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颜景斌: 作品数：75 被引量：215H指数：7; 供职机构：上海市儿童医院更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金上海市现代生物与新药产业发展基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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线粒体突变引起的早发型糖尿病的定量基因诊断研究: 目的建立线粒体杂合突变的定量基因诊断技术平台，并对线粒体A3243G突变引起的早发型糖尿病样本开展定量基因诊断.方法为了鉴定PCR-RFLP、DNA测序、高分辨率熔解曲线(HRM)分析和焦磷酸测序(Pyro)技术等四...; 颜景斌张蓉熊灿巩芷娟王从容贾伟平黄淑帧曾凡一; 关键词：高分辨率熔解曲线焦磷酸测序; 文献传递

转基因胎儿细胞在母鼠外周血中存在情况的分析: 产前基因诊断是控制遗传病发生的一项重要措施,用于诊断的胎儿细胞主要通过羊水、绒毛细胞中分离得到,但这种途径可能对孕妇和胎儿造成一定的损伤.Walknowska等在1969年首次证实母体外周血中存在胎儿细胞,它们可以作为产...; 颜景斌王舒巩芷娟黄淑帧; 关键词：转基因胎儿细胞外周血; 文献传递

人转铁蛋白重组载体的构建及其表达调控的研究被引量：2: 2008年; 转铁蛋白(TF)是一种具有重要生理功能的糖蛋白,对它的开发利用具有重要的经济和社会效益。为探讨高效表达人转铁蛋白(hTF)的可行性及可能的调控机理,本文克隆得到了兔转铁蛋白启动子(RP promoter),并构建了以pcDNA3.1(-)为骨架的由RP启动hTF表达的重组载体,转染大鼠肝脏细胞株BRL-3A和小鼠乳腺上皮细胞株HC-11细胞分析了hTF表达情况,并进一步筛选得到了两个稳定表达hTF的细胞克隆。在细胞培养液中加入不同剂量的5-杂氮胞苷(5-azadC),分析甲基化修饰对基因表达的影响。结果显示,兔转铁蛋白启动子能成功启动hTF的表达;而且5-aza-dC能进一步提高了hTF表达水平,且提高的程度和5-aza-dC的剂量成正相关,但是不同克隆hTF表达升高程度不一样。结果说明hTF的表达受到甲基化修饰影响。; 潘树标颜景斌任兆瑞; 关键词：转铁蛋白甲基化

基因座控制区HS2、HS3元件调控的GFP报道基因转基因小鼠及其子代体内的表达行为研究: 颜景斌任兆瑞陈美珏方彧聃吴昊李颖; 1、GFP的组织特异性表达：成年的HS2/GFP转基因小鼠中，GFP在各红系组织，如骨髓、脾脏、外周血中均有表达，尤其以骨髓中表达量最高；而在肝脏、肺、肾脏、脑等非红系组织中，没有检测到GFP的表达。表明HS2元件及1....; 关键词：; 关键词：转基因小鼠

牛催乳素基因在乳腺组织中特异性表达的研究: 曹新曾溢滔颜景斌奚鹰郭曙欣; 1、通过Long PCR克隆得到了牛催乳素基因的全序列（9389bp），已在GenBank登录（登录号为AF426315）。　　2、将获得的含有牛催乳素基因组全序列的表达载体转染真核细胞COS-7后通过RT-PCR技术获...; 关键词：; 关键词：乳腺组织特异性表达

红系特异元件调控的GFP报道基因在不同转基因小鼠中表达行为的研究: 为了研究红系特异元件HS2或HS3及?珠蛋白基因启动子指导的GFP报道基因在不同转基因小鼠体内的表达行为,我们将本所先前研究中已经获得的带有人红系特异调控元件HS2及?珠蛋白启动子、GFP报道基因的原代转基因小鼠（命名为...; 颜景斌肖艳萍陈美珏王舒任兆瑞曾溢滔; 关键词：GFP 双重杂合子外源基因; 文献传递

重大出生缺陷研究中的样本采集与管理: 2011年; 出生缺陷是一种不正常发育引起的患儿先天性结构或功能异常。中国出生缺陷人群数量较大,这个问题在经济发展相对落后的农村更为严重。由于大多数出生缺陷发生机制还不明确,尚无有效治疗手段,故进行相关机制研究尤为重要。为更好地开展重大出生缺陷的研究,必须优化实验的顶层设计,并在样本采集、保存、运输等环节做到规范化、标准化,保证样本的质量。同时采用现代信息系统对样本进行集约化管理,力求达到资料完整、查询方便、信息共享,为后续研究打下坚实基础。; 颜景斌黄淑帧

