吴巨龙 作品数:29 被引量:118 H指数:7 供职机构: 山东省疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 山东省医药卫生科技发展计划项目 国家科技重大专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
2020—2021年山东省流感样病例6种非流感病毒的核酸检测结果分析 2025年 目的:分析2020—2021流感监测年度山东省流感样病例中呼吸道病毒感染情况及流行病学特点。方法:根据《全国流感监测方案》(2017年版)要求,在山东省14家监测哨点医院采集就诊的流感样病例的咽拭子样本,对所有样本进行核酸提取,采用实时荧光定量PCR的方法检测偏肺病毒、副流感病毒1型、副流感病毒2型、副流感病毒3型、呼吸道合胞病毒及腺病毒等6种常见病毒,并对检测结果进行分析。结果:共收集样本2 386份,检出率为24.22%(578份);6种病毒均有检出,检出率分别为偏肺病毒6.75%(162份)、呼吸道合胞病毒5.87%(140份)、副流感病毒3型3.56%(85份)、副流感病毒2型3.14%(75份)、副流感病毒1型2.98 %(71份)和腺病毒2.77%(66份)。不同性别检出率差异无统计学意义;不同年龄组的检出率差异具有统计学意义( P<0.001),检出率最高的为0~4岁年龄组(31.94%),其次为≥60岁年龄组(26.06%)。6种病毒的流行呈现月份变化,偏肺病毒在12月份检出率较高,副流感病毒1型在2月份检出率较高,副流感病毒2型、副流感病毒3型、呼吸道合胞病毒和腺病毒均在11月份检出率较高。病毒混合检出率为0.80%,以呼吸道合胞病毒合并其他病毒感染最为常见,且混合感染主要集中在0~4岁年龄组。 结论:山东省流感样病例6种多病原检测以偏肺病毒、呼吸道合胞病毒以及副流感病毒3型为主;呼吸道病毒的流行存在年龄和时间差异。 何玉洁 李忠 吴巨龙 孙林 宋绍霞 张淑 刘晓林 董阳 王显军 寇增强 刘倜关键词:传染病 2017-2018年山东省甲型H1N1流感病毒耐药性分析 被引量:5 2019年 目的调查山东省2017-2018流感监测年度甲型H1N1流感病毒对神经氨酸酶抑制剂(NAI)的耐药情况,分析其神经氨酸酶(NA)基因特征。方法选取山东省2017-2018流感监测年度分离的20株甲型H1N1流感病毒进行生物学耐药实验,检测病毒对奥司他韦和扎那米韦的药物敏感性。提取病毒核酸后对NA基因进行测序,利用生物信息学软件分析NA基因上与耐药有关的氨基酸位点及其基因变异情况。结果选取的20株甲型H1N1流感病毒全部对奥司他韦和扎那米韦敏感,对奥司他韦的IC50平均数为0.37 n M(0.15~0.89 n M),对扎那米韦的IC50平均数为0.28 n M(0.14~0.78 n M)。NA基因测序结果也没有发现导致耐药的突变位点。结论山东省的甲型H1N1流感病毒对NAI敏感,临床上可继续使用此类药物对流感患者进行治疗。 吴巨龙 张圣洋 孙林 宋绍霞 刘倜 王显军 李忠关键词:甲型H1N1流感 神经氨酸酶抑制剂 耐药性 细粒棘球绦虫果糖二磷酸醛缩酶的生物信息学分析及其表达与活性检测 被引量:4 2014年 目的利用生物信息学方法分析细粒棘球绦虫果糖二磷酸醛缩酶(EgFBPA)的结构和功能特征,并利用基因工程技术进行克隆、表达、纯化,获得活性蛋白。方法利用多种生物信息学软件分析EgFBPA的拓扑结构、生物学以及免疫功能特征;用限制性内切酶EcoRⅠ和HandⅢ对重组质粒FBPA/P-blue酶切FBPA目的基因片段,亚克隆入表达载体pET30a,筛选重组克隆并测序,将测序正确的重组质粒转化入BL21(DE3)感受态细菌,用异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白;用Ni-NTA柱纯化重组蛋白,并建立酶反应体系,通过NADH(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)的变化测定重组蛋白EgFBPA的酶催化活性。结果 EgFBPA基因全长1 092bp,编码363个氨基酸,软件分析其等电点(pI)为8.34,分子质量单位为39.8035ku。