达4-1BB蛋白的转基因细胞株的建立为该基因功能的后续研究和单克隆抗体的研制奠定了基础。
- 董秋明张光波徐颖陈永井张学光
- 关键词:4-1BB基因转染共刺激分子DCS
- 一个软骨发育不全家系成纤维细胞生长因子受体3基因突变分析被引量:19
- 2003年
- 目的 基因水平上澄清一个不符合常染色体显性遗传病遗传规律的软骨发育不全家系患者的致病机理。方法 用聚合酶链反应技术扩增家系成员外周血基因组 DNA成纤维细胞生长因子受体 3(fibroblast growth factor receptor 3 ,FGFR3 )基因第 10外显子 ,DNA序列分析寻找突变位点 ,然后经限制性内切酶 Mae 分析验证。结果 患者外周血基因组 DNA FGFR3基因第 10外显子第 1180位核苷酸发现一个 A→ T新突变 ,而家系正常成员包括先证者父母不存在此突变。结论 结合系谱分析 ,这一新突变可能是导致该家系患者软骨发育不全的原因。
- 朱斌董秋明黄兴华季国庆陈颖王文兴姜海燕高锦声
- 关键词:先天性软骨发育不全成纤维细胞生长因子受体3基因突变遗传病ACHFGFR3
- 散发性乳腺癌BRCA1基因甲基化的研究被引量:2
- 2002年
- 目的 研究散发性乳腺癌中BRCA1基因启动子区域的异常甲基化特性。方法 采用甲基化敏感的限制酶(methylation -sensitiverestrictionendonucleases,MSRES)法。结果 在 34例散发性乳腺癌中有 6例乳腺癌患者的BRCA1基因启动子区域出现了异常甲基化现象。结论 BRCA1基因的异常甲基化发生率较高 ,筛查BRCA1基因的异常甲基化对于乳腺癌患病风险评估。
- 姚雪梅董秋明赵一平高锦声
- 关键词:分子生物学散发性乳腺癌BRCA1基因甲基化
- 鼠抗人4-1BB单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定
- 2011年
- 目的:鼠抗人4-1BB分子功能性单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定。方法:以高表达人4-1BB分子的转基因细胞293T/4-1BB为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,并以293T/4-1BB为阳性抗体筛选细胞,293T/mock为阴性抗体筛选细胞,经免疫荧光标记和流式细胞术(FCM)分析、反复筛选和多次克隆化培养,筛选出特异分泌鼠抗人4-1BB分子mAb的杂交瘤细胞株;采用W estern b lot、间接免疫荧光法、竞争结合抑制试验、3H掺入和细胞凋亡分析等方法对mAb进行生物学特性的鉴定。结果:成功获得3株持续、稳定分泌鼠抗人4-1BB mAb的杂交瘤细胞株,命名为1G5、4B11和9F11。对mAb的生物学功能的研究结果表明,3株mAb均能识别活化T细胞和单核细胞来源的树突状细胞(Mo-DC)表达的4-1BB分子。mAb 4B11能有效地激发T细胞体外增殖、抑制其凋亡,并能促进Mo-DC体外扩增,上调CD80、CD83、CD86和CD1α的表达。结论:获得的3株分泌鼠抗人4-1BB mAb的杂交瘤,所分泌的抗体具有特异性地识别人4-1BB分子;其中4B11 mAb具有激发T细胞增殖及促进Mo-DC体外扩增与成熟的作用,为激发型4-1BB mAb。
- 周桓张光波董秋明於葛华徐颖张学光
- 关键词:4-1BB杂交瘤共刺激信号单克隆抗体
- 散发性乳腺癌中BRCA1基因突变的检测被引量:4
- 2002年
- 目的 分析散发性乳腺癌患者BRCA1基因 3个外显子的突变特性及突变位置。方法 采用PCR -SS CP银染结合DNA直接测序方法 ,对 34例乳腺癌患者BRCA1基因第 2、11、2 0外显子进行突变检测。结果 2例患者BRCA1基因第 11外显子的 2 4 30位点出现突变 ,由A变成G。结论 中国散发性乳腺癌中BRCA1突变率较低 (6 % ) ,可能只与小部分散发性乳腺癌的发生相关 ;在普通人群中进行广泛的BRCA1突变筛查意义不大 ;在Ashkenazi犹太妇女中发现的两个突变热点 185delAG和 5 382insC不是中国乳腺癌患者的突变热点 ,在中国人群中进行上述突变热点的筛查意义不大。
- 董秋明姚雪梅赵一平高锦声
- 关键词:散发性乳腺癌BRCA1PCR-SSCP
- 大鼠4-1 BBLcDNA的克隆、分析及染色体定位
- 2005年
- 目的克隆、分析并染色体定位肿瘤坏死因子配体超家族(Tumor Necrosis Factor Superfamily,TNFSF)成员4-1BBL分子。方法在对小鼠、人4-1BBL mRNA进行生物信息学分析的基础上,采用PCR扩增、T载体克隆测序等实验技术,并用软件对基因进行了拼接、序列分析及同源性比较,同时通过荧光原位杂交(FISH)技术对该基因进行了染色体定位。结果首次获得了具有完整开放阅读框的大鼠cDNA,GenBank登录号为No.AY259541,通过同源性比较分析,证明该基因与小鼠高度同源,编码区的核苷酸序列与小鼠、人的同源性分别为88%、37%。推导出的大鼠4-1BBL蛋白质由308个氨基酸分子组成,分子量为33469d,胞外区有三个潜在的N糖基化位点:AA138,AA160和AA292,是典型的Ⅱ型糖蛋白,与小鼠、人在氨基酸水平的同源性分别为83%、31%,其中胞质区为76%、32%,跨膜区为45%、40%,胞外区为87%、28%。该基因定位于大鼠染色体9q1(GenBank Uni-Gene登录号为No.Rn.46783)。结论大鼠4-1BBL胞内区的“SDAA”可能发挥着TNF家族中具有逆信号的其他成员的胞内区酪氨酸激酶Ⅰ磷酸化位点“SXXS”的作用。大鼠4-1BBLcDNA的成功克隆与定位为探讨4-1BBL在免疫共刺激中的作用机制以及TNF分子的进化研究打下了基础。
- 董秋明马力杰杭赛宇高磊张学光
- 关键词:4-1BBLCDNA克隆染色体定位
- LDLR基因配体结合区多态性与丙型肝炎病毒易感性的相关研究
- 2001年
- 目的 探讨低密度脂蛋白受体 (LDLR)基因是否存在与丙型肝炎病毒 (HCV)感染有关的单核苷酸多态性 (SNP)。方法 利用PCR结合DNA自动测序对HCV感染者和正常人的LDLR基因的配体结合区进行分析。结果 没有发现与HCV感染相关的多态性位点。结论 LDLR基因的配体结合区与 (HCV)感染的易感性无关。
- 董秋明姜正文高锦声卢大儒
- 关键词:HCVLDLR单核苷酸多态性易感性丙型肝炎