杨志
- 作品数：9 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：黑龙江省“十五”科技攻关项目黑龙江省科技攻关计划更多>>
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- 鹅副粘病毒NP基因的原核表达及表达产物抗原性检测
- 鹅副粘病毒病又称鹅源新城疫,属于副粘病毒科,具有基因□型新城疫(NDV)的典型特征.本试验通过RT-PCR方法扩增了国内分离株JS/1/97/Go的NP基因,进行了克隆、序列测定和比较.构建了该分离株NP基因的原核表达载...
- 杨玉菊王君伟杨志何海娟高宏丽于天飞
- 关键词：鹅副粘病毒NP基因原核表达
- 文献传递
- 鹅副粘病毒NP基因的原核表达及表达产物抗原性检测被引量：1
- 2005年
- 根据GenBank中发表的GPMVSF02株的NP基因的核苷酸序列设计合成一对引物,通过RT-PCR扩增JS/1/97/Go株的NP基因,将其克隆入pMD18-T载体,序列测定和分析表明:所扩增的NP基因的核苷酸长为1470bp,共编码490个氨基酸。再将NP基因定向亚克隆至原核表达载体pGEX-6P的多克隆位点,经酶切鉴定后将含有NP基因的阳性亚克隆重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,用诱导剂IPTG分别以不同的浓度进行诱导,并在不同的诱导时间进行采样,样品经处理后通过SDS-PAGE、Westernblot和Dot-ELISA进行分析。结果显示:以终浓度为1mmol/LIPTG进行诱导4h表达可达到高峰,表达的融合蛋白大小约为80kD,并具有良好的抗原性。
- 杨玉菊王君伟李曦杨志何海娟
- 关键词：鹅副粘病毒NP基因克隆原核表达
- 减毒沙门氏菌及其应用
- 本发明公开了减毒沙门氏菌及其应用。本发明应用基因敲除技术，删除掉沙门氏菌(Salmonella pullorum)的体内定植基因和主要毒力基因，获得了双基因缺失的减毒沙门氏菌SM091-DED株，其微生物保藏号是：CGM...
- 刘思国刘慧芳王秀梅于申业王牟平司薇杨志
- 减毒沙门氏菌及其应用
- 本发明公开了减毒沙门氏菌及其应用。本发明应用基因敲除技术，删除掉沙门氏菌(Salmonella pullorum)的体内定植基因和主要毒力基因，获得了双基因缺失的减毒沙门氏菌SM091-DED株，其微生物保藏号是：CGM...
- 刘思国刘慧芳王秀梅于申业王牟平司薇杨志
- 文献传递
- JS/1/97/Go株GPMV NP基因的克隆、序列分析
- 2005年
- 根据GenBank中发表的GPMV SF02株的NP基因的核苷酸序列设计合成一对引物,采用RT_PCR扩增出与预期设计的1470 bp大小相符的片断,将此扩增产物克隆入PMD18_T载体,进行序列测定和分析。结果表明:所扩增的NP基因的核苷酸长为1 470 bp,共编码490个氨基酸。同源性分析表明:JS/1/97/Go与国内的SF02株的NP基因核苷酸同源性为98.6%,氨基酸同源性为99.6%。由此可见,鹅副粘病毒JS/1/97/Go分离株与SF02株的亲缘关系较近,同属于新城疫Ⅶ型基因。而其与LaSota株的核苷酸同源性为85.2%,氨基酸同源性为90.8%。说明该毒株相对于经典的NDV在NP基因上已发生了较大的变异。
- 杨玉菊王君伟杨志何海娟
- 关键词：鹅副粘病毒核蛋白基因
- 鹅副粘病毒NP基因的原核表达及表达产物抗原性检测
- 1997年以来,在我国许多地区爆发了由鹅副粘病毒(Goose Paramyxovirus,GPMV)引起的烈性传染病,给养鹅业带来了严重的危害。鹅副粘病毒病又称鹅源新城疫,属于副粘病毒科,具有基因口型新城疫(NDV)的典...
- 杨玉菊王君伟杨志何海娟高宏丽于天飞
- 关键词：鹅副粘病毒分离株原核表达
- 文献传递
- GPV与GPMV重组禽痘病毒转移载体和DNA疫苗的构建
- 鹅细小病毒(gooseparvovirus)和鹅副粘病毒(gooseparamyxovirus)分别是小鹅瘟和鹅副粘病毒病的病原。小鹅瘟和鹅副粘病毒病都是养鹅生产中的烈性传染病，发病范围较广。除了小鹅瘟在非洲和美洲还未见...
- 杨志
- 关键词：鹅细小病毒鹅副粘病毒DNA疫苗
- 文献传递
- 牛粘膜病病毒E1基因的克隆及原核表达被引量：3
- 2006年
- 参考BVDVVEDEVAC株的基因组序列及E2基因的测序结果设计一对引物,扩增出预期585 bp的目的片段。扩增产物克隆至pMD18-T载体,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与参考序列VEDE-VAC株比较,二者的核苷酸同源性为100%,推导氨基酸同源性为100%。测序结果经同源性比较,克隆得到的基因与VEDEVAC株同源性最高。系统发生树分析推测E1基因与VEDEVAC株在进化上比较接近。将E1基因定向亚克隆到表达载体pGEX-6p-1中,对阳性重组质粒转化的大肠杆菌BL21进行诱导,E1基因获得了成功表达。
- 何海娟王君伟李昭春杨玉菊杨志
- 关键词：E1基因克隆原核表达
- GPV野毒株鉴定及其致病力试验被引量：5
- 2003年
- 在送检的小鹅瘟病料中分离到1株病毒,经NS1基因特异性引物扩增后确定是GPV。用该对引物对从鹅细小病毒野毒感染的病鹅分离的GPV野毒株进行PCR检测,结果该对引物能特异性地扩增出与预期片段大小相符的1.9kb片段。回归试验结果表明,该GPV野毒株的感染潜伏期为8天,病程为1～3天,致死率达100%;对雏鹅半数致死量LD50为3.4。
- 布日额王君伟吴金花杨志李勐
- 关键词：GPV野毒株致病力试验细小病毒PCR