亚细胞定位分析该蛋白为无信号肽的细胞质蛋白,属于稳定蛋白;结构域和保守功能域的预测,FBPAI的激活位点为VYLEGTLLKPN(222aa-232aa),并含有TIMβ/α筒状结构(6aa-346aa),二级结构以α-螺旋和环状结构居多,无跨膜区,有10种类型的活性位点。经PCR、双酶切和测序证实pET30a(+)-EgFBPA构建成功。SDS-PAGE检测重组质粒表达产物分子质量与预期相符,且具有可溶性;Bradford法测定蛋白浓度为(0.50±0.02)mg/ml。酶活性检测Ni-NTA柱纯化后的FBPA具有良好的酶促活性,且存在量效关系。结论生物信息学预测EgFBPA可能是潜在的药物靶点。重组质粒Pet30a(+)-FBPA在大肠埃希菌BL21中成功表达,表达产物具有酶促活性,为进一步研究其生物学功能及药物靶点奠定了基础。 王绚 吴巨龙 吕刚 苏娟 辛奇 鲁俊 张思 王猛 孙萃平 逯召莲 何黎黎 景涛关键词:细粒棘球绦虫 蛋白纯化 分子克隆 生物信息学 济南市社区居民急性上呼吸道感染与流感样病例发病及其疫苗接种情况 被引量:8 2015年 目的分析2015年济南市社区居民急性上呼吸道感染病例和流感样病例发病、就诊以及2014年流感疫苗接种情况。方法于2015年2月8—11日,采用抽签法和方便抽样方法从济南市选取在济南市居住3个月以上的家庭,以家庭内所有成员作为调查对象,调查2015年1月8日至2月7日急性上呼吸道感染及流感样病例发病情况。本研究共调查410户1300名居民,回收有效问卷1241份,有效率95.5%。以2010年全国分年龄的城市人口学统计资料为基础,利用直接标准化法估计济南市社区居民急性上呼吸道感染、流感样病例罹患率和流感疫苗接种率。采用χ2检验比较不同特征调查对象的发病及疫苗接种情况。结果1241名调查对象中,急性上呼吸道感染罹患率为30.2%(375例),标化罹患率为29.1%;流感样病例的罹患率为6.1%(76例),标化罹患率为5.4%;53%(66例)接种过流感疫苗,标化接种率为3.8%。急性上呼吸道感染病例中,各年龄组罹患率差异具有统计学意义(χ2=17.121,P=0.002),0-4岁组较高,为45.4%(44例),15~24岁组较低,为26.5%(27例);38.9%(146例)的病例选择去不同级别医院就诊,其中,37.7%(55例)的病例到县区级以上医院治疗,37.7%(55例)的病例选择社区医院,24.6%(36例)的病例选择个体诊所就诊。流感样病例中,各年龄组罹患率差异有统计学意义(χ2=76.79,P〈0.001),0。4岁组较高为22.7%(22例),25~59与960岁组较低,分别为3.1%(22例)和3.2%(6例);81.6%(62例)的病例选择去医院就诊,其中53.2%(33例)的病例选择县区级以上医院,33.9%(21例)的病例选择社区医院,12.9%(8例)的病例选择个体诊所就诊。结论济南市社区居民急性上呼吸道感染罹患率较高,流感样病例罹患率较低,0~4岁是� 刘营 宋绍霞 王伟 耿兴义 刘稳 韩德彪 刘倜 吴巨龙 李忠 王显军 毕振强关键词:呼吸道感染 流感样病例 罹患率 流感疫苗 2019—2020流感监测年度山东省B-Victoria系流感病毒基因特征 被引量:7 2022年 目的了解2019—2020流感监测年度山东省B-Victoria系流感病毒流行规律及基因特征,为B型流感疫苗的接种提供参考依据。方法对2019—2020流感监测年度监测数据进行分析,采用多阶段抽样方法随机抽取B-Victoria系流感病毒毒株进行基因序列的测定,采用Mega X软件的Muscle方法进行多序列比对,用Neighbor-Joining方法进行系统发育分析。结果2019—2020流感监测年度流感病毒以B-Victoria系和H3N2亚型为主;20株流感病毒毒株的基因进化分析表明其与同期疫苗株B/Colorado/06/2017亲缘关系较远却与下一年度疫苗株B/Washington/02/2019关系较近且共同聚集在Clade1A(Δ3)分支上,与同期疫苗株B/Colorado/06/2017相比有13处氨基酸位点改变,其中有5处位于抗原决定簇,其最大变异率为1.91%;糖基化分析显示20株流感病毒毒株全部发生209位糖基化位点增加;20株流感病毒毒株均未发现耐药位点突变。结论2019—2020流感监测年度推荐疫苗保护效果可能不理想,但山东省B-Victoria系流感病毒毒株对神经氨酸酶抑制剂依旧敏感。