李记园
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：内蒙古农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 玉米ZmCBL10的克隆及ZmCBL6和ZmCBL8的功能鉴定
- 类钙调磷酸酶B蛋白/(Calcineurin B-like proteins, CBLs/)做为植物特有的Ca2+感受器,在植物响应各种非生物胁迫中发挥重要的调节作用。在玉米基因组中至少有9个CBL基因,本论文首次对其中...
- 李记园
- 关键词：玉米CBL基因克隆
- 文献传递
- 玉米ZmCBL5-2基因的克隆及其转化拟南芥被引量：2
- 2011年
- CBLs(calcineurin B-like proteins)是植物细胞中1个重要的Ca2+传感蛋白家族,它们广泛参与植物对高盐和干旱等非生物逆境的应答反应。在玉米基因组中存在至少9个CBL编码基因,其中ZmCBL5因为存在可变剪接而有编码框为657bp和444bp两种转录本,我们称之为ZmCBL5-1和ZmCBL5-2。本论文运用RT-PCR方法克隆了ZmCBL5-2的编码框cDNA,然后构建了其植物表达载体并转化了拟南芥,经PCR检测证明获得T1代转基因植株,为进一步研究其在抗逆性中的作用奠定了基础。
- 王存芳李记园王茅雁
- 关键词：玉米CBL基因克隆拟南芥
- 玉米ZmCBL2-2基因的克隆及其表达分析
- 2012年
- 为通过转基因植物等方法分析玉米ZmCBL2-2基因在耐逆性中的功能,运用RT-PCR(Reverse transcriptionPCR)方法克隆了该基因的编码区cDNA片段,并将其构建到植物表达载体p3301(pCAMBIA3301)上。同时,运用荧光实时定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)技术对玉米幼苗期该基因在高盐、低温和养分缺乏等6种非生物胁迫下的表达动态进行了分析,发现其对于缺N、低K、低温、外源ABA(Abscisic acid)和水分胁迫均有显著的应答反应,而对于盐胁迫无明显的响应。
- 李记园王存芳赵欢欢王茅雁
- 关键词：玉米CBL基因克隆
- 蒙古沙冬青干旱胁迫全长cDNA文库构建及序列分析被引量：3
- 2012年
- 为了规模化分离强抗逆植物蒙古沙冬青Ammopiptanthus mongolicus(Maxim.)Cheng f.的抗旱基因并探讨其抗旱性分子机理,用SMART(Switching mechanism at 5′-end of RNA transcript)技术构建了其在干旱胁迫下的全长cDNA文库。原始文库滴度为1.6×107PFU/mL,重组率为97.7%,插入片段长度多数接近和超过1 kb。对3 000个阳性克隆进行了5′端测序和序列分析,共获得1 450条Unigene序列。在Nt、Nr和Swissprot等数据库中进行Blast搜索,结果有919条(占63.4%)与已知或推测功能的基因具有同源性,其余531条(占36.6%)为功能未知的新基因。将Unigene进行Gene Ontology(GO)功能分类,其中与生理过程、细胞过程、结合、催化活性和细胞组分相关的基因所占比例较高,其次是与细胞器、蛋白复合体、运输和结构分子活性相关的基因,与刺激应答、基因表达调节、生理生化调节和信号转导相关的基因也占相当比例。许多有功能注释的Unigene属于抗逆相关基因,用半定量RT-PCR方法分析其中6个基因的表达变化,证明其均参与对干旱胁迫的应答反应。为进一步开展表达谱分析和克隆、鉴定抗旱基因奠定了基础。
- 林清芳王学峰李记园赵鸿彬王茅雁
- 关键词：沙冬青干旱CDNA文库
- 蒙古沙冬青胰蛋白酶抑制剂基因AmTI的克隆及其功能分析被引量：2
- 2012年
- 蛋白酶抑制剂(Protein inhibitors,PIs)是一类小分子多肽或蛋白质,在植物抵抗生物和非生物逆境中起中起重要作用。利用PCR方法从强抗逆植物蒙古沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)中克隆到一个胰蛋白酶抑制剂(Trypsin inhibitors,TIs)基因AmTI,分析了其在非生物胁迫下的表达变化,构建了其植物表达载体。结果表明,AmTI的编码蛋白含197个氨基酸残基,分子质量为21.5kDa,在N端有信号肽序列,属于Kunitz型;在正常生长条件下,该基因只有微量的基础表达,但在脱水、低温和盐胁迫处理下,其表达量显著上调。本研究为进一步揭示AmTI的功能奠定了基础。
- 王学峰李记园李连国张锋王茅雁
- 关键词：沙冬青蛋白酶抑制剂基因克隆
