张炜
- 作品数：34 被引量：228H指数：8
- 供职机构：南京农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省基础研究计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学医药卫生更多>>
- 农业生物学虚拟仿真实验教学资源建设被引量：24
- 2015年
- 从虚拟仿真实验教学资源整合与构建的角度,论述了南京农业大学农业生物学国家级虚拟仿真实验教学中心在植物学、动物学、动植物野外实习和现代生物技术等领域实验教学信息化建设过程中取得的初步成果,分析了虚拟仿真实验教学平台在生物学实验教学中发挥的独特优势,也提出了教学资源信息化建设和管理中存在的一些亟待解决的问题。
- 张炜崔瑾成丹
- 关键词：实验教学中心教学资源
- 盐胁迫及La^(3+)对不同耐盐性水稻根中抗氧化酶及质膜H^+-ATPase的影响被引量：36
- 2007年
- 用盐敏感的武运粳8号和强耐盐的韭菜青两个粳稻品种,比较了盐胁迫条件下根中抗氧化酶类和质膜H+-ATPase活性的变化以及La3+对其变化的影响。结果表明,两个品种根中SOD和APX活性无显著区别,但耐盐品种的CAT和POD活性强于盐敏感品种。盐胁迫不同程度地提高了两者抗氧化酶活性。La3+对其影响最显著的差异出现在高盐条件下(200~300mmolL-1NaCl),对耐盐品种添加La3+可以提高上述4种酶的活力,而对盐敏感品种,La3+的作用不明显。对盐敏感品种,盐胁迫导致其质膜H+-ATPase活性持续下降,添加La3+明显提高其H+-ATPase活性,而对耐盐品种,盐胁迫导致其质膜H+-ATPase活性呈现先降后升的趋势,La3+对其活性影响不大。进一步分析表明,上述H+-ATPase活性变化及La3+对其影响均发生在转录水平上。据此推测,以上2个品种可能具有完全不同的盐胁迫响应机制。
- 陈海燕崔香菊陈熙李建友张炜
- 关键词：水稻盐胁迫抗氧化酶质膜H^+-ATPASE
- 水稻根质膜蛋白质组双向电泳水化液的优化被引量：1
- 2007年
- 以水稻(Oryza sativa L.)苗期幼嫩根尖作为材料,利用葡聚糖-聚乙二醇两相分配法纯化得到纯度达90%的质膜组分,使用4种不同的水化液溶解质膜蛋白,进行IEF/SDS-PAGE双向电泳和MALDI-TOF/TOF质谱分析.结果显示,4种水化液中,以7 mol/L Urea2、mol/L Thiourea、4%CHAPS、20 mmol/L DTE、1%ASB14的条件对膜蛋白的溶解效果和双向电泳分离效果最好;16个被鉴定蛋白中有9个为质膜相关蛋白,5个为未知蛋白,来自其它细胞器的蛋白仅有2个.研究表明,在常用水化液中添加磺基甘氨酸三甲内盐ASB14有利于植物细胞质膜蛋白质组的分析,并且该优化条件下的双向电泳适合分离水稻质膜中亲水性相对较高的膜附着蛋白.
- 王宁齐耀程徐朗莱张炜
- 关键词：水稻质膜双向电泳蛋白质组学去污剂
- 中度噬盐菌Bacillus sp.Ⅰ121的质膜蛋白质组学分析被引量：1
- 2010年
- 膜蛋白是连接细胞与外界环境的重要载体,发挥着物质转运、信号传导等作用。通过对一种新分离出来的中度噬盐菌Bacillussp.Ⅰ121进行了质膜蛋白质组学分析,盐胁迫下该菌株主要靠积累脯氨酸来维持细胞渗透压。在对Bacillussp.Ⅰ121在不同盐浓度下的生长情况进行测定的基础上,我们选取了1%,5%,10%,15%(w/v)NaCl4个盐浓度进行细胞培养,并分别提取细菌的质膜,通过5%～20%的梯度凝胶SDS-PAGE电泳将疏水的膜蛋白进行分离,随后对盐胁迫响应的8条不同的蛋白条带进行了ESI-LC-MS/MS质谱分析。将所得结果在NCBI数据库中进行比对,最终成功鉴定出10种蛋白。这些蛋白涉及物质跨膜转运,膜的生物合成以及胁迫信号转导等功能。为膜蛋白在盐胁迫响应过程中的作用方面的研究开辟了新思路。
- 姜炜李亮张炜
- 关键词：盐胁迫膜蛋白蛋白质组学
- 不同启动子在水稻悬浮细胞中诱导外源基因的表达被引量：1
- 2014年
- 为进一步提高外源基因在水稻悬浮细胞中的表达水平,以花椰菜花叶病毒(Ca MV)35S启动子为对照,克隆了玉米泛素蛋白启动子(Ubi)、水稻肌动蛋白启动子(Actin)以及水稻Oscc1启动子,以GFP为报告基因,通过启动子串联的方式,构建了10个植物表达载体:p CAMBIA 1304 35S-GFP、Ubi-GFP、Actin-GFP、Oscc1-GFP、35S/Ubi-GFP、35S/Actin-GFP、35S/Oscc1-GFP、Ubi/Actin-GFP、Ubi/Oscc1-GFP、Actin/Oscc1-GFP,采用根瘤农杆菌介导的方法,将表达载体导入日本晴胚性愈伤,经悬浮培养分别获得转基因的悬浮细胞系,利用荧光显微镜、酶标仪检测GFP荧光强度,用Western blot检测GFP蛋白质的表达水平。结果发现串联启动子明显强于单个启动子驱动的GFP蛋白质表达水平。在10个表达载体中,35S/Ubi、Ubi/Actin和Ubi/Oscc1是3种优化的启动子组合,其中Ubi/Oscc1串联启动子驱动GFP的表达水平最高,约为对照35S启动子的3倍。
