米青
- 作品数：7 被引量：14H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金更多>>
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- 缬沙坦对心力衰竭时心肌钙调节蛋白作用的研究
- 2008年
- 目的:研究缬沙坦对心力衰竭(HF)时肌浆网(SR)钙离子调节蛋白的保护作用。方法:采用腹主动脉-下腔静脉造瘘术建立幼鼠HF模型,术后8周随机分为2组:未治疗组和治疗组(管饲缬沙坦),另设假手术组。对各组幼鼠左室组织提取SR膜,Western blotting法测定受磷蛋白(PLB)磷酸化水平,荧光分光光度仪检测钙离子(Ca2+)的重吸收和渗漏。结果:与假手术组比较,未治疗组体重降低(P<0.01),左室相对质量(LVRW)、右室相对质量(RVRW)均明显升高(P<0.01),16位丝氨酸磷酸化-受磷蛋白(Ser-16-PLB)蛋白量显著降低(P<0.01);与未治疗组比较,治疗组体重(P<0.01)升高,LVRW、RVRW降低(P<0.01),Ser-16-PLB蛋白量明显升高(P<0.01),接近假手术组水平;3组总PLB蛋白量差异无统计学意义(P>0.05);若分别向含有3组SR的缓冲液加入ATP(0.5mmol/L)后,未治疗组的Ca2+的重吸收量同假手术组和治疗组比较,明显降低(P<0.01);当分别向含有3组SR的缓冲液中加入毒胡萝卜内酯(1μmol/L)后,未治疗组同另外2组比较出现明显的Ca2+渗漏(P<0.01);而当毒胡萝卜内酯(1μmol/L)和FKBP抑制剂FK506(30μmol/L)一起加入3组SR的缓冲液中,假手术组、治疗组出现明显的Ca2+渗漏(P<0.01),而未治疗组较单独加入毒胡萝卜内酯时Ca2+渗漏仅轻微增多(P>0.05)。结论:HF时心肌组织肥厚,细胞Ca2+重吸收量降低、渗漏明显,心肌PLB磷酸化水平显著降低。缬沙坦一方面抑制Ca2+渗漏,另一方面提高PLB的磷酸化水平,恢复Ca2+-ATP酶的Ca2+重吸收能力,提高心脏功能并有效抑制心室重塑。
- 米青易岂建钱永如李谧白永红
- 关键词：心力衰竭受磷蛋白CA^2+-ATP酶
- 靶向大鼠gnas基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定
- 2010年
- 目的:构建并鉴定靶向大鼠gnas基因的小干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体。方法:根据大鼠gnas基因mRNA序列设计并合成3条shRNA特异性寡核苷酸片段,退火形成双链后克隆进入线性化pGenesil-1.1载体,并进行酶切鉴定和测序,同时构建针对大鼠GAPDH基因的阳性对照质粒和不具有基因同源性的非特异性基因的质粒做阴性对照。结果:经酶切和测序鉴定分析,构建的shRNA已成功插入载体,并且与设计序列完全相符。结论:成功构建了靶向大鼠gnas基因的shRNA真核表达载体,为后续研究Gsα蛋白在心力衰竭中作用的体内外实验奠定了基础。
- 田运娇易岂建米青李娅莎
- 关键词：RNA干扰质粒心力衰竭
- 基因突变致心肌组织兰尼碱受体功能缺陷的研究进展被引量：1
- 2008年
- 兰尼碱受体是心肌细胞上的一种钙离子释放通道,当基因发生突变时可导致延迟后除极致心脏猝死性室性心动过速的发生,但到目前为止,具体的分子生物学机制却不是很清楚,可能与其调节蛋白-FK506结合蛋白的解离、Ca^(2+)激活域值降低及通道内部各功能域之间作用受损等引起的舒张期钙离子渗漏有关,现就关于基因突变所致兰尼碱受体功能障碍发生机制的各种学说做一综述。
- 米青易岂建
- 关键词：兰尼碱受体基因突变CA^2+释放室性快速心律失常
- 缬沙坦对心力衰竭幼鼠心功能及肌浆网Ca^(2+)-ATP酶活性的影响被引量：3
- 2008年
- 目的:研究缬沙坦对心力衰竭(Heart failure,HF)(简称心衰)幼鼠心功能及肌浆网(Sarcoplasmic reticulum,SR)Ca2+-ATP酶(Ca2+-ATPase,SERCA2a)活性和Ca2+重吸收量的影响。方法:采用腹主动脉-下腔静脉造瘘术建立幼鼠心衰模型,术后8周随机分为2组:心衰组和缬沙坦治疗组,另设假手术组;缬沙坦灌胃给药,每日观察幼鼠的呼吸、皮毛颜色、活动量等发育情况;术后12周高频超声检测心功能;定磷法测定SR膜SERCA2a酶活性;荧光分光光度仪检测钙离子(Ca2+)的重吸收量。