今后应继续密切关注B-Victoria系流感病毒的流行与基因变异情况,为B型流感病毒疫苗株的推荐及B型流感的防控提供依据。 吕健 吴巨龙 刘倜 姚明晓 李岩 朱凯 李栋 纪龙 寇增强关键词:B型流感 基因特征 血凝素 神经氨酸酶 抗原性 2020-2023年山东省涉禽外环境禽流感病毒监测分析 被引量:1 2024年 目的了解山东省涉禽场所外环境中禽流感病毒的污染情况,为人感染禽流感疫情的防控提供科学依据。方法2020-2023年从山东省16个地市4类涉禽场所采集外环境样本,使用实时荧光定量PCR法进行A型流感病毒核酸检测,阳性样本再进行H5、H7和H9亚型禽流感病毒的核酸分型,描述山东省涉禽外环境中禽流感病毒的流行病学特征,率间比较采用χ^(2)检验进行结果分析。结果2020-2023年,山东省涉禽场所共采集外环境标本6523份,检出禽流感病毒阳性1007份,阳性率为15.44%。H5、H7和H9亚型及混合感染均有检出,阳性标本中以H9亚型为主(88.48%)。不同地市阳性率差异较大(χ^(2)=431.956,P<0.001),其中阳性率最高的地市达28.93%。不同监测场所(χ^(2)=304.604,P<0.001)、不同类型样本(χ^(2)=109.678,P<0.001)、不同季度(χ^(2)=64.963,P<0.001)阳性率差异有统计学意义。其中,监测场所以城乡活禽市场阳性检出率(20.12%)最高,样本类型中宰杀或摆放禽肉案板表面擦拭标本阳性检出率(22.56%)高于其他样本,阳性检出率最高峰出现在春季(20.31%)。结论山东省涉禽外环境中普遍存在禽流感病毒污染,H9亚型为主要病原体,H5、H7亚型共流行,存在人感染禽流感的风险,应加强重点季节、重点地区、重点场所、重点环节的禽流感防控工作。 吴巨龙 宋绍霞 何玉洁 张淑 孙林 孙文魁 刘倜 寇增强关键词:禽流感病毒 2018—2019年济南市人鼻病毒和呼吸道合胞病毒及腺病毒感染分析 被引量:4 2023年 目的研究2018年4月至2019年3月济南市急性呼吸道感染病例中人鼻病毒、呼吸道合胞病毒及人腺病毒的感染情况及流行病学特点, 并对分离出的人腺病毒做全基因组序列分析。方法采集2018年4月至2019年3月济南市第四人民医院、山东大学齐鲁儿童医院、章丘区人民医院的急性呼吸道感染住院病例患者的鼻/咽拭子样本共计1 969份, 采用实时荧光定量PCR的方法检测样本中呼吸道相关病原体, 包括人鼻病毒、呼吸道合胞病毒及人腺病毒的阳性率, 并对分离出的7株腺病毒阳性标本进行测序, 以确定腺病毒型别, 并构建基因进化树进行分析。结果在收集的1 969份标本中, 3种呼吸道病毒阳性病例共计242例, 阳性检测率为12.30 %(242/1969), 鼻病毒阳性率为3.00%(59/1969)、呼吸道合胞病毒阳性率为6.30 %(124/1969)、腺病毒阳性率为3.86%(76/1969)。不同年龄段间鼻病毒检出率差异无统计学意义(Fisher精确检验值8.376, P=0.720), 不同年龄段间呼吸道合胞病毒、腺病毒检出率差异均有统计学意义(χ^(2)=19.28、12.16;P=0.001、0.016)。不同性别间腺病毒检出率差异具有统计学意义(χ^(2)=14.33, P<0.001), 不同性别间鼻病毒阳性率和呼吸道合胞病毒阳性率均无统计学意义(χ^(2)=0.30、2.90, P=0.862、0.089)。比较不同月份间三种病毒核酸阳性率, 发现鼻病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒的检出率分别在10月份、12月份、11月份达到最高(分别为8.61%、26.50%和8.84%)。对测序的7株腺病毒阳性标本构建基因进化树后发现其均为HAdV-2型。结论 2018年4月至2019年3月济南市急性呼吸道感染相关的人鼻病毒、呼吸道合胞病毒及人腺病毒在不同组别间有不同的流行病学特点, 为急性呼吸道感染的早期预防和临床治疗提供参考依据。 何玉洁 张淑 吕燕 孙林 吴巨龙 宋绍霞 孙文魁 张曼 李忠 赵怀龙 寇增强 刘倜关键词:全基因组 基因分型 2022-2023年山东省A(H1N1)pdm09流感病毒HA、NA基因变异特征分析 被引量:1 2024年 目的 了解山东省2022-2023流感监测年度分离的A(H1N1)pdm09亚型流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因的变异特征,为流感的防控提供科学依据。