曹筑荣
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 供职机构：国防科学技术大学计算机学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金农业部农业科技跨越计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 小粒野生稻可转化人工染色体文库的构建及筛选
- TAC载体的设计脱胎于YAC和PAC,被赋予许多新的优点。它不会出现重组交换而导致的嵌合现象,可以在大肠杆菌和农杆菌中进行穿梭;在农杆菌介导下能直接将外源基因整合到植物基因组中,一旦获得目标阳性克隆后,不需要进行亚克隆就...
- 曹筑荣
- 关键词：小粒野生稻可转化人工染色体基因组文库
- 携带大片段BIBAC克隆在不同农杆菌中的遗传稳定性研究被引量：1
- 2006年
- 大片段克隆在农杆菌中的稳定性是利用可转化大片段载体进行农杆菌介导遗传转化的关键问题.选用插入片段分子质量分别为150kb和50kb的BIBAC克隆,测定了在3种农杆菌AGL-1,EHA105和LBA4404中的遗传稳定性.从第1、3、5次继代培养的农杆菌中抽提的质粒及酶切结果显示,由于农杆菌背景质粒的干扰,难以判断质粒的降解与否.将农杆菌质粒再转化到大肠杆菌宿主中,发现来自农杆菌AGL-1和EHA105的质粒出现了明显的降解,片段变小,而来自农杆菌LBA4404的质粒没有变化.结果表明,大片段BIBAC质粒在不同农杆菌菌株中的稳定性不同,在农杆菌LBA4404中比较稳定,适合用于遗传转化.
- 邢俊杰杨剑梁铃李强李磊张朝良杲修杰曹筑荣曹孟良
- 关键词：根癌农杆菌
- 可转化人工染色体文库研究进展被引量：2
- 2006年
- 综述了可转化人工染色体(transformation-competent artificial chromosome,TAC)载体的发展、TAC文库的构建程序及TAC载体系统在植物基因克隆中的应用。
- 曹筑荣王正华曹孟良
- 关键词：可转化人工染色体基因组文库图位克隆
- 东乡野生稻双元细菌人工染色体(BIBAC)文库的构建被引量：4
- 2006年
- 双元细菌人工染色体(binarybacterialartificialchromosome,BIBAC)是能直接将大片段DNA转入植物的载体,是植物基因图位克隆和构建植物基因嵌入突变体库的重要工具。该研究以东乡野生稻为材料,构建其BIBAC文库。该文库由14592个克隆组成,平均插入片段大小为65kb,覆盖率为2倍基因组。稳定性检测结果表明,东乡野生稻基因组DNA能够在BIBAC载体中稳定存在。
- 成志伟曹筑荣陈良碧曹孟良
- 关键词：东乡野生稻基因组DNA
- 小粒野生稻可转化人工染色体文库初步构建及筛选被引量：2
- 2008年
- 以小粒野生稻核DNA为材料构建了一个可转化人工染色体文库,获得了5000个克隆,平均插入片段约45 kb。稳定性检测结果表明,小粒野生稻基因组DNA能够在TAC载体中稳定存在。基于已克隆抗性基因的保守序列设计探针,利用菌落杂交的方法,对文库进行筛选。结果表明,该文库可以用于抗性基因的筛选。
- 王正华曹筑荣曹孟良
- 关键词：可转化人工染色体基因组文库小粒野生稻
- 高效制备双元细菌人工染色体(BIBAC)载体DNA的研究被引量：1
- 2007年
- 高质量的BIBAC载体DNA的制备受到酶切、脱磷等许多因素的影响,是构建BIBAC文库的关键步骤之一.以BIBAC2载体为材料,对其进行了BamHI限制性酶切和CIAP脱磷,制备了可用于进一步构建文库的线性载体.在此基础上确定了适宜的酶量、酶切时间、脱磷酶的用量及失活等步骤的反应条件.
- 成志伟曹筑荣李磊邢俊杰罗赫荣王正华陈良碧曹孟良
- 关键词：基因组脱磷
