朱贵明 作品数:45 被引量:86 H指数:5 供职机构: 贵州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 黑龙江省教育厅科学技术研究项目 黑龙江省卫生厅科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 更多>>
慢病毒介导的CAV1过表达对HL-60细胞增殖与凋亡的影响 被引量:2 2013年 本研究旨在探讨慢病毒介导的CAV1过表达对HL-60细胞增殖与凋亡的影响。构建慢病毒重组表达载体pcDNA-EF1-CAV1,并与pPACK包装质粒混合物共转染至293TN细胞后,收集病毒液感染HL-60细胞,使CAV1基因在细胞中稳定转染并高表达。采用Western blot方法评价转染后HL-60 CAV1蛋白表达情况。采用CCK-8法、流式细胞术分别检测转染前后HL-60细胞的增殖活性和凋亡情况。结果表明:PCR阳性克隆筛选及核苷酸测序结果证实CAV1基因正确插入表达载体pcDNA-EF1-GFP中。重组慢病毒颗粒Lv-CAV1成功转染HL-60细胞,转染率达90%。Western blot检测结果显示,转染后48 h HL-60细胞中CAV1蛋白表达明显增高。CCK-8检测结果显示转染后48 h HL-60细胞增殖活性降低(P<0.05),流式细胞仪检测结果显示转染后HL-60细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。结论:CAV1过表达对HL-60细胞具有抑制细胞的增殖活性、促进细胞凋亡的作用。 马微 王迪迪 王昭 朱贵明 张鹏霞关键词:HL-60 慢病毒 细胞增殖 黄芪甲甙对衰老HELF细胞端粒酶活性及klotho表达的影响 被引量:10 2010年 目的探讨黄芪甲甙对衰老人胚肺成纤维细胞(HELF)端粒酶活性及抗衰老基因klotho mRNA表达的影响。方法体外培养HELF,实验组从50代开始加入黄芪甲甙,倒置显微镜观察细胞形态,MTT方法检查细胞活力,Dimiri氏法检测β-半乳糖苷酶活性,TRAP-PCR银染法检测端粒酶活性,RT-PCR法检测klotho mRNA表达。结果与青年组比较:衰老组细胞活力和klotho mRNA表达均降低(P<0.01)、β-半乳糖苷酶活性升高(P<0.01);与衰老组相比:黄芪甲甙可降低β-半乳糖苷酶活性(P<0.01)、提高细胞活力、端粒酶活性和klotho mRNA表达(P<0.01)。结论黄芪甲甙可以通过改变细胞端粒酶活性、klotho基因的表达而发挥其抗HELF细胞衰老的作用。 郭蕾 魏晓东 欧芹 王昭 朱贵明关键词:黄芪甲甙 端粒酶 KLOTHO 齐墩果酸对白血病HL-60细胞PI3K、Akt表达的影响 被引量:7 2013年 目的研究齐墩果酸(Oleanic acid,OA)对人白血病HL-60细胞PI3K、Akt表达的影响。方法 OA作用HL-60细胞后,采用透射电镜观察细胞形态,RT-PCR法检测HL-60细胞PI3K、Akt的mRNA表达。结果 OA作用于HL-60细胞后,细胞形态改变明显,出现凋亡小体,且PI3K、Akt的mRNA表达下调(P<0.01)。结论 OA可抑制HL-60细胞增殖,这可能与其下调HL-60细胞中PI3K、Akt的表达有关。 王迪迪 朱贵明 张鹏霞关键词:齐墩果酸 HL-60 PI3K AKT 菟丝子对衰老模型大鼠肝细胞p21、cyclinE基因表达的影响 本文旨在探讨菟丝子醇提液对衰老模型大鼠细胞周期调控的影响及其作用机制。