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银染单链构象多态性技术检测结核杆菌rpoB基因突变被引量：10: 1999年; 目的探讨分子生物学方法在临床标本结核分枝杆菌利福平（ＲＦＰ）耐药性评估中的应用价值。方法设计针对ｒｐｏＢ基因１８３ｂｐ扩增引物，运用聚合酶链反应单链构象多态性分析（ＰＣＲＳＳＣＰ）银染色方法，检测了４５株结核杆菌临床分离株，并对其中部分菌株进一步做了ＤＮＡ序列分析。结果以药敏试验结果为对照，有１６株ＲＦＰ敏感株及２６株ＲＦＰ耐药株经ＳＣＰ方法得到检测，阳性占９３．３％，特异性１００％。对部分菌株１８３ｂｐ片断测序结果显示，ＲＦＰ敏感株无ｒｐｏＢ基因突变，耐药株均发生碱基突变，分别导致编码５３１及５２６位点的氨基酸改变。结论银染ＰＣＲＳＣＰ方法具有简便，快速，准确的特点，提高敏感性，可以对临床标本结核杆菌利福平耐药突变进行鉴定。序列分析证明结核分枝杆菌利福平耐药菌株有ｒｐｏＢ基因突变。; 金玲康熙雄鱼瑛王淑华鱼瑛王瑞; 关键词：结核杆菌 RPOB基因基因突变

结核分支杆菌利福平药物敏感性的直接快速检测被引量：8: 1999年; 目的探讨利用分子生物学方法直接快速检测临床标本结核分支杆菌利福平（ＲＦＰ）药物敏感性的可行性。方法自行设计针对ｒｐｏＢ基因特异扩增的引物（扩增产物为１８３ｂｐ片段），运用聚合酶链反应单链构象多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）银染色法，检测４５株结核分支杆菌临床分离株，对其中部分菌株进行ｒｐｏＢ基因ＤＮＡ序列分析；运用ＰＣＲＳＳＣＰ银染色法对７０份结核病患者痰标本进行直接快速检测，并与药敏试验结果做对照分析。结果４５株临床分离株中１６株ＲＦＰ敏感结核分支杆菌ＳＳＣＰ带谱与结核分支杆菌标准株（Ｈ３７Ｒｖ）相同，２９株ＲＦＰ耐药株中有２６株检测到突变图谱，阳性率为９０％。从具有ＳＳＣＰ特征性带谱的菌株中筛选８株临床分离株进行ｒｐｏＢ基因序列分析显示：１株ＲＦＰ敏感株无ｒｐｏＢ基因突变，７株耐药株均发生碱基突变（符合率１００％）。碱基以单点突变为主，以５３１位碱基突变最为多见［４株５３１位ＴＣＧ→ＴＴＧ，Ｓｅｒ→Ｌｅｕ（５７％）；１株５３１位ＴＣＧ→ＣＡＧ，Ｓｅｒ→Ｇｌｎ（１４％）；２株５２６位ＣＡＣ→ＴＡＣ，Ｈｉｓ→Ｔｙｒ（２９％）］。与ＢＡＣＴＥＣ对照临床痰标本直接快速检测阳性率为６４％。结论结核分支杆菌耐ＲＦＰ?; 鱼瑛康熙雄康熙雄王淑华金玲; 关键词：结核分支杆菌利福平药物敏感性聚合酶链反应

分子生物学方法检测结核杆菌对利福平耐药性研究进展: 1999年; 近年对结核杆菌耐药机制的研究表明，rpoB基因是利福平耐药相关基因，耐药株通常发生特定位点基因突变．因此可以通过鉴定突变有无而评估其利福平耐药性，本文对这方面研究做一简要综述。; 金玲; 关键词：结核杆菌利福平 RPOB基因耐药性分子生物学

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金玲

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