结果:与假手术组(n=15)比较,对照组(n=20)幼鼠左室舒张末期内径(LVIDd)、左室收缩末期内径(LVIDs)、左室舒张末期容积(LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV)均明显升高(P<0.01),左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)均明显降低(P<0.01);与对照组比较,缬沙坦治疗组(n=15),LVIDd、LVIDs、LVEDV、LVESV均明显降低(P<0.01),FS、EF升高(P<0.01);对照组的SERCA2a活性较假手术组明显降低(P<0.01),而经缬沙坦治疗后,酶活性接近假手术组(P>0.05);若分别向含有3组SR的缓冲液加入0.5mmol/L ATP后,对照组的Ca2+的重吸收量同假手术组比较,明显降低(P<0.01),与对照组比较,缬沙坦组Ca2+的重吸收量显著提高(P<0.01)。结论:对照组幼鼠心功能显著降低,心肌细胞SERCA2a活性降低,Ca2+重拾量减少,缬沙坦可提高SERCA2a的Ca2+重拾能力,改善细胞收缩、舒张功能,进一步提高心脏功能并有效抑制心室重塑。
- 米青易岂建李荣钱永如
- 关键词：心功能CA^2+-ATP酶
- 卡维地洛治疗原发性心内膜弹力纤维增生症的研究被引量：10
- 2008年
- 目的观察原发性心内膜弹力纤维增生症（endocardial fibroelastosis，EFE）患儿血浆脑利钠肽（brain natriuretic peptide，BNP）变化及卡维地洛的临床疗效，探讨治疗剂量、方案及安全性。方法21例原发性EFE患儿分为2组，常规治疗组（／7,=10）及卡维地洛治疗组（n=11），治疗前及治疗后6个月进行多普勒超声心动图检测、观察血浆BNP；观察2组治疗前后血浆BNP水平、临床症状、心胸比例、心率的变化、心功能的改善、患儿对卡维地洛的耐受量及不良反应。结果原发性EFE患儿血浆BNP水平[（865±702）ng/L]明显高于正常对照组[（154±78）ng/L]（P〈0．01），且心功能越差升高越明显，心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级分别为（286±125）ng/L、（437±386）ng/L、（1673±859）ng/L；卡维地洛治疗后血浆BNP水平[（219±87）ng/L]低于常规组[（403±216）ng/L]（P〈0．05），临床症状明显改善，患儿心胸比例降低，心率减慢，射血分数（EF）、短轴缩短率、平均左室周径缩短率显著提高（P〈0．01），左室收缩末期内径（P〈0．05）、左室质量、室间隔收缩末厚度明显降低（P〈0．01）。结论原发性EFE患儿血浆BNP水平显著升高，与EF呈负相关；卡维地洛可以降低血浆BNP水平，明显抑制EFE患儿心室重塑，改善患儿的心功能；心功能Ⅱ～Ⅳ级原发性EFE患儿卡维地洛长期治疗安全有效。
- 李荣易岂建钱永如刘晓燕钟家蓉白永虹米青李小利
- 关键词：心内膜弹力纤维增生症儿童
- RNAi选择性下调大鼠心肌细胞上Gsα蛋白的体外实验
- 2010年
- 目的:用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)选择性下调大鼠心肌细胞上乌苷酸结合蛋白(Gs)α亚基(Gs protein alphala subunit,Gsα)的表达,筛选出抑制Gsα蛋白效果最明显的特异短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达质粒。方法:构建3条靶向gnas基因的特异与RNA质粒载体(shRNA1-3),以含非特异性shRNA编码序列的质粒载体为阴性对照(HK),用脂质体LipofectamineTMLTX&PLUS转染原代培养的大鼠心肌细胞,并设空白对照组,转染后通过半定量RT-PCR和Western blot法检测GsαmRNA和蛋白的表达情况,以内参照三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)进行标化。结果:shRNA1-3均使Gsα的mRNA和蛋白质表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),且shRNA3的抑制效果最显著,阴性对照质粒组与空白对照组Gsα表达差异无统计学意义。结论:利用RNAi技术成功下调了原代培养的心肌细胞中Gsα的表达,并筛选出沉默效果最明显的shRNA真核表达质粒,为心肌细胞的转染提供了可行的方法。
- 田运娇易岂建米青刘官信李娅莎
- 关键词：心肌细胞RNA干扰
- 缬沙坦对心力衰竭幼鼠心肌钙调节蛋白作用的研究
- [研究背景]心力衰竭(heart failure,HF)，又称心功能不全，是指在正常静脉回流情况下，心脏的排血量不能满足机体代谢需要的一种复杂的临床综合征。近半个世纪以来，对HF发病机理及治疗研究取得很大进展。目前针对心...
- 米青
- 关键词：心力衰竭发病机理
- 文献传递