指出,菟丝子醇提液通过改变细胞周期调控因子的表达,减少DNA损伤从而发挥其延缓衰老的作用,且其影响表现为时间依赖性。 孙洁 欧芹 李晶 朱贵明 朴金花 葛堂栋 江旭东 王迪迪关键词:衰老模型 抗衰老作用 文献传递 哺乳动物细胞多不饱和脂肪酸合成酶系的重建将亚油酸代谢转变为二十二碳六烯酸 被引量:1 2015年 二十二碳六烯酸(DHA,22:6n-3)是一种长度为22个碳原子且含有6个双键的ω-3系多不饱和脂肪酸,在人体中具有重要生物学功能。人体及其他哺乳动物体内只能合成少量的DHA,更多的需求必须从食物中获取。然而,DHA的天然资源(主要是深海鱼类等海洋产品)日趋枯竭,开发新型资源以满足不断扩大的市场需求势在必行。本研究利用转基因技术,在哺乳动物细胞中使Δ6和Δ5脂肪酸去饱和酶以及Δ6和Δ5脂肪酸延长酶超表达,同时表达来源于秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans的Δ15去饱和酶和小眼虫Euglena gracilis的Δ4去饱和酶,结果表明,这6种酶的表达或超表达能将ω-6系的亚油酸(LA,18:2n-6)有效地转化为DHA(22:6n-3),后者的含量从对照组的16.74%提高到实验组的25.3%。本研究的策略及技术路线为将来利用遗传改造的哺乳动物生产珍稀的DHA(22:6n-3)等长链多不饱和脂肪酸产品提供了重要的启示。 朱贵明 Abdulmomen Ali Mohammed Saleh Said Ahmed Bahwal 邱立红 孙洁 商宇 江旭东 葛堂栋 张涛关键词:多不饱和脂肪酸 脂肪酸去饱和酶 多基因表达载体 苏木对粪肠球菌体外抑菌试验及其对毒力因子cylA、efaA、gelE转录表达抑制作用的初探 被引量:2 2011年 目的研究苏木体外对粪肠球菌的抑菌效果,并初步研究其抑菌作用是否为通过影响或干扰某些毒力因子的表达而实现的。方法采用常量肉汤稀释法确定苏木体外对粪肠球菌的最小抑菌浓度(MIC),以此判断抑菌效果,然后用RT-PCR方法检测粪肠球菌毒力因子cylA、gelE和efaA受苏木作用后的表达水平的变化。结果苏木对粪肠球菌的最小抑菌浓度为5 mg/mL,RT-PCR结果表明,毒力因子efaA、gelE的表达水平随着药物浓度的梯度增加而降低,在浓度为5 mg/mL及更高时mRNA的表达水平受到完全抑制。结论苏木体外对粪肠球菌起到了抑制作用,并对本实验所选毒力因子efaA、gelE的表达过程产生了抑制作用。 许颖 范淑霞 马淑霞 朱贵明 钟钰 郭婧玉关键词:粪肠球菌 毒力因子 血红素氧合酶/一氧化碳体系在老年慢性阻塞性肺疾病患者中的表达及意义 被引量:1 2012年 目的探讨血红素氧合酶(HO)/一氧化碳(CO)体系在老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中的表达及意义。方法 62~68岁COPD患者87例,依据COPD诊治规范分为重度组、中度组、轻度组,并以同年龄段健康人28例作为对照组。分别检测血气分析、肺功能及血清HO-1水平,采用乐宏元等方法检测全血COHb,采用放射免疫竞争抑制分析法检测环磷酸鸟苷(cGMP)水平。结果老年COPD患者随着病情的加重以及机体乏氧状态的逐步恶化,HO-1、COHb和cGMP水平均明显升高(P<0.01)。结论检测HO-1、CO和cGMP水平有助于老年COPD患者的诊断以及严重程度的评估。 