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郑峰: 作品数：58 被引量：140H指数：6; 供职机构：中国人民解放军南京军区军事医学研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>

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稳定表达Trop-2基因的NIH3T3细胞系的构建和特性分析被引量：1: 2013年; 目的:建立稳定表达人滋养层细胞表面抗原(Trop-2)NIH3T3细胞,分析过表达Trop-2对NIH3T3细胞的生长、增殖和侵袭特性的影响。方法:将Trop-2基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1,转染NIH3T3细胞,通过G418筛选及RT-PCR鉴定获得稳定表达Trop-2的NIH3T3细胞(NIH3T3-Trop-2)。用MTS法检测NIH3T3-Trop-2细胞的增殖能力,软琼脂集落形成实验检测NIH3T3-Trop-2细胞的克隆形成能力,明胶酶谱法检测NIH3T3-Trop-2细胞的基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的分泌及细胞划痕实验检测NIH3T3-Trop-2细胞的迁移能力。结果:稳定表达Trop-2的NIH3T3细胞在生长增殖、克隆形成及侵袭能力均较NIH3T3细胞强,细胞培养上清中的MMP-2和MMP-9增多。结论:Trop-2对细胞的增殖与迁移能力具有明显的促进作用。; 刘玉唐小军曹清丁贵鹏张慧林王欢郑峰徐凛锋林红; 关键词：NIH3T3 真核表达

江苏省中部地区猪链球菌主要致病血清型分子流行病学调查被引量：6: 2008年; 目的了解江苏省中部地区正常猪群猪链球菌及主要致病血清型分布。方法采集江苏省中部地区正常屠宰猪样本303份，用聚合酶链反应（PCR）法进行猪链球菌及主要致病血清型的检测，并对3株分离的猪链球菌菌株进行系统的生物学和分子遗传学鉴定。结果303份猪标本中，2005年正常猪群中猪链球菌的携带率达88．0％，其中1（或14）型、2（或1／2）型、7型和9型携带率分别为9．6％、8．5％、11．3％、29．5％；2006年正常猪群中猪链球菌的携带率为82．5％，1（或14）型、2（或1／2）型、7型和9型携带率分别为17．6％、2．4％、25．8％、20．0％；3株分离菌株均为2型，2a毒力因子表现型为cps2^＋／gdh^＋／mrp^-／epf^-／sly^-／fops^＋／orf2^＋／89k^-，2f、14e毒力因子表现型均为cps2^＋／gdh^＋／mrp^-／epf／sly^-／fbps^-／orf2^-／89k；3株分离菌株对阿莫西林、氨苄西林、青霉素等高度敏感，但对阿米卡星和四环素有显著的耐药性；对BALB／c小鼠和家兔无明显致病性。结论江苏省中部地区正常猪群中猪链球菌携带率处于较高水平，多种血清型同时存在，毒力因子表型与流行毒力株有显著差异。; 鞠爱萍王长军郑峰潘秀珍董亚青葛俊超陆承平唐家琪; 关键词：猪链球菌聚合酶链反应流行病学分子

2型猪链球菌89K毒力岛Ⅳ型分泌系统LAMP检测方法的建立被引量：11: 2014年; 目的建立针对高致病性2型猪链球菌（Streptococcus suis 2，SS2）89K毒力岛Ⅳ型分泌系统的环介导等温扩增（100p-mediated isothermal amplification，LAMP）方法。方法根据国内流行株特有89K毒力岛编码的Ⅳ型分泌系统（T4SS-89K）的virB4-89K基因保守区域设计并合成LAMP引物，通过优化反应体系和扩增条件建立T4SS-89K快速检测方法，对方法的特异性、敏感性进行评估。结果优化的LAMP反应体系具有良好的扩增效率，检测灵敏度为1．53×10^-1拷贝／反应，全部扩增检测可在60rain内完成；建立的LAMP法具有良好的特异性，与不含T4SS-89K的猪链球菌（包括1／2型、1型、3-33型），以及其他常见9种对照菌均不发生特异性扩增，而与1998和2005年疫情现场分离的高致病性SS2均可发生特异性扩增。结论建立的LAMP方法具有特异、灵敏，设备要求简单等特点，可用于高致病性SS2快速检测。; 张凤玉胡丹吕恒张锦海郝丽娜龚秀芳操敏郑峰耿美玲朱进李丙军潘秀珍王长军

信号肽与猪链球菌GDH融合的DNA疫苗构建及体液免疫研究被引量：4: 2008年; 目的设计、构建猪链球菌GDH真核表达载体并研究DNA疫苗免疫小鼠的体液免疫。方法在猪链球菌保护性抗原GDH基因5′末端引入人IL-2信号肽序列,通过PCR进行拼接,得到的融合DNA片段经过酶切克隆入质粒pcDNA3.0,构建核酸疫苗重组质粒pcDNA3.0-gdh。通过肌肉注射途径将重组质粒pcDNA3.0-gdh免疫小鼠,经ELASA实验和Western blot进行检验。结果构建的表达载体在小鼠体内表达出正确的目的蛋白,能诱导体液免疫。结论构建的DNA疫苗能够引起体液免疫,为研究猪链球菌核酸疫苗提供分子工具。; 潘秀珍赵华梅葛俊超王长军郑峰李先富唐家琪; 关键词：猪链球菌 DNA疫苗信号肽