方法 从流感监测网络实验室分离的流感毒株中按地市随机选取14株A(H1N1)pdm09亚型流感毒株,以WHO推荐的当季疫苗株为参考进行全基因组测序,并采用荧光法开展神经氨酸酶抑制(neuraminidase inhibition,NI)实验以评估药物敏感性。结果 山东省2022-2023年度分离的A(H1N1)pdm09流感病毒属于6B.1A分支中的5a.2a进化簇,核苷酸序列比对分析显示,HA和NA基因与2021-2023年度北半球疫苗株A/Victoria/2570/2019的亲缘关系较为接近,同源性分别为98.5%~98.7%和98.8%~99.1%。氨基酸序列分析显示,HA蛋白有20个位点发生了氨基酸序列变异,并发现1株病毒可能发生抗原漂移,有3株病毒发生了HA蛋白糖基化位点的缺失。NA酶相关重要位点未发生变异。NI实验显示,所测流感毒株均对抗流感病毒药物敏感。结论 所监测毒株与疫苗株整体同源性很高,但氨基酸存在一定程度变异,今后有必要持续开展流感病毒基因变异特征监测以了解流感流行的风险,以及评价基因变异对流感疫苗和治疗药物效果的影响。 吴巨龙 张淑 何玉洁 孙林 宋绍霞 孙文魁 刘倜关键词:HA基因 NA基因 基因变异 2009年至2021年我国9省份发热呼吸道症候群病例中人偏肺病毒感染情况及流行特征分析 被引量:9 2021年 目的阐明我国发热呼吸道症候群(FRS)监测病例中人偏肺病毒(HMPV)感染情况及病毒流行特征,为我国HMPV引起呼吸道相关疾病的临床诊治和疾病防控提供重要基线数据。方法选取2009年1月至2021年6月在我国9省份(北京、河北、吉林、山东、陕西、新疆、安徽、广东、湖南)的FRS监测病例作为研究对象。收集病例临床、流行病学信息并采集呼吸道标本,应用实时荧光定量PCR对样本进行HMPV核酸检测。结果共11660例样本进行了HMPV检测,HMPV阳性病例数为296例,阳性检出率为2.54%。其中218例病例为单一HMPV感染,78例病例同时检出了含HMPV 2种或2种以上病毒,占HMPV阳性病例数的26.35%。<5岁儿童是HMPV主要发病人群,检出率为3.10%。在<5岁儿童中,含HMPV混合感染中肺炎病例的比例高于单一HMPV感染病例。HMPV全年均可检出,病毒流行主要以冬、春季为主,3月份是HMPV流行高峰。结论HMPV是引起儿童急性呼吸道感染的重要病原之一,病毒流行具有明显的季节性。HMPV可引起单独感染,也可与其他呼吸道病毒合并感染,合并HMPV感染可能增加儿童肺炎的风险。 崔爱利 谢智博 余鹏博 朱汝南 马英伟 向星宇 张丽萍 朱云 吴巨龙 郜振国 张荣波 韩光跃 许文波 张燕关键词:人偏肺病毒感染 中国首起由SARS-CoV-2 VOC/Gamma引起的本土聚集性疫情溯源调查分析 被引量:1 2022年 目的对山东省威海荣成市报告一起新型冠状病毒肺炎疫情进行溯源调查。方法对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测阳性者及其密切接触者进行调查,对9株病毒毒株进行全基因组测序及遗传进化分析;从国内外两个源头,人、物和环境三个方面开展溯源调查。结果本次疫情累计报告15例无症状感染者,包括某水产品加工公司车间13例,感染率为21.67%(13/60);感染者的同村邻居2例(夫妻关系)。初次检出的6例感染者为从事清除鱿鱼内脏首道工序工人,首次咽拭子核酸检测Ct值为15~29,病毒载量高,疑为同源一次性暴露所致。9株病毒毒株全基因组序列高度同源,属于VOC/Gamma(P.1.15进化分支),与我国既往本土和输入病例均不同源;与智利上传的2021年5月5—26日采样的6条病毒序列高度同源。溯源结果显示,该公司近14日内使用过2021年5—6月在智利、阿根廷附近海域捕获的鱿鱼原材料;库存原材料、产品及其外包装多处采样核酸检测呈阳性。结论本次疫情是我国首起由SARS-CoV-2 VOC/Gamma引起的本土聚集性疫情,可能为南美洲地区2021年5—6月期间流行的VOC/Gamma通过冷冻鱿鱼传入我国。 于洋 张吉玉 马海 韩扬 程立肖 田雪莹 吴巨龙 李岩 张玉薇 陈德颖 李继钊 张金波 陶泽新 寇增强 徐爱强关键词:新型冠状病毒 聚集性疫情