马雪梅 朱贵明 鲍文华关键词:血红素氧合酶 一氧化碳 慢性阻塞性肺疾病 环磷酸鸟苷 多不饱和脂肪酸对Δ15 Des转基因小鼠前列腺素E_(2)水平的影响 2023年 目的探讨多不饱和脂肪酸(PUFAs)对Δ15脂肪酸去饱和酶(Δ15 Des)转基因小鼠前列腺素E_(2)(PGE_(2))水平的影响。方法取C57BL/6野生型(WT)雄性小鼠和Δ15 Des转基因雄性小鼠作为对照组(n=5,WT组)和实验组(n=5,TG组),6%花生四烯酸(ARA)饲养8周,每周记录小鼠体质量变化;8周后麻醉处死2组小鼠,冰上分离小鼠肝脏、睾丸及肌肉组织,采用气相色谱(GC)检测2组小鼠各组织中脂肪酸(FAs)的组成及水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定2组小鼠各组织中PGE_(2)的水平及前列腺素E合酶1(PTGES1)、前列腺素E合酶2(PTGES2)信使RNA(mRNA)的相对表达。结果第1~8周,2组小鼠体质量均在增长,2组间比较、差异无统计学意义(P>0.05);WT组小鼠各组织中PUFAs主要是欧米伽-6 PUFAs(n-6 PUFAs);与WT组相比,TG组小鼠各组织中ARA水平降低、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)水平升高(P<0.05或P<0.01),睾丸组织中亚油酸(LA)水平升高、二十二碳四烯酸(DTA)水平降低(P<0.05);TG组小鼠睾丸、肌肉组织中PGE_(2)水平低于WT组(P<0.05或P<0.01);TG组小鼠肝脏、睾丸组织中PTGES1、PTGES2 mRNA表达低于WT组(P<0.05或P<0.01)。结论PUFAs可减少Δ15 Des转基因小鼠ARA的合成,降低与PGE_(2)相关的合成酶表达,从而调节体内PGE_(2)的水平。 赵瑄 甘婷 甘婷 巨佳曦 朱贵明关键词:前列腺素E类 多不饱和脂肪酸 山茱萸多糖延缓衰老作用的研究 被引量:3 2011年 健康长寿是人类经久不衰研究的热门课题之一。尤其是进入21世纪后,社会人口的老龄化进程迫使我们对衰老及衰老相关疾病、有效防治衰老措施的研究有更深刻的理解和阐述。而衰老是内外环境引发的机体各种功能普遍减弱的过程,表现为渐进性、累积性和普遍性。中药以其特有的效果,在抗衰老研究领域占有重要的地位。有关中药及其组分在抗衰老和抗肿瘤研究的众多发现,例如银杏叶、人参皂甙等,不仅推进研究的深入,而且也得到多数学者的认可。 欧芹 朱贵明关键词:延缓衰老作用 山茱萸多糖 健康长寿 相关疾病 人参皂甙 老龄化 家蝇Phormicin A多克隆抗体的制备及效价检测 2021年 家蝇Phormicin作为防御素家族的成员,是一类具有广普抗菌活性的抗菌肽。本研究采用原核表达法表达并纯化获得了家蝇Phormicin A蛋白。将家蝇Phormicin A原核表达蛋白与完全佐剂和不完全佐剂乳化混匀,先后免疫新西兰白兔获得其多克隆抗体。通过原核表达蛋白中和吸附实验,以及Western blot实验验证了抗体的特异性。进一步用金黄色葡萄球菌刺激家蝇三龄幼虫样品,进行内源性验证并测定抗体的效价。结果显示,该多克隆抗体既可以识别家蝇Phormicin A原核表达蛋白,也可以识别金黄色葡萄球菌刺激家蝇三龄幼虫产生的内源性Phormicin A蛋白。本研究为进一步探索Phormicin在家蝇天然免疫和防御中的机制等后续工作打下基础。 王兵 覃海 赵杰琼 姚杨 韦鹏威 宋朝蓉 李道远 张其柱 张其柱 朱贵明关键词:多克隆抗体 家蝇 抗菌肽