- 陈兆骞陈熙张炜
- 关键词：水稻悬浮细胞系绿色荧光蛋白异源表达
- 水稻根尖质膜蛋白质组学研究方法的建立被引量：8
- 2008年
- 以徐稻3号水稻苗期幼嫩根尖为材料，利用葡聚糖／聚乙二醇两相分配法纯化得到纯度达90％的质膜组分，使用优化的双向电泳水化液溶解质膜蛋白，通过等电聚焦／十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶双向电泳（IEF／SDS-PAGE）分离和基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱（MAI-DI—TOF／TOF）分析，鉴定了31个水稻质膜相关蛋白。结果表明IEF／SDSPAGE双向电泳适合分离亲水性相对较高的膜附着蛋白。进一步利用高盐和温和去污剂对纯化的质膜进行洗涤，以降低质膜组分的复杂程度，通过SDS-PAGE单向电泳分离和液相色谱串联质谱（LC-MS／MS）分析，鉴定了8个质膜蛋白。经洗涤后的质膜组分复杂度显著降低，SDS-PAGE中的蛋白条带只包含1～2种蛋白，且主要为疏水性较强的穿膜蛋白，说明多种生物化学分离方法及不同质谱分析的综合运用，是解决生物膜蛋白质组学难点的有效途径。
- 齐耀程王宁程彦伟徐朗莱张炜
- 关键词：水稻质膜蛋白质组学
- 分子生物学实验课程中自行设计实验的实践被引量：6
- 2012年
- 自行设计实验报告是学校分子生物学实验课程考核体系的一个重要内容,由学生以小组的形式分工合作完成。报告设计的实验方案在全班进行讨论和修改,最后确定一套切实可行的实验方案。学生参与自行设计实验的每一个环节,包括试剂的选择与订购、器皿耗材的准备、试剂的配制、实验的操作和结果的处理分析等等。该实验增加了实验教学的主动性、创新性、系统性和高效性。这一研究过程拓宽了学生的知识面、提高了学生解决问题的能力,同时积累了科研工作的经验,为进入研究生阶段的工作奠定基础。
- 卢亚萍汪瑾张炜芮琪
- 关键词：分子生物学实验研究型教学自主创新
- Antihypertensive activity of Rosa rugosa Thunb.Flowers: Angiotensin I Converting Enzyme Inhibitor
- 谢雅晶张炜
- 生物学野外实习虚拟仿真实训系统构建与应用被引量：21
- 2016年
- 南京农业大学农业生物学虚拟仿真实验教学中心从生物学野外实习教学的实际应用出发,主导构建了天目山生物学野外实习虚拟仿真实训系统。该文探讨了系统的构建思路、实现模式及应用效果。该系统充分发挥了现代信息技术的作用,将虚拟仿真技术与实验教学有机融合,化解了传统野外实习的困难,有助于扩充教学信息容量、显著提高野外实习效率,同时也推动了生物学野外实习教学模式的改革和创新。
- 成丹崔瑾鲁燕舞包浩然陆巍张炜沈振国
- 关键词：生物学野外实习
- 低叶绿素b水稻突变体类囊体膜的比较蛋白质组学被引量：17
- 2006年
- 采用蓝绿温和胶凝胶电泳(blue-nativepolyacrylamidegel-electrophoresis,BN-PAGE),以及改进的第二向SDS-PAGE分离了水稻低叶绿素b突变体ZH249-Y和野生型ZH249-W类囊体膜蛋白复合物,系统比较了突变体和野生型各复合物亚基的表达差异.结果显示,第一向BN-PAGE分离了PSⅠ-LHCⅠ、LHCⅠ缺失的PSⅠ、ATP合成酶、细胞色素b6f、CP43缺失的PSⅡ及LHCⅡ六种复合物.上述各复合物经第二相SDS-Urea-PAGE分离后,利用胶内酶解,高效液相层析分离肽段,电喷雾串联质谱鉴定了复合物的亚基.结合免疫印迹研究,证明和野生型相比,突变体光系统Ⅱ捕光天线复合体的表达量适度下降,但光系统Ⅰ捕光天线破坏严重,同时光系统Ⅱ核心蛋白和ATP合成酶的表达量上升.研究结果对揭示低叶绿素b水稻突变体较高光化学效率和光稳定性的分子基础提供了线索,同时也表明,改进的BN/SDS-PAGE双向电泳不仅可以有效地分离膜蛋白复合物及亚基,也可以进行不同生理条件下,或野生型和突变体之间膜蛋白质组的比较研究.
- 陈熙崔香菊YING-XIN ZHAO张炜
- 关键词：SATIVA类囊体膜比较蛋白质组学