一株无毒2型猪链球菌及其制备方法、应用: 本发明属细菌类，具体说是一株无毒2型猪链球菌及其制备方法，以及在猪链球菌病疫苗研制中的应用。一株无毒2型猪链球菌Streptococcus suis(Serotype 2)05JYS68，其在中国微生物菌种保藏管理委员会...; 唐家琪王长军郑峰潘秀珍; 文献传递

PPARγ与肥胖诱导的炎症反应被引量：4: 2015年; 过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)是调节目的基因表达的核内受体转录因子超家族成员。PPARγ主要表达于脂肪组织及免疫系统,与脂肪细胞分化、机体免疫及胰岛素抵抗关系密切。近年来,PPARγ与炎症反应的关系逐渐成为研究热点。研究表明,肥胖往往伴随着低等级的慢性炎症反应。; 许小明郑峰朱进周玮; 关键词：过氧化物酶体增殖体激活受体Γ 肥胖炎症

猪链球菌2型divIVA基因敲除突变株及其应用: 本发明属于基因工程领域，涉及猪链球菌2型divIVA基因敲除突变株及其应用。所述突变株ΔdivIV制备方法为：利用同源重组基因敲除技术将S.suis 2野生株05ZYH33染色体上编码DivIVA蛋白的divIVA基因进...; 潘秀珍倪华王长军沈玉洁胡丹郑峰; 文献传递

炭疽杆菌致死因子LF253的制备及活性分析: 2015年; 目的 :制备具有生物学活性的重组致死因子253(lethal factor 253,LF253)抗原,获得纯化的目的蛋白,检测其与全分子致死因子(lethal focfor,LF)蛋白竞争性结合保护性抗原(protective antigen,PA)的能力。方法:PCR扩增致死因子LF253片段的DNA,将目的基因插入p ET-28a(+)表达载体中,利用大肠杆菌BL21(DE3)作为宿主菌,IPTG诱导重组蛋白表达,通过His标签亲和层析柱获得目的蛋白,Western blot和ELISA法检测蛋白抗原性,Biacore T-100测定重组蛋白与保护性抗原PA结合的亲和力,细胞毒性实验检测其生物学活性。结果:成功构建原核表达载体p ET-28a/LF253,诱导获得重组蛋白s LF253的表达。Western blot和ELISA检测结果证实,该重组蛋白具有良好抗原特异性;细胞毒实验结果表明,重组蛋白可在体内外中和致死毒素引起的生物学效应。结论:本研究制备的融合蛋白s LF253能够与保护性抗原PA结合,可竞争性抑制LF全分子蛋白与PA的聚合,阻断炭疽毒素的致死作用,为今后炭疽疫苗等药物的研发奠定了基础。; 许小明郑峰周婷婷熊四平刘鹏王长军冯振卿周玮朱进; 关键词：炭疽活性分析

2型猪链球菌菌毛结构亚蛋白tSSU0473的原核表达与免疫学特性研究被引量：3: 2013年; 目的:探究2型猪链球菌(S.suis2)强毒株05ZYH33的srtF基因簇编码的菌毛结构亚蛋白SSU0473的细菌定位及其免疫保护效能。方法:原核表达截短的SSU0473(tSSU0473),并以亲和层析法纯化目的蛋白,Western印迹检测tSSU0473蛋白的免疫原性,ELISA法检测多抗血清的效价及IgG亚型,小鼠试验测试重组蛋白的免疫保护效能,免疫电镜观测tSSU0473蛋白的细菌定位。结果:在原核系统中表达了tSSU0473蛋白;ELISA结果显示重组蛋白能够刺激小鼠产生高效价的免疫抗体;动物试验表明tSSU0473蛋白免疫小鼠可抵御致死剂量病原体的攻击,显示出较好的免疫保护作用;免疫电镜检测显示tSSU0473蛋白定位于细菌表面。结论:菌毛亚蛋白tSSU0473是S.suis2膜表面蛋白,具有良好的免疫原性和免疫保护性,可作为S.suis2亚单位疫苗的候选分子。研究结果为系统揭示S.suis2的菌毛生物学结构与功能奠定了基础。; 胡丹张先云耿美玲张凤玉郝丽娜朱静郑峰潘秀珍王长军; 关键词：2型猪链球菌菌毛原核表达免疫保护

苏中地区猪链球菌主要致病血清型分子流行病学调查: 猪链球菌(SS)是重要的人兽共患病病原体,作为一种兼性厌养的革兰氏阳性细菌,通常存在于猪的上呼吸道,可引起仔猪的脑膜炎、关节炎、心内膜炎、败血症、肺炎以及断奶仔猪的猝死,并可感染人。根据菌体荚膜多糖抗原性的不同,用协同凝...; 鞠爱萍王长军郑峰潘秀珍董亚青葛俊超唐家琪; 关键词：猪链球菌人兽共患病病原体分子流行病学; 文献传递

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