外源基因在转基因小鼠中整合状况的分析被引量：1: 2006年; 目的研究外源基因在转基因小鼠及其家系中的整合状况。方法采用PCR、定量PCR和荧光原位杂交(FISH)的方法对原代转基因小鼠中外源人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)基因的整合和嵌合情况进行分析。使用PCR、直接测序法鉴定整合的外源基因多拷贝的连接方向和连接方式。结果7个家系中F0-8、F0-10和F0-11的后代中阳性个体比例明显低于50%,3个原代小鼠DNA中hFⅨ基因拷贝数分别只有子代中的66.2%、18.8%和28.3%。F0-11小鼠各脏器中嵌合比差异极大,且未见胚系特异性分布。不同个体间整合拷贝数差异极大,最少的F0-69为单拷贝,最多的F0-10有43个拷贝。而整合位点分析发现外源基因在随机分布中仍呈现一定的趋向性。PCR和测序结果证明所有小鼠中外源基因多拷贝均为头尾连接,连接的机制以粘性末端介导的连接为主,F0-13中还存在同源序列配对、断裂、修复介导的头尾连接。结论在整合有hFⅨ基因的转基因小鼠中多拷贝外源基因多以粘性末端介导的头尾连接方式整合在染色体的某些特定区域。; 颜景斌朱怡文肖艳萍王舒任兆瑞黄淑帧曾溢滔; 关键词：转基因小鼠外源基因拷贝数嵌合体

3种 DNA 甲基化定量分析方法的比较被引量：3: 2015年; 目的：比较特定基因区域 DNA 甲基化检测方法的优缺点。方法采用焦磷酸测序、克隆测序和DNA 甲基化芯片等3种 DNA 甲基化检测方法，对7例唐氏综合征和5例正常对照样本的 PRDM8内含子7 CpG 岛中的部分序列进行甲基化检测。从准确度、重复性和精确度（分辨率）等方面来比较3种方法，探讨哪种方法更适合特定基因的 DNA 甲基化水平定量检测。结果①焦磷酸测序可在单碱基水平定量检测样本的甲基化水平，结果重复性好，准确度高，而且能发现样本中 CpG 位点甲基化水平变化的规律；②克隆测序也可在单碱基水平定量检测样本的甲基化水平，但结果重复性较差，无法发现 CpG 位点甲基化水平变化的规律；③甲基化芯片可通过所测区域的两个探针来判断样本间甲基化水平的差异，但无法在单碱基水平定量检测样本的甲基化水平；④上述3种方法检测结果之间存在一定的差异，但是样本间甲基化水平总体趋势基本一致。此外，唐氏综合征样本的甲基化水平高于正常对照样本。结论焦磷酸测序准确度高、重复性好、费用较低、操作较为简单快捷，更为适合在单碱基水平检测特定基因区域的 DNA 甲基化水平。; 路兆宁周在威马晴雯颜景斌; 关键词：焦磷酸测序克隆测序 DNA 甲基化修饰

神经肌肉疾病基因治疗的研究进展: 2022年; 神经肌肉疾病(neuromuscular diseases,NMD)是一类以运动单位受损、运动耐力下降、肌力减退为主要表现的中枢及周围神经疾病。长期以来,神经肌肉疾病的治疗手段主要是对症治疗,但仅能缓解症状,无法根治。腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)载体是经过基因工程改造过的转基因载体,由于其安全性好、免疫原性低、表达时间长,可以感染分裂细胞和非分裂细胞等特点,在基因治疗和疫苗研究中得到广泛应用。CRISPR/Cas9基因编辑系统由型CRISPR细菌免疫系统改进而来,具有靶向精确、脱靶率低、细胞毒性低等特点,是目前应用最为广泛的基因编辑工具。本综述总结了几种常见神经肌肉疾病的最新基因治疗进展,着重讨论了基于AAV载体和CRISPR/Cas9系统的基因治疗在NMD治疗中的潜在价值以及相应的风险。; 周鹏颜景斌; 关键词：神经肌肉疾病基因治疗

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