黄国明
- 作品数：16 被引量：14H指数：3
- 供职机构：延边大学农学院更多>>
- 发文基金：吉林省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛瑟氏泰勒虫与牛卵形巴贝斯虫多重PCR检测方法的建立被引量：3
- 2013年
- 根据GenBank上登录的牛瑟氏泰勒虫内转录间隔子基因(ITS基因)和牛卵形巴贝斯虫CCTη基因序列,设计合成了2对特异性引物。通过对反应条件进行优化,建立了同时检测牛瑟氏泰勒虫和牛卵形巴贝斯虫的多重PCR方法。结果显示,用该多重PCR方法可同时扩增出2条与试验设计相符的1 020bp(牛瑟氏泰勒虫)和537bp(牛卵形巴贝斯虫)的特异性条带,对牛瑟氏泰勒虫和牛卵形巴贝斯虫的最低检出限分别为10pg/μL和1pg/μL。用该方法对采自吉林省珲春市的23份临床样本进行检测,结果牛瑟氏泰勒虫的阳性率为69%,牛卵形巴贝斯虫的阳性率为52%,混合感染率为52%。表明,建立的多重PCR方法可用于临床诊断。
- 王轶男钱年超黄国明胡诗悦薛书江贾立军张守发
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫多重PCR
- 牛源犬新孢子虫MAG1基因的克隆及原核表达
- 为了解牛源犬新孢子虫MAG1基因的生物学特性。本试验应用PCR技术扩增牛源犬新孢子虫MAG1基因,将PCR产物连接到pMD18-T Simple载体,构建pMD18-T-MAG1克隆质粒,PCR鉴定、酶切鉴定及测序分析后...
- 焦石贾立军薛书江刘明明黄国明张守发
- 关键词：犬新孢子虫原核表达
- 文献传递
- 牛卵形巴贝斯虫巢式PCR诊断方法的建立及初步应用
- 根据GenBank上发表的牛卵形巴贝斯虫CCTη基因序列设计合成2对巢式PCR引物,建立牛卵形巴贝斯虫巢式PCR诊断方法,对该方法的最佳反应条件进行了筛选,并进行了特异性、敏感性及临床样本检测试验。结果表明,建立的巢式P...
- 黄国明贾立军薛书江张守发
- 关键词：PCR
- 文献传递
- 犬新孢子虫MAG1与IFN-γ融合基因重组质粒的构建及原核共表达被引量：2
- 2013年
- 根据发表的犬新孢子虫MAG1基因序列(EF580924.1)和Bov IFN-γ基因序列(M29867.1)设计2对引物。分别以犬新孢子虫基因组DNA和pET28α-IFN-γ重组质粒为模板,通过重叠延伸拼接聚合酶链式反应(SOE-PCR)将犬新孢子虫MAG1基因与IFN-γ基因拼接,构建pMD18-T-MAG1-IFN-γ克隆质粒和pGEX-4T-MAG1-IFN-γ重组表达质粒,将鉴定正确的pGEX-4T-MAG1-IFN-γ重组表达质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western-blotting分析表达产物。结果表明,SOE-PCR扩增获得双基因融合片段大小为1 491bp,与GenBank中发表的MAG1(EF580924.1)和IFN-γ(M29867.1)核苷酸序列的同源性为99%;MAG1-IFN-γ融合基因表达蛋白大小为82 000,具有较好的反应原性。
- 焦石贾立军张立霞钱年超刘明明黄国明张守发
- 关键词：犬新孢子虫IFN-Γ
- 犬新孢子虫MAG1与IFN-γ融合基因重组质粒的构建及真核共表达
- 本试验根据发表的犬新孢子虫MAG1基因序列(EF580924.1)和Bov IFN-γ基因序列(M29867.1),设计两对引物。分别以犬新孢子虫基因组DNA和pet28a-IFN-γ重组质粒为模板,通过重叠延伸拼接聚合...
- 焦石贾立军张立霞钱年超刘明明黄国明张守发
- 关键词：犬新孢子虫基因重组质粒IFN
- 文献传递
- 牛瑟氏泰勒虫二温式PCR诊断方法的建立及应用
- 为寻求一种能快速、特异、敏感地诊断牛瑟氏泰勒虫病的方法,本试验根据GenBank上的牛瑟氏泰勒虫MPSP基因(GQ180198.1)设计合成了1对特异性的引物T1、T2,建立了检测牛瑟氏泰勒虫病的二温式PCR。该方法与犬...
- 钱年超贾立军薛书江张影黄国明张守发
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫PCR特异性
- 文献传递
- 牛源犬新孢子虫MAG1基因的克隆及原核表达
- 2012年
- 为了解牛源犬新孢子虫MAG1基因的免疫学特性,根据MAG1基因序列,设计并合成了1对用于扩增MAG1基因的引物。将PCR扩增产物连接到原核表达载体pGEX-4T-2上,转化大肠杆菌BL21(DE3)中。SDS-PAGE结果显示,MAG1在大肠杆菌中获得了较高水平的表达,表达蛋白的分子质量为65ku。Western-blot结果显示,表达的MAG1蛋白可被牛源犬新孢子虫阳性血清特异性识别,表明该MAG1蛋白具有较好的反应原性。本研究为新孢子虫病疫苗及诊断试剂盒的研究奠定了基础。
- 焦石贾立军薛书江刘明明黄国明张守发
- 关键词：犬新孢子虫原核表达
- 犬新孢子虫MAG1与IFN-γ融合基因重组质粒的构建及原核共表达
- 本试验根据发表的犬新孢子虫MAG1基因序列(EF580924.1)和Bov IFN-γ基因序列(M29867.1),设计两对引物。分别以犬新孢子虫基因组DNA和pet28a-IFN-γ重组质粒为模板,通过重叠延伸拼接聚合...
- 焦石贾立军张立霞刘明明黄国明张守发
- 关键词：犬新孢子虫基因重组质粒IFN
- 文献传递
- 牛瑟氏泰勒虫p23、p33重组蛋白亚单位疫苗联合免疫效果评价
- 牛瑟氏泰勒虫病是一种危害养牛业健康发展的重要血液原虫病，患畜主要表现高热、贫血、黄疸等临床特征。目前，对该病的防控尚无有效的方法。本试验根据牛瑟氏泰勒虫MPSP的p23（EU573168.1）和p33(DQ078264....
- 黄国明
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫亚单位疫苗联合免疫重组蛋白
- 文献传递
- 牛瑟氏泰勒虫二温式PCR检测方法的建立及应用被引量：2
- 2011年
- 为建立一种能快速、特异、敏感地检测牛瑟氏泰勒虫的方法,根据GenBank中的牛瑟氏泰勒虫MPSP基因(GQ180198.1)设计合成了1对特异性引物,建立了检测牛瑟氏泰勒虫的二温式PCR方法。该方法与犬新孢子虫、猪支原体和弓形虫RH株均无交叉反应,能检测到的最低DNA含量为1.7pg/μL。结果表明,该二温式PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性。本研究为牛瑟氏泰勒虫的快速检测提供了一种方法。
- 钱年超贾立军薛书江张影黄国明张守发
- 关键词：瑟氏泰